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凋亡抑制基因Livin在白血病细胞中的表达及临床意义的研究

作　者: 吕涛
导　师: 管洪在；吴春梅
学　校: 青岛大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: Livin基因 白血病 RT-PCR
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 26次
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内容摘要


目的：探讨Livin基因在急、慢性白血病病人白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：收集白血病患者骨髓细胞,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测41例不同时期AL病人和22例慢性白血病病人白血病细胞Livin基因mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照。结果：急性白血病(AL)病人白血病细胞Livin基因mRNA阳性表达率为53.7%,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)细胞Livin基因mRNA阳性表达率分别为53.8%、53.6%,二者比较差异无显著性,但均高于正常对照组Livin基因mRNA的表达(10.0%)(精确概率检验：P=0.035、0.017)。初治和复发AL病人白血病细胞Livin基因mRNA阳性表达率分别为52.4%、85.7%,明显高于正常对照组(精确概率检验：P=0.025、0.0036)。缓解组病人Livin基因mRNA表达阳性率为15.4%,明显低于初治组和复发组(精确概率检验：P=0.0043、0.0296),而与正常对照组相比差异无统计学意义。白细胞≥50×109/L的急性白血病病人其Livin基因mRNA的阳性表达率(80.0%)(8/10)明显高于白细胞数<50×109/L的急性白血病病人(35.5%)(11/31)(χ2=4.368,P<0.05),其表达水平也明显高于后者(T=6.5, P<0.05)。ALL, ANLL病人及正常对照组Livin/β-actin半定量结果的中位数(四分位数间距)分别为0.171(0.102)、0.087(0.117)、0.010,ALL、ANLL细胞Livin基因mRNA表达水平均高于正常对照组(H=20.22,d=14.25、14.61,P<0.05)。慢性粒细胞白血病(CML)病人中慢性期、加速期和急变期病人白血病细胞Livin mRNA阳性表达率分别为8.3%(1/12)、75.0%(3/4)和100.0%(2/2),急变期和加速期Livin mRNA阳性表达率均高于正常对照组(P=0.045、0.040)和慢性期病人(P=0.033、0.026)。慢性期病人和正常对照组比较差异不显著。慢性期、加速期、急变期病人及正常对照组Livin/β-actin半定量结果的中位数(四分位数间距)分别是0.014、0.112(0.096)、0.136(0.073)、0.010,急变期、加速期病人Livin基因mRNA表达水平均高于正常对照组(H=21.35,d=14.42、15.73,P<0.05)和慢性期病人(H=20.67, d=13.87、13.72,P<0.05)。4例慢性淋巴细胞白血病(CLL)病人均未检测到Livin基因mRNA表达。结论：①Livin基因过度表达参与了白血病的发病,并且是AL预后不良的危险因素；②Livin可作为急性白血病复发及预后判断的指标之一；③Livin基因表达在白血病细胞的增殖分化和(或)抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致白血病细胞对化疗药物不敏感的原因之一,可作为其治疗的一个潜在靶点。

全文目录


摘要  2-4
Abstract  4-7
引言  7-8
第一章 材料与方法  8-13
  1.1 研究对象  8
  1.2 主要试剂及仪器  8-10
    1.2.1 试剂  8-9
    1.2.2 溶液配制  9
    1.2.3 仪器  9-10
  1.3 半定量RT-PCR法检测Livin mRNA  10-12
    1.3.1 标本处理  10
    1.3.2 总RNA提取  10-11
    1.3.3 RNA浓度检测  11
    1.3.4 RNA完整性检测  11
    1.3.5 cDNA合成  11
    1.3.6 PCR扩增  11-12
    1.3.7 PCR产物分析  12
  1.4 统计学处理  12-13
第二章 结果  13-20
  2.1 急性白血病病人Livin基因mRNA的表达  13
  2.2 慢性白血病病人Livin基因mRNA的表达  13
  2.3 AL病人不同时期Livin基因mRNA的表达  13-14
  2.4 Livin基因mRNA表达与外周血WBC计数关系  14
  2.5 Livin基因mRNA表达与外周血血小板计数关系  14
  2.6 Livin基因mRNA表达与性别、血红蛋白的关系  14-20
第三章 讨论  20-23
第四章 结论  23-24
参考文献  24-26
综述  26-44
  参考文献  39-44
攻读学位期间的研究成果  44-45
致谢  45-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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