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富含纤溶酶豆豉冻干粉的溶栓作用研究

作　者: 江侧燕
导　师: 郭勇
学　校: 华南理工大学
专　业: 发酵工程
关键词: 豆豉纤维蛋白纤溶酶溶栓
分类号: TS264.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 62次
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内容摘要

豆豉是我国传统发酵豆制品,自古以来药食兼用,但一般只用作调味品。充分研究和挖掘豆豉及豆豉纤溶酶的功能对于豆豉的发展具有重要的意义,然而国内外在这方面的研究较少。本论文研究了本实验室制备的富含纤溶酶豆豉冻干粉的体内外溶栓作用和安全性,为其进一步的研究奠定基础。为研究富含纤溶酶豆豉冻干粉的体外溶栓作用,进行了体外血块溶解实验,结果表明,20.0%豆豉提取液血块溶解率为95.07±0.86%,具有体外溶栓作用。在另一实验中,通过加热灭活豆豉纤溶酶的处理组血块溶解率为12.48±2.43%,不具体外溶栓的作用,初步确定该冻干粉中的溶栓物质为豆豉纤溶酶或不耐热小分子。同样,在豆豉纤溶酶浓缩液对体外血块的溶解作用实验中,经透析除去小分子物质的豆豉纤溶酶浓缩液各剂量组均可溶解体外血块,而处理组仍不具有溶栓作用,故富含纤溶酶豆豉冻干粉具有体外溶栓作用,其溶栓物质为豆豉纤溶酶。作为体内溶栓作用研究的前提,采用最大耐受量试验法对富含纤溶酶豆豉冻干粉急性毒性进行了评价。结果表明,14d内小鼠无一死亡,该冻干粉对小鼠急性毒性的非致死性指标无影响。其对小鼠的经口急性毒性剂量大于16g/kg·bw,属于无毒级别。由此初步判定,人食用富含纤溶酶豆豉冻干粉是安全无毒的。为研究富含纤溶酶豆豉冻干粉的体内作用,本论文测定了其对正常动物体内凝血系统的影响。结果显示,富含纤溶酶豆豉冻干粉不影响APTT和PT,可延长TT。说明该冻干粉不影响正常大鼠内源性凝血系统和外源性凝血系统,而作用于抗凝或纤溶系统。此外,本论文以还构建了大鼠腹主动脉血栓模型,探讨了富含纤溶酶豆豉提取液对该模型的影响。结果显示,富含纤溶酶豆豉提取液能减少血栓重量,使凝血酶时间延长,使纤维蛋白(原)降解产物增加,并不影响血浆纤维蛋白原水平,病理切片显示其可减轻血栓堵塞血管的程度。因而富含纤溶酶豆豉提取液具有体内溶栓作用,在水解纤维蛋白的同时不会造成出血的副作用。因此,富含纤溶酶豆豉冻干粉具有安全性和体内外溶栓作用,具有进一步的研究价值。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-14
第一章绪论  14-35
  1.1 血栓及血栓性疾病  14-20
    1.1.1 血栓性疾病  14
    1.1.2 血栓的形成机理  14-16
    1.1.3 凝血系统与瀑布学说  16
    1.1.4 纤维蛋白的降解  16-19
    1.1.5 血栓性疾病的治疗  19-20
  1.2 溶栓剂的研究进展  20-26
    1.2.1 溶栓剂的发展  20-21
    1.2.2 纤溶酶的研究  21-22
    1.2.3 部分溶栓剂的研究状况  22-26
  1.3 豆豉概述  26-29
    1.3.1 大豆与豆豉  26-27
    1.3.2 豆豉的生产工艺  27
    1.3.3 豆豉的营养保健功能  27-29
  1.4 豆豉纤溶酶研究进展  29-33
    1.4.1 豆豉纤溶酶的发酵工艺  29-30
    1.4.2 豆豉纤溶酶活性的测定  30
    1.4.3 豆豉和豆豉纤溶酶的安全性  30-31
    1.4.4 豆豉纤溶酶的药效试验  31-33
  1.5 本论文的立题依据和研究内容  33-35
第二章富含纤溶酶豆豉冻干粉体外溶栓作用  35-44
  2.1 材料  35-36
    2.1.1 菌种  35
    2.1.2 试剂  35
    2.1.3 仪器设备  35-36
    2.1.4 培养基  36
  2.2 方法  36-39
    2.2.1 富含纤溶酶豆豉冻干粉的制备  36
    2.2.2 豆豉纤溶酶粗提液的制备  36-37
    2.2.3 豆豉纤溶酶的灭活  37
    2.2.4 豆豉纤溶酶浓缩液的制备  37
    2.2.5 豆豉纤溶酶酶活力的测定  37-38
