学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

大肠杆菌对有机溶剂的耐受性研究

作　者: 王永乐
导　师: 王敏
学　校: 天津科技大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 大肠杆菌有机溶剂细胞膜脂肪酸有机溶剂耐受性
分类号: R378
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 36次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

在有机溶剂／水两相体系生物转化技术应用中,有机溶剂对细胞的毒害是其中的重要障碍。研究有机溶剂对细胞的毒害及微生物对有机溶剂的耐受机制,对改造、选育耐有机溶剂的菌株,增强在生物转化中的应用有着重大意义。本文以大肠杆菌(Escherichia coli) K12为模式菌株,研究了在有机溶剂／水两相系统中,有机溶剂甲苯、四氯化碳、正己烷、邻苯二甲酸二乙酯对E.coli K12生长和E.coli K12细胞膜的影响,初步探讨了E.coli K12对有机溶剂的耐受机制。通过研究甲苯、四氯化碳、正己烷、邻苯二甲酸二乙酯对E.coli K12生长的影响可以得到以下结果：①E.coli K12对四种logP值不同的有机溶剂的耐性不同：对正己烷耐性较强,依次是邻苯二甲酸二乙酯、四氯化碳,对甲苯的耐受性最弱。②大肠杆菌对不同浓度的有机溶剂耐受性不同：在1.5%、1.0%、0.3%(v／v)的甲苯、四氯化碳、正己烷、邻苯二甲酸二乙酯存在下,可以看到明显的OD值变化的差异。③在0.3%的甲苯、四氯化碳等溶剂存在下,大肠杆菌存活率随作用时间延长而降低,甲苯尤其明显。在添加0.3%的甲苯30mmin后,大肠杆菌的存活率仅为24.8%。采用罗丹明123(Rh123)、二乙酸荧光素(FDA)荧光法测定在0.3%的甲苯、四氯化碳等有机溶剂存在下,大肠杆菌细胞膜电位、细胞膜通透性的变化。结果发现在添加0.3%的四氯化碳30mmin后,Rh123和FDA荧光强度下降了16.3%、34.5%,即相当于膜电位下降了16.3%,膜渗透性增加了34.5%。当培养液中添加0.3%的甲苯时,FDA荧光强度下降65.9%；表明细胞膜完整性受到严重破坏。用气相色谱法研究了大肠杆菌细胞膜脂肪酸组成的变化,发现在邻苯二甲酸二乙酯、四氯化碳存在的情况下,细胞膜脂肪酸组成中饱和脂肪酸的含量增加。尽管甲苯对大肠杆菌的抑制作用最强,但甲苯对膜脂肪酸组成影响却不明显。脂肪酸饱和度的增加改变了细胞膜的流动性,增强了对有机溶剂的耐受性。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-8
1 前言  8-17
  1.1 生物转化概述  8-10
    1.1.1 生物转化的概念  8
    1.1.2 微生物生物转化  8
    1.1.3 生物转化在药物合成中的应用  8-9
    1.1.4 生物转化中的新技术、新领域  9-10
  1.2 有机介质中完整细胞生物转化  10-12
    1.2.1 完整细胞生物转化的形式  10-11
    1.2.2 有机相催化的优势和缺点  11
    1.2.3 有机溶剂的选择  11-12
  1.3 有机溶剂对微生物的影响  12-15
    1.3.1 有机溶剂对细胞毒害机理的研究  12-13
    1.3.2 细胞对有机溶剂耐受机理的研究及进展  13-15
  1.4 大肠杆菌对有机溶剂耐受性研究进展  15
  1.5 立题背景  15-16
  1.6 主要研究内容及思路  16-17
2 材料与方法  17-23
  2.1 材料  17-18
    2.1.1 菌株  17
    2.1.2 培养基  17
    2.1.3 相关溶液  17
    2.1.4 主要药品  17-18
    2.1.5 主要仪器  18
  2.2 实验方法  18-23
    2.2.1 E.coli K12的培养  18-19
    2.2.2 有机溶剂添加时间对菌体生长的影响  19
    2.2.3 采用单染色法观察有机溶剂对大肠杆菌形态的影响  19
    2.2.4 采用活菌计数法考查有机溶剂对大肠杆菌存活率的影响  19
    2.2.5 脂肪酸的提取  19-20
    2.2.6 分析方法  20-23
3 结果与讨论  23-45
  3.1 有机溶剂对E.coli K12生长的影响  23-33
    3.1.1 E.coli K12的生长特性  23
    3.1.2 E.coli K12的菌体形态  23-25
    3.1.3 有机溶剂对E.coli K12生长的影响  25-27
    3.1.4 有机溶剂对E.coli K12存活率的影响  27-28
    3.1.5 有机溶剂对E.coli K12菌体形态的影响  28-30
    3.1.6 有机溶剂对E.coli K12代谢活性的影响  30-31
    3.1.7 金属阳离子与E.coli K12的有机耐受性  31-32
    3.1.8 小结  32-33
  3.2 有机溶剂对E.coli K12细胞膜的影响  33-35
    3.2.1 有机溶剂对E.coli K12细胞膜电位的影响  33-34
    3.2.2 有机溶剂对E.coli K12细胞膜通透性的影响  34
    3.2.3 小结  34-35
  3.3 有机溶剂对E.coli K12细胞膜脂肪酸组成的影响  35-45
    3.3.1 正己烷对E.coli K12细胞膜脂肪酸组成的影响  35-38
    3.3.2 邻苯二甲酸二乙酯对E.coli K12细胞膜脂肪酸组成的影响  38-40
    3.3.3 四氯化碳对E.coli K12细胞膜脂肪酸组成的影响  40-42
    3.3.4 甲苯对E.coli K12细胞膜脂肪酸组成的影响  42-43
    3.3.5 小结  43-45
4 结论  45-46
5 展望  46-47
6 参考文献  47-55
7 攻读硕士学位期间发表论文情况  55-56
8 致谢  56-57
附录  57-61

大肠杆菌对有机溶剂的耐受性研究

内容摘要

全文目录

相似论文