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地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞P2Y_1受体表达水平及TNF-α分泌影响的初步研究
作 者: 施维维
导 师: 阮怀珍
学 校: 第三军医大学
专 业: 神经生物学
关键词: 脊髓背角 星形胶质细胞 P2Y1受体 地塞米松 TNF-α
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
疼痛对人类的健康危害甚大。脊髓背角对伤害性信息的传递和调制发挥重要作用。星形胶质细胞在中枢神经系统中广泛分布,参与结构和功能维持、免疫反应以及神经疾病的发病等病理生理过程。研究表明,星形胶质细胞与疼痛有关,脊髓胶质细胞的激活是疼痛发生和持续的关键因素,同时与中枢痛觉过敏的产生与维持密切相关。以往研究已发现,疼痛的发生和维持与嘌呤类P2受体有关,嘌呤类P2Y受体参与伤害性信息传递。本实验室曾俊伟等已经证实,脊髓背角星形胶质细胞表达P2Y1受体,P2Y1受体激活能引起炎性致痛因子TNF-α的分泌增加。地塞米松作为临床常用的糖皮质激素,目前研究多集中于它抑制炎性因子分泌而产生镇痛作用,但机制尚不十分清楚。地塞米松能否通过介导P2Y1受体抑制脊髓背角星形胶质细胞TNF-α的分泌?需要进一步研究。本实验通过纯化培养大鼠脊髓背角星形胶质细胞,观察不同浓度地塞米松对其P2Y1受体表达的影响,及地塞米松对ADPβs激活后的背角星形胶质细胞P2Y1受体表达的影响,并通过其对TNF-α分泌的改变推测可能的机制。方法:培养并纯化大鼠脊髓背角星形胶质细胞,免疫组织化学观察背角星形胶质细胞P2Y1受体表达水平的变化;ELISA技术检测背角星形胶质细胞TNF-α的分泌。结果:第一部分:1.大鼠脊髓背角星形胶质细胞的培养与纯化,免疫组织化学鉴定细胞类型。结果表明,脊髓背角星形胶质细胞纯度在98%以上。2.地塞米松呈剂量依赖性抑制脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体的表达;糖皮质激素受体阻断剂(RU486)特异性阻断糖皮质激素受体后,可拮抗地塞米松对背角星形胶质细胞P2Y1受体表达的抑制作用。3.地塞米松呈剂量依赖性抑制脊髓背角星形胶质细胞TNF-α的分泌。RU486特异性阻断糖皮质激素受体后,可拮抗地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞TNF-α分泌的抑制作用。第二部分:1.ADPβs激活脊髓背角星形胶质细胞,呈剂量依赖性上调P2Y1受体的表达,在终浓度为100μmol/L时P2Y1受体表达最多,并促进背角星形胶质细胞TNF-α分泌;P2Y1受体阻断剂(MRS2179)特异性阻断P2Y1受体后,可拮抗ADPβs对P2Y1受体表达及TNF-α分泌的促进作用。2.ADPβs激活脊髓背角星形胶质细胞,不同浓度地塞米松可呈剂量依赖性的拮抗ADPβs对背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α分泌的促进作用。结论:1.地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α的分泌均有抑制作用。2. ADPβs激活背角星形胶质细胞可以使P2Y1受体表达上调。3.地塞米松可抑制激活的脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体的表达及TNF-α的分泌。综上所述,地塞米松可能通过抑制P2Y1受体表达和TNF-α的分泌起到提高痛阈的作用;亦可能通过介导P2Y1受体抑制炎性因子TNF-α的分泌,说明地塞米松在疼痛状态下起到了镇痛作用。
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全文目录
英文缩写一览表 4-5 英文摘要 5-7 中文摘要 7-9 论文正文 地塞米松对脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及 TNF-α分泌影响的初步研究 9-45 前言 9-11 第一部分 地塞米松抑制脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF—α的分泌 11-22 材料与方法 11-15 实验结果 15-19 小结 19-20 讨论 20-22 第二部分 地塞米松抑制激活后脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF—α的分泌 22-34 第一节 ADPβs 促进脊髓背角星形胶质细胞P2Y1受体表达和TNF-α分泌 22-28 材料与方法 22-24 实验结果 24-27 小结 27-28 第二节 地塞米松抑制激活后星形胶质细胞P2Y1受体表达及TNF-α的分泌 28-34 材料与方法 28-29 实验结果 29-31 小结 31-32 讨论 32-34 全文总结 34-35 致谢 35-36 照片 36-42 参考文献 42-45 文献综述一 P2Y1 受体在中枢神经系统疼痛的研究进展 45-57 参考文献 52-57 在读期间发表的文章 57
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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