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Nemo-like kinase(NLK)的表达变化与脑创伤和脑胶质瘤的相关性的实验研究及其作用机制的初步探讨

作 者: 李震
导 师: 崔岗
学 校: 苏州大学
专 业: 神经外科
关键词: 创伤性脑损伤 Nemo-like kinase 高分化PC12细胞 谷氨酸盐 细胞凋亡 颅内肿瘤 胶质瘤 Nemo-like kinase 胶质瘤细胞株 预后
分类号: R651.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:研究Nemo-like kinase(NLK)在大鼠脑损伤后发挥的作用,并进一步在细胞水平研究NLK在脑损伤后的作用机制。方法:健康雄性S-D大鼠,随机分成手术组、假手术组和正常组。手术组以Logan等的方法建立大鼠创伤模型。假手术组只打开骨瓣不损伤硬膜,其余手术步骤同手术组。运用免疫印迹方法检测大鼠脑组织中NLK,Caspase-3的表达。运用免疫荧光方法分析NLK在大鼠脑组织中的细胞定位情况。然后在神经元凋亡模型中,通过在细胞内过表达NLK,用CCK-8 ,TUNEL分析和免疫印迹的方法研究NLK在细胞凋亡中所发挥的作用。结果:手术组的NLK在脑损伤之后表达先减少其后渐渐恢复正常。免疫荧光结果表明NLK定位于神经元细胞中。Caspase-3在脑损伤之后的表达变化与NLK的表达变化呈相反的变化趋势。谷氨酸盐能明显诱导高分化的PC12细胞凋亡,并且这种效应具有明显的浓度和时间的依赖性,NLK的过表达能明显地减少谷氨酸盐诱导的细胞凋亡。结论:1、大鼠脑损伤后NLK的表达变化与caspase-3的表达变化呈相反趋势,提示NLK在大鼠脑损伤后发挥了一定的作用。2、NLK发挥作用与神经元细胞的生物学行为有关,它具有抑制神经元凋亡的作用。目的:观察胶质瘤组织中Nemo-like kinase蛋白的表达变化,探讨其临床意义,并进一步在细胞水平研究NLK在脑胶质瘤中的作用机制。方法:收集南通大学附属医院2000年1月–2006年12月间经病理确诊的胶质瘤组织,采用免疫组化法和免疫印记的方法检测NLK在70例胶质瘤的表达情况,按照免疫组化的结果以30.2%为分界,将<30.2%者定为低表达,≥30.2%为高表达,将患者分为两组进行Kaplan–Meier生存相关分析。在胶质瘤细胞株中通过在细胞内过表达NLK,用CCK-8和免疫印迹的方法研究NLK在胶质瘤细胞中所发挥的作用。结果:免疫组化及免疫印记的结果表明,NLK的表达和胶质瘤的级别负相关;Kaplan–Meier生存相关分析结果显示,NLK表达较低的患者预后较差,而高表达者的生存期明显延长。在胶质瘤细胞株中的相关研究表明,过表达NLK能明显地增加胶质瘤细胞的凋亡,使得Caspase-3的表达明显增多。NLK能够通过影响Caspase-3的表达而起到抗癌作用。结论:1、NLK的表达和胶质瘤的级别负相关并且它的表达变化和病人的预后具有明显的相关关系。2、NLK能够通过影响Caspase-3的表达而起到抗癌作用。3、NLK在胶质瘤的病理生理中起了重要的作用,可作为胶质瘤预后的一个指标,通过上调NLK表达的基因治疗,有可能应用于临床。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-10
第一部分 Nemo-like kinase(NLK)的表达变化与脑创伤的关系及其分子机制  10-27
  前言  10
  材料和方法  10-16
  结果  16-22
  讨论  22-23
  结论  23-24
  参考文献  24-27
第二部分 Nemo-like kinase(NLK)在胶质瘤中的临床表 达和生物学特性的相关性研究  27-39
  前言  27-28
  材料和方法  28-29
  结果  29-33
  讨论  33-35
  结论  35-36
  参考文献  36-39
综述 Nemo-like kinase(NLK)与中枢神经系统疾病  39-50
  参考文献  46-50
缩略词表  50-51
攻读硕士期间公开发表的论文  51-52
致谢  52-53

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