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产抗真菌活性物质海洋细菌的研究

作　者: 詹萍
导　师: 梁静娟
学　校: 广西大学
专　业: 微生物学
关键词: 海洋细菌白色念珠菌鉴定发酵
分类号: R371
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

从采集于广西北部湾、南海海域的样品中共分离到海洋微生物菌株1，300株，其中有抗真菌活性的菌株为136株，占总数的10.46％，活性较强的菌株有56株。对56株高活性菌进行复筛，得到29株菌有较广谱的抗真菌作用，对3种或3种以上真菌有抑制活性；抗细菌活性试验发现，有36株菌对细菌有不同程度的抑制作用。其中，JIV-49具有广谱的抗菌作用，对所有供试菌株均具有抑制作用，具有广阔的开发前景。对12株抗真菌活性较高、抑菌谱较广的菌(JIV-49、JIII-37、JII-34、JIIs-4、JIIs-40、G01-94、Is1-2、3-2、3-3、Gs3-17、IOs4-7和IOs4-18)进行了形态及生理生化特征鉴定，结果表明这12株菌具有丰富的多样性。但由于海洋独特的生存环境，海洋微生物具有与陆地微生物不同的生长特性，因此仅凭菌株形态及生理生化特征很难对菌株种类进行准确的区分。应用分子生物学手段对JIV-49、JIII-37的16S rDNA进行全序列分析，结果表明JIV-49和JIII-37分别属于假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)和拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis sp.)，其中JIV-49是一株严格意义上的海洋微生物菌株。菌株JIV-49遗传稳定性好，对盐的耐受能力较高。对其发酵条件和培养基组成进行了较深入的研究，结果发现，菌株JIV-49利用BB培养基(牛肉膏2.5％，KBr 0.01％，盐浓度6％)为发酵培养基，初始pH控制在7.5，发酵温度在30℃，接种量为7％，摇床转速为180 r／min，在75 ml／500 ml的锥形瓶中通气培养发酵96 h，产生的活性物质活性最强。对菌株JIV-49产生的抗真菌活性物质的理化性质进行了初步探讨。研究表明，该活性物质具有较强的热稳定性，在中性和弱碱性环境能稳定存在，在pH≤4的强酸条件下活性物质的抗菌活性完全丧失；活性物质光稳定性好，易于贮藏。

全文目录

摘要  2-4
ABSTRACT  4-8
前言  8-21
  一抗真菌药物的现状  8-10
    1 真菌感染的严重性  8-9
    2 引起真菌感染的常见真菌  9
    3 抗真菌药物研究的紧迫性  9-10
    4 从海洋微生物中筛选抗真菌药物的可行性  10
  二海洋微生物的研究进展  10-19
    1 海洋微生物的特点与优势  10-11
    2 海洋微生物的多样性  11-12
    3 海洋微生物活性物质的来源  12-13
    4 海洋微生物的分离培养  13-14
    5 海洋微生物活性物质的研究进展  14-19
  三本课题研究的意义  19-21
第一章海洋微生物的分离及抗真菌活性菌株的筛选  21-36
  一材料与方法  21-25
    1 材料  21-22
    2 方法  22-25
  二实验与分析  25-33
    1 海洋微生物的分离  25-27
    2 海洋微生物菌株抗真菌活性的初筛  27-30
    3 海洋微生物菌株抗真菌活性的复筛及抗细菌活性的研究  30-33
  三小结与讨论  33-36
第二章菌株的鉴定及16S rDNA序列的测定  36-62
  一材料与方法  36-47
    1 材料  36-39
    2 方法  39-47
  二实验与分析  47-60
    1 形态、生理生化鉴定  47-57
    2 16S rDNA序列测定  57-60
  三小结与讨论  60-62
第三章菌株JIV-49的初步研究  62-84
  一材料与方法  62-68
    1 材料  62-64
    2 方法  64-68
  二结果与分析  68-80
    1 菌株JIV-49生长特征的研究  68-69
    2 菌株JIV-49发酵条件的研究  69-78
    3 菌株JIV-49生物活性物质理化性质的研究  78-80
  三小结与讨论  80-84
总结与展望  84-87
参考文献  87-98
附录  98-101
致谢  101-102
在读期间发表学术论文情况  102

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