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丙戊酸钠与5-氟尿嘧啶联合作用对绒癌JEG-3细胞株的影响
作 者: 曹丹
导 师: 张怡
学 校: 中南大学
专 业: 妇产科学
关键词: 人绒毛膜癌 丙戊酸钠 5-氟尿嘧啶 组蛋白去乙酰基酶 细胞株
分类号: R737.33
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 48次
引 用: 1次
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内容摘要
目的:1.探讨丙戊酸钠(sodium valproate, VPA)对绒癌细胞的增殖抑制作用;2.研究VPA对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)抗肿瘤的增效作用;3.根据VPA与5-FU联合作用对凋亡相关基因survivin mRNA表达的影响,初步探讨二者联用的抗肿瘤机制。方法:体外培养人绒癌JEG-3细胞株,分为VPA组(浓度为0.25,0.50,1.00,2.00,4.00,8.00,16.00mmol/L)、5-FU组(浓度为2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μg/mL)、VPA+5-FU组(VPA1.00mmol/L处理后分别予5-FU2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160. 0μg/mL)和对照组(药物浓度为0mmol/L)。(1)四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;(2) Annexin V/碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色及流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;(3)逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)检测各组细胞中survivin基因的转录水平。结果:1.VPA组JEG-3细胞增殖抑制率为4.11±0.47%-89.33±1.21%,比对照组明显升高(P<0.05),该作用具有时间-浓度依赖性;细胞凋亡率(4.73±0.14%)亦较对照组(0.94±0.06%)明显升高(P<0.05)。2. VPA+5-FU组细胞的增殖抑制率为40.58±0.47%-97.61±0.40%,凋亡率为38.44±0.36%-56.97±0.61%,均比同浓度5-FU组(抑制率37.41±0.53%-61.96±0.92%,凋亡率8.31±0.13%-26.39±0.35%)显著提高(P<0.05)。3. VPA+5-FU组细胞survivin基因的相对表达量为0.32±0.07-0.79±0.06,均比同浓度5-FU组(0.84±0.07-1.23±0.12)明显降低(P<0.05)。结论:1.VPA对人绒癌JEG-3细胞具有抑制增殖及诱导凋亡的作用,其增殖抑制作用具有时间-浓度依赖性;2.较低浓度的VPA能增强5-FU对人绒癌JEG-3细胞的抗肿瘤作用;3.VPA可能通过协同减少survivin基因的表达从而增强5-FU的抗肿瘤作用。
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全文目录
中文摘要 4-6 英文摘要 6-9 缩略词 9-10 第一章 前言 10-12 第二章 材料及方法 12-20 2.1 实验材料 12-14 2.1.1 细胞 12 2.1.2 器材 12-13 2.1.3 试剂 13-14 2.2 实验方法 14-19 2.2.1 细胞培养 14 2.2.2 实验分组 14 2.2.3 细胞增殖抑制实验(MTT法) 14-15 2.2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 15-16 2.2.5 RT-PCR检测各组细胞中survivin基因的表达 16-19 2.3 统计学处理 19-20 第三章 结果 20-27 3.1 JEG-3细胞的培养 20 3.2 VPA对JEG-3细胞增殖的影响 20-22 3.3 VPA对JEG-3细胞凋亡的影响 22 3.4 VPA+5-FU组与5-FU组细胞增殖情况的比较 22-24 3.5 VPA+5-FU组与5-FU组细胞凋亡情况的比较 24-26 3.6 survivin基因的表达情况 26-27 第四章 讨论 27-32 4.1 VPA对绒癌JEG-3细胞的影响 27-28 4.2 VPA与5-FU的联合抗肿瘤作用 28-29 4.3 VPA与5-FU的联合作用对survivin基因的影响 29-30 4.4 小结 30-32 第五章 结论 32-33 参考文献 33-38 综述 38-52 致谢 52
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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