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云南普洱茶茶褐素主要化学成分的分离及结构鉴定

作　者: 杨大鹏
导　师: 龚加顺
学　校: 云南农业大学
专　业: 农产品加工与贮藏工程
关键词: 普洱茶茶褐素化学组成
分类号: TS272
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 130次
引　用: 1次
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内容摘要

本文以云南普洱茶茶褐素为研究对象,通过有机溶剂萃取,甲醇分级,柱层析分离纯化,薄层层析制备,制备色谱分离,对普洱茶茶褐素主要成分进行分离纯化。并通过酸降解对普洱茶茶褐素的化学成分进行鉴定,为进一步阐明茶褐素分子结构提供了依据。研究结果表明:1.不同微生物发酵生产的普洱茶,其茶褐素含量以及茶褐素中蛋白质、多糖、茶黄素和茶红素含量都有明显差异。2.依次通过有机溶剂萃取,乙醇沉淀以及甲醇分级可以对茶褐素进行有效地分离以及纯化。使用不同浓度的甲醇/水溶液对茶褐素进行分级,其中以60%甲醇水浸出物和水不溶物得率最高,分别为25.59%和32.36%。对不同浓度的甲醇/水溶液分级得到的茶褐素进行紫外-可见光谱分析,结果表明60%甲醇水溶液得到的茶褐素的吸收值普遍高于其他分级产物。3.应用硅胶粉（100-200目）作为填料可以有效的对茶褐素进行分离纯化,采用不同浓度的甲醇/水溶液梯度洗脱可以把茶褐素分成若干部分,其中以60%甲醇水溶液得率最高,约占总得率的50%左右。4.把经过硅胶柱层析后的60%甲醇水洗脱样品进行红外光谱分析,结果表明:该样品为多羟基物质,含有烷基、羧基及苯环。对该样品进行单糖、氨基酸以及元素分析,结果表明:该样品中主要的糖单位为葡萄糖;其氨基酸含量为3.53%;其中C元素含量为34.21%,H元素含量为5.34%,N元素含量为1.15%,S元素含量为0.32%。5.通过稀盐酸对茶褐素中水不溶部分进行酸解,酸解产物应用薄层层析和高效液相分离纯化后得到一化合物。对该化合物进行质谱以及核磁共振分析,结果表明该化合物可能为C₃H₈Na₂O₉P₂.。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
缩略词表  9-10
1 引言  10-20
  1.1 云南普洱茶的发展历史  10-11
  1.2 普洱茶的定义  11
  1.3 普洱茶发酵过程中的微生物  11-12
  1.4 茶叶中的色素  12-14
    1.4.1 茶叶中的天然色素  12-13
    1.4.2 加工中形成的色素  13-14
  1.5 茶黄素的研究进展  14-16
  1.6 茶红素的研究进展  16-18
  1.7 茶褐素的研究进展  18-19
  1.8 本研究的内容及目标  19-20
    1.8.1 研究意义  19
    1.8.2 研究内容  19-20
    1.8.3 研究目标  20
2 材料与方法  20-28
  2.1 研究材料  20
  2.2 主要试剂  20-21
  2.3 实验仪器  21-22
  2.4 研究方法  22-28
    2.4.1 茶褐素的提取及纯化  22-23
      2.4.1.1 茶褐素提取条件的选择  22
      2.4.1.2 茶褐素粗品的分级  22
      2.4.1.3 茶褐素薄层层析条件的选择  22
      2.4.1.4 茶褐素纯化条件的选择  22-23
    2.4.2 茶褐素不同分级纯化物的显色反应  23
    2.4.3 茶褐素中多糖含量的测定  23-24
    2.4.4 茶褐素中蛋白质含量的测定  24-25
    2.4.5 茶色素含量的测定  25-26
    2.4.6 茶褐素化学成分的分析  26
      2.4.6.1 氨基酸分析  26
      2.4.6.2 矿物质元素分析  26
    2.4.7 茶褐素光谱学特征分析  26-27
      2.4.7.1 茶褐素样品的紫外、可见光谱分析  26
      2.4.7.2 茶褐素红外光谱分析  26-27
      2.4.7.3 茶褐素质谱分析  27
      2.4.7.4 茶褐素核磁共振分析  27
    2.4.8 茶褐素中的化合物的分离鉴定  27
      2.4.8.1 茶褐素组分的液相色谱鉴定  27
      2.4.8.2 茶褐素化合物的核磁共振分析  27
    2.4.9 茶褐素水解产物分离纯化及结构鉴定  27-28
      2.4.9.1 茶褐素水解方法  27
      2.4.9.2 茶褐素水解产物的分离纯化  27
      2.4.9.3 茶褐素水解产物的结构鉴定  27-28
3 结果与分析  28-58
  3.1 不同微生物发酵样中茶褐素的化学组成分析  28-31
    3.1.1 不同发酵样中茶褐素的含量差异  28-29
    3.1.2 不同发酵样中茶褐素的多糖和蛋白质含量  29-30
    3.1.3 不同发酵样中茶褐素的茶黄素和茶红素含量  30-31
  3.2 茶褐素的提取工艺  31-33
    3.2.1 茶褐素粗品的提取路线  31-32
    3.2.2 不同有机试剂萃取对普洱茶茶汤的影响  32-33
  3.3 茶褐素粗品的甲醇分级  33-39
    3.3.1 不同浓度甲醇分级得率  33-34
    3.3.2 甲醇分级样品的显色反应  34-36
    3.3.3 甲醇分级样品中的多糖含量  36
    3.3.4 高效液相色谱检测样品纯度  36-39
  3.4 茶褐素的纯化方法的建立  39-52
    3.4.1 纸层析法分离纯化  39
    3.4.2 薄层层析法分离纯化  39
    3.4.3 聚酰胺吸附层析  39-40
    3.4.4 大孔吸附树脂层析  40
    3.4.5 硅胶柱层析  40-52
  3.5 茶褐素化学组成的分析  52-58
    3.5.1 茶褐素水解产物的分离  52
    3.5.2 茶褐素水解产物HPLC 分析  52-55
    3.5.3 茶褐素水解产物的结构分析  55-58
4 讨论  58-61
  4.1 茶褐素类物质的提取  58-59
  4.2 茶褐素的光谱学性质  59-60
  4.3 茶褐素的化学组成  60
  4.4 茶褐素结构复杂性  60-61
5 结论  61-62
参考文献  62-67
致谢  67

云南普洱茶茶褐素主要化学成分的分离及结构鉴定

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