    2.2.6 富含纤溶酶豆豉冻干粉体外溶栓作用  38
    2.2.7 富含纤溶酶豆豉冻干粉中溶栓物质的初步确定  38
    2.2.8 豆豉纤溶酶浓缩液对体外血块的溶解作用  38
    2.2.9 数据统计分析与处理  38-39
  2.3 结果与分析  39-42
    2.3.1 豆豉纤溶酶活力的测定  39-40
    2.3.2 富含纤溶酶豆豉冻干粉体外溶栓作用  40
    2.3.3 富含纤溶酶豆豉冻干粉中溶栓物质的初步确定  40-41
    2.3.4 豆豉纤溶酶浓缩液对体外血块的溶解作用  41-42
  2.4 讨论  42
  2.5 本章小结  42-44
第三章富含纤溶酶豆豉冻干粉急性毒性  44-49
  3.1 材料  44-45
    3.1.1 菌种和培养基  44
    3.1.2 仪器设备  44-45
    3.1.3 实验动物  45
  3.2 方法  45
    3.2.1 实验依据  45
    3.2.2 富含纤溶酶豆豉冻干粉的制备  45
    3.2.3 受试物的处理  45
    3.2.4 富含纤溶酶豆豉冻干粉经口急性毒性  45
    3.2.5 数据统计分析与处理  45
  3.3 结果与分析  45-47
    3.3.1 富含纤溶酶豆豉冻干粉对小鼠体重变化的影响  45-46
    3.3.2 富含纤溶酶豆豉冻干粉急性毒性观察  46-47
  3.4 讨论  47-48
  3.5 本章小结  48-49
第四章富含纤溶酶豆豉冻干粉对正常大鼠凝血系统的影响  49-54
  4.1 材料  49-50
    4.1.1 菌种和培养基  49
    4.1.2 仪器设备  49-50
    4.1.3 主要试剂  50
    4.1.4 实验动物  50
  4.2 方法  50-51
    4.2.1 富含纤溶酶豆豉冻干粉的制备  50
    4.2.2 富含纤溶酶豆豉冻干粉酶活的测定  50
    4.2.3 富含纤溶酶豆豉冻干粉对大鼠凝血系统的影响  50-51
    4.2.4 APTT、PT和TT值的测定  51
    4.2.5 数据统计分析与处理  51
  4.3 结果与分析  51-52
    4.3.1 富含纤溶酶豆豉冻干粉对大鼠血浆APTT的影响  51
    4.3.2 富含纤溶酶豆豉冻干粉对大鼠血浆PT的影响  51-52
    4.3.3 富含纤溶酶豆豉冻干粉对大鼠血浆TT的影响  52
  4.4 讨论  52-53
  4.5 本章小结  53-54
第五章富含纤溶酶豆豉冻干粉对大鼠腹主动脉血栓模型的影响  54-65
  5.1 材料  54-55
    5.1.1 菌种和培养基  54
    5.1.2 仪器设备  54-55
    5.1.3 主要试剂  55
    5.1.4 实验动物  55
  5.2 方法  55-57
    5.2.1 富含纤溶酶豆豉提取液的制备  55
    5.2.2 大鼠腹主动脉血栓模型的构建  55-56
    5.2.3 富含纤溶酶豆豉提取液对腹主动脉血栓模型的影响  56
    5.2.4 大鼠血栓重量的测定  56
    5.2.5 大鼠血浆凝血酶时间的测定  56
    5.2.6 大鼠血浆纤维蛋白（原）降解产物的检测  56-57
    5.2.7 大鼠血浆纤维蛋白原含量的测定  57
    5.2.8 富含纤溶酶提取液对大鼠腹主动脉血栓模型影响的病理学观察  57
    5.2.9 数据统计分析与处理  57
  5.3 结果与分析  57-63
    5.3.1 富含纤溶酶豆豉提取液对大鼠血栓重量的影响  57-59
    5.3.2 富含纤溶酶豆豉提取液对凝血酶时间的影响  59
    5.3.3 富含纤溶酶豆豉提取液对纤维蛋白（原）降解产物的影响  59-60
    5.3.4 富含纤溶酶豆豉提取液对纤维蛋白原含量的影响  60-62
    5.3.5 富含纤溶酶豆豉提取液对大鼠腹主动脉血栓模型影响的病理学观察  62-63
  5.4 讨论  63-64
  5.5 本章小结  64-65
结论与讨论  65-67
参考文献  67-74
附录  74-75
攻读硕士学位期间取得的研究成果  75-76
致谢  76

富含纤溶酶豆豉冻干粉的溶栓作用研究

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