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在抗肿瘤药物使用过程中,合理的联合用药可以起到提高药效,降低毒副作用的目的,而监测化疗药物合并使用后的药代动力学,对抗肿瘤治疗水平的提高有重要意义。本实验旨在建立双波长高效液相色谱同时测定环磷酰胺(CTX)和顺铂(DDP)浓度的方法,并初步研究其在大鼠体内的药代动力学。Wistar大鼠(清洁级),体重200-220g,鼠龄6-8w,置于温度20-24℃,恒湿50%-60%,12h光照(08：00-20：00),12h黑暗,隔音的动物室内,自由摄食,饮水,适应上述环境1w后用于实验.第一组按3.0mg／kg尾静脉注射DDP；第二组按100mg／kg尾静脉注射CTX；第三组于尾静脉注射3.0mg/kgDDP+75mg/kgCTX,分别于给药前、给药后10mm,30min,1h,2h,4h,8h,10h,14h,20h,24h,48h,72h,96h取血0.5ml,取200μl大鼠血浆置于2.0ml具塞试管中,加入0.5%碳酸钠溶液200μl,混匀后再加入新配制的DDTC溶液100μl,混匀后置于37℃水浴中保温30min,取出冷却后加1000μl乙醚提取37℃水浴氮气流下除乙醚,残渣用流动相100μl溶解,取20μl进样。色谱柱Hypersil-ODS2,流动相为甲醇-水(80：20),紫外检测器在254nm和195nm检测顺铂和环磷酰胺浓度。环磷酰胺保留时间为5.15min,浓度线性范围0.5-10μg/ml,r=0.9999,检测线0.1μg/ml(S／N≥3)；顺铂保留时间为9.26min,浓度线性范围0.1-2.0μg/ml,r=0.9998,检测线0.01μg／ml(S／N≥3)。CP方案(CTX和DDP联合用药)的药动学曲线呈二室模型,CTX消除半衰期t1／2β由8.2h延长至13.5h,Vd由6.1(L·kg-1)增加至20.5(L·kg-1)；DDP的t1/2β由17.0h延长至29.8h,Vd由4.6(L·kg-1)增加至5.9(L·kg-1)。该实验对CP方案的药动学进行了初步研究,并与单一用药的药动学进行了比较验表明,从药动学参数可以看出,CP方案中CTX和DDP在动物体内吸收较快,吸收半衰期平均1.16h和0.72h,与单一用药在吸收方面差别不大；而两药的消除半衰期与单一用药相比明显延长,分别为13.5h和29.8h,(单一的CTX消除半衰期为7.2h,DDP为17h)这表明联合用药在动物体内消除速度下降,消除半衰期平均延长42.30%,存在显著性差异(P<0.01)。表观分布容积(Vd)大大提高,在一定程度上延长了两药的体内循环时间并提高了在动物体内生物利用度。CP方案中两药肾清除率(CL)小于单一用药,提示联合用药时应调整给药剂量和给药间隔,按经7.0个半衰期体内药量完全消除计算,顺铂在体内完全消除需2周时间,环磷酰胺需4天时间,故联合用药时治疗周期应间隔2周以上,并给予充分水化,以免发生药物蓄积性中毒。CP方案中CTX和DDP的Kl0分别下降了75%和60%,与单一用药存在显著性差异((P＜0.01)),表明联合用药时药物从中央室消除速率下降。K12、K21无显著变化。该实验结果表明,两药联合使用存在协同作用,使药物在体内代谢消除速度减慢,这可能与两药作用机制相同,竞争同一靶点有关,但同时也提示,应该关注毒副作用的可能增加。因此,在临床用药过程中血药浓度检测是非常必要的。
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