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幽门螺杆菌相关胃癌发生不同阶段Cx32，Cx43表达与甲基化研究

作　者: 王雨
导　师: 徐灿霞
学　校: 中南大学
专　业: 临床医学
关键词: 胃癌幽门螺杆菌 Cx32 Cx43 DNA甲基化
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)感染的慢性浅表性胃炎(Chronic superficial gastritis, CSG)→萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis, CAG)→肠上皮化生(Intestinal metaplasial, IM)-→非典型增生(Dysplasia,DYS)→胃癌(Gastric cancer, GC)五个不同阶段Cx32, Cx43mRNA表达变化规律及其与甲基化的关系。方法：经胃镜及病理证实的上述胃癌发生五个不同阶段且H.pylori感染的患者各24例及胃黏膜正常无H.pylori感染者(normal gastric mucose, NGM)24例的胃黏膜活检组织标本,采用real-time PCR法检测Cx32, Cx43mRNA表达；甲基化特异性PCR(Methylation-Sepcific PCR, MSP)、结合重亚硫酸盐测序法(Bisulfite Benomic Sequence, BSP)及MassArray检测Cx32, Cx43启动子区CpG岛甲基化程度。结果：(1)从H.pylori感染CSG→GC不同阶段,Cx32,Cx43mRNA的表达为逐渐降低趋势(P<0.05),GC阶段表达最低,从CAG→GC阶段表达降低与NGM比较差异均有统计学意义(P<0.05)；(2)从H.pylori感染CSG→GC不同阶段,Cx32, Cx43启动子甲基化程度为增加趋势(P<0.05),GC阶段甲基化程度最高,从CAG→GC阶段甲基化程度与NGM比较差异均有统计学意义(P<0.05);(3) Cx32, Cx43mRNA表达与其甲基化、GC发生阶段分别呈负相关(P<0.05); Cx32, Cx43甲基化与GC发生阶段呈正相关(P<0.001)。结论：H.pylori感染CAG→GC阶段Cx32, Cx43mRNA表达下降,向胃癌演进中呈逐渐降低趋势,其启动子高甲基化可能是H.pylori感染后Cx32, Cx43表达下降的重要机制。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
符号说明  10-11
1 绪论  11-13
2 材料与方法  13-25
  2.1 材料  13-17
    2.1.1 研究对象  13
    2.1.2 标本采集及处理  13-14
    2.1.3 主要实验引物、试剂及仪器  14-17
  2.2 实验方法  17-25
    2.2.1 H.pylori检测  17-18
    2.2.2 实时定量PCR(real-time PCR)检测Cx32,Cx43 mRNA表达  18-19
    2.2.3 检测H.pylori感染胃癌发生不同阶段Cx32,Cx43甲基化程度  19-24
    2.2.4 统计学分析  24-25
3 实验结果  25-34
  3.1 H.pylori感染胃癌发生不同阶段Cx32,Cx43 mRNA表达变化  25-27
    3.1.1 RNA质量控制图  25
    3.1.2 Cx32,Cx43 mRNA表达变化趋势  25-27
  3.2 H.pylori感染胃癌发生不同阶段Cx32,Cx43甲基化变化  27-32
    3.2.1 MSP检测结果  27-29
    3.2.2 BSP检测结果  29-30
    3.2.3 MassArray检测结果  30-32
  3.3 H.pylori感染胃癌发生不同阶段的Cx32,Cx43表达与甲基化相关关系  32-34
4 讨论  34-37
  4.1 Cx32,Cx43表达下降与胃癌发生发展密切相关  34-35
  4.2 Cx32,Cx43表达下降与H.pylori感染有关  35
  4.3 H.pylori感染胃癌发生不同阶段Cx