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云芝糖肽介导活化的人外周血单个核细胞体外抗乙肝病毒作用

作　者: 许林
导　师: 吴超
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 云芝糖肽 乙肝病毒 HepG2.2.15细胞
分类号: R512.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 28次
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内容摘要


研究目的：中药云芝糖肽(PSP)作为一种免疫调节剂,已经广泛应用于慢性乙型肝炎及肿瘤等免疫紊乱或免疫功能低下的疾病中。但对云芝糖肽免疫调节机制及作用原理的研究不充分；本实验采用PSP体外与健康者的外周血单个核细胞(PBMC)共培养,观察经PSP作用后的PBMC对HepG2.2.15细胞分泌HBV的影响,以探讨PSP体外对乙肝病毒的抑制作用的机制。研究方法：无菌条件下采集健康人肝素抗凝外周静脉血,淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),与10mg/ml的云芝糖肽10μl共培养,分为两组：PBMC组；PSP+PBMC组。培养72h之后,将经云芝糖肽体外处理的PBMC按1：1的比例与HepG2.2.15细胞一同孵育,分为4组：第1组：未处理组(未经PSP处理的PBMC+HepG2215细胞组)；第2组：处理组(经PSP处理后的PBMC+HepG2215细胞组)；第3组：PSP组(PSP+HepG2215细胞组)；第4组：空白对照组(HepG2215细胞组)。4天之后收集培养上清,分装保存于-20℃备用,采用雅培化学发光微粒免疫分析(CMIA)定量检测上清中HBsAg、HBeAg的分泌,采用实时荧光定量PCR法检测培养上清中HBV-DNA载量。结果：云芝糖肽与HepG2.2.15细胞共培养组的HBsAg、HBeAg、HBV-DNA抑制率与对照组无明显差异；云芝糖肽本身不能直接抑制HBV复制。而经云芝糖肽介导活化的PBMC却能显著减少HepG2.2.15细胞的HBsAg、HBeAg的分泌；其中对HBsAg的抑制作用处理组和未处理组的差异具有统计学意义,而对HBeAg的作用,处理组的抑制率高于未处理组,但无明显统计学差异。云芝糖肽介导活化的PBMC对HepG2.2.15的HBV-DNA无明显抑制作用。结论：云芝糖肽在体外可通过活化外周血单个核细胞,显著的减少HepG2.2.15细胞对HBsAg、HBeAg的表达从而抑制HBV复制；但云芝糖肽对HepG2.2.15细胞HBVDNA的复制无明显抑制作用；

全文目录


中文摘要  7-8
英文摘要  8-9
前言  9-11
正文  11-20
  第一部分 理论研究  11-14
    1. 中医对乙型肝炎邪正关系的认识  11-12
    2. 慢乙肝治疗的相关进展  12-14
  第二部分 实验研究  14-20
    1. 实验材料  14-15
    2. 实验方法  15-17
    3. 统计学分析  17
    4. 实验结果  17-20
讨论  20-24
结论  24-25
存在问题  25-26
参考文献  26-29
附录  29-36
  综述  29-35
  缩略词表  35-36
攻读硕士学位期间取得的学术成果  36-37
致谢  37

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病 > 病毒传染病 > 病毒性肝炎 > 乙型肝炎
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