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唑来膦酸对原代成骨细胞、成纤维细胞增殖、分化及矿化的影响
作 者: 杨小萌
导 师: 韩金祥
学 校: 济南大学
专 业: 微生物与生化药学
关键词: 唑来瞵酸 成骨不全 成骨细胞 增殖 分化 矿化
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 17次
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内容摘要
目的:观察唑来膦酸(zoledronicacid,ZOL)对原代成骨成纤维细胞增殖、分化以及矿化的影响。方法:体外培养发育性髋关节脱位(Developmental Dysplasia of the Hip,DDH)及成骨不全(Osteogenesis imperfecta,OI)髂骨来源的成骨细胞、成纤维细胞,采用MTT法测定10-3M-10-13M浓度梯度下唑来膦酸对四种原代细胞增殖的影响;流式细胞检测10-8M,10-9M,10-10M唑来膦酸药物浓度对细胞周期的影响;ELISA检测10-8M,10-10M药物浓度对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;茜素红染色检测10-6M,10-8M,10-10M,10-12M药物浓度对成骨细胞矿化功能的影响;10-10M唑来膦酸培养21天后用RT-PCR技术检测成骨细胞ALP,OPG,OCN,COL1A2的基因表达。结果:唑来膦酸药物浓度范围为10-7M-10-10M对四种细胞增殖的抑制作用不明显;小于等于10-11M对细胞增殖有促进作用趋势,最高达到20%左右(P<0.05);10-8M-10-10M范围药物浓度对细胞周期的G1/G0期有阻滞作用,阻滞率在0-38%左右;四种原代细胞ALP水平在10-8M及10-10M实验药物浓度作用6天后与对照相比没有变化;10-10M药物浓度对原代成骨细胞的矿化没有促进作用;与正常对照相比10-10M药物浓度作用21天后,成骨细胞ALP,OPG,OCN,COL1A2的mRNA表达量是下调的。结论:唑来膦酸对原代成骨细胞增殖的影响有随剂量的变化而改变,在药物浓度大于等于10-10M时对骨矿化及成纤维细胞增殖没有促进作用,低的药物浓度或许会对成骨细胞的分化及矿化起到促进作用。
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全文目录
研究生导师和课题指导老师介绍 5-8 摘要 8-9 Abstract 9-10 符号说明 10-11 第一章 前言 11-21 1.1 成骨不全及其治疗方法 11-14 1.2 双膦酸盐药物及其作用机制 14-19 1.3 选题来源 19-21 第二章 OI 和 DDH 原代成骨细胞、成纤维细胞培养及鉴定 21-29 2.1 实验材料 21-22 2.2 实验仪器及耗材 22 2.3 实验方法 22-23 2.4 实验结果 23-25 2.5 讨论 25-27 2.6 结论 27-29 第三章 唑来膦酸对 OI 和 DDH 原代成骨细胞、成纤维细胞增殖、分化的影响 29-41 3.1 实验材料 29-30 3.2 实验仪器及耗材 30 3.3 实验方法 30-35 3.4 实验结果 35-38 3.5 讨论 38-39 3.6 结论 39-41 第四章 唑来膦酸对 OI 原代成骨细胞矿化的影响 41-53 4.1 实验材料 41-43 4.2 实验仪器及耗材 43 4.3 实验方法 43-47 4.4 实验结果 47-49 4.5 讨论 49-51 4.6 结论 51-53 结语 53-55 参考文献 55-63 综述 63-73 参考文献 69-73 攻读硕士学位取得的研究成果 73-75 致谢 75
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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