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人体拓扑异构酶Ⅰ、微管蛋白和DNA的原子力显微镜成像研究
作 者: 孟荣华
导 师: 刘志国
学 校: 东北林业大学
专 业: 生药学
关键词: 原子力显微镜 人体拓扑异构酶I DNA 微管蛋白
分类号: TH742
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
1、气相和液相条件下在云母表面对人体DNA拓扑异构酶I的原子力显微镜成像研究采用原子力显微镜(AFM)在气相和液相条件下观察了重组的人体DNA拓扑异构酶I(TOPOI)的形貌。低浓度(0.3U%μl)的TOPOI在云母表面吸附2h后,在液相和气相下成像,均可扫描得到完全分散的单个TOPOI,对气相和液相下扫描的图像进行了比较,结果显示两种环境下扫描得到的酶的形貌有所不同。高浓度(4U/μl)的TOPOI在吸附1.5h后可以在云母表面形成一层单分子蛋白膜,该蛋白膜具有良好的稳定性和平整度。2、人体拓扑异构酶I与DNA结合后在云母表面的成像研究采用Ni2将DNA固定在云母的表面,在气相条件下运用原子力显微镜对其进行了成像研究,对单个DNA分子进行了高分辨的观察。当使用高浓度DNA分子进行成像时,观察到了DNA网络结构和DNA膜状结构。TOPOI与DNA分子结合后,TOPOI分子可以连同DNA一起吸附到云母表面。3、微管蛋白聚合现象研究采用原子力显微镜和紫外可见分光光度计对微管蛋白聚合现象进行了研究,采用原子力显微镜在液相下扫描观察到了吸附在APTES-mica表面的微管;采用紫外可见分光光度计检测了微管蛋白聚合的动力学曲线。4、DNA在石墨表面的原子力显微镜成像研究采用原子力显微镜(AFM)、傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对胡敏酸在HOPG表面的吸附进行了研究,采用傅里叶变换红外的检测确认了胡敏酸在HOPG表面的吸附。通过原子力显微镜观察了胡敏酸水溶液及其在酸性及碱性条件下、以及它与无机盐作用后在HOPG表面的吸附现象,显微成像研究表明胡敏酸可在HOPG表面产生成膜现象。以胡敏酸膜为模板,可以吸附DNA分子。采用原子力显微镜观察到了吸附在胡敏酸膜表面的DNA分子。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-7 1 绪论 7-16 1.1 原子力显微镜(AFM)技术概述 7-13 1.1.1 原子力显微镜的原理 7 1.1.2 原子力显微镜的仪器结构 7-8 1.1.3 原子力显微镜的基本成像模式 8-9 1.1.4 力曲线 9-11 1.1.5 探针 11 1.1.6 原子力显微镜在药学方面的应用 11-12 1.1.7 使用原子力显微镜进行机械加工的应用 12-13 1.2 人体DNA拓扑异构酶I简介 13 1.3 微管蛋白(Tubulin)简介 13-14 1.4 胡敏酸简介 14 1.5 论文研究目的及意义 14-16 2 人体DNA拓扑异构酶I在气相和液相下的云母表面的原子力显微镜成像研究 16-25 2.1 引言 16 2.2 实验部分 16-23 2.2.1 材料和方法 16-17 2.2.2 实验仪器 17 2.2.3 结果与讨论 17-23 2.3 本章小结 23-25 3 人体拓扑异构酶I与DNA结合后在云母表面的成像研究 25-33 3.1 引言 25 3.2 实验部分 25-26 3.2.1 试验材料 25 3.2.2 试验仪器 25-26 3.3 DNA在云母表面的AFM成像 26-30 3.3.1 气相中采用AFM成像DNA分子 26-27 3.3.2 云母表面形成DNA网络和DNA膜的AFM成像 27-30 3.4 TOPOI与DNA结合后在云母表面的AFM成像研究 30-32 3.5 本章小结 32-33 4 微管蛋白聚合现象研究 33-37 4.1 引言 33 4.2 实验部分 33-36 4.2.1 试验材料 33 4.2.2 实验仪器 33 4.2.3 聚合后的微管在云母表面的成像试验 33-36 4.2.4 微管蛋白活性的紫外检测 36 4.3 本章小结 36-37 5 DNA在石墨表面的原子力显微镜成像研究 37-46 5.1 引言 37 5.2 实验部分 37-45 5.2.1 试验试剂 37 5.2.2 实验仪器 37-38 5.2.3 傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)试验结果 38 5.2.4 胡敏酸在HOPG表面吸附现象的AFM试验结果与分析 38-44 5.2.5 DNA结合在胡敏酸膜上的AFM试验结果与分析 44-45 5.3 本章小结 45-46 结论 46-49 参考文献 49-55 攻读学位期间发表的学术论文 55-56 致谢 56-57
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中图分类: > 工业技术 > 机械、仪表工业 > 仪器、仪表 > 光学仪器 > 显微镜
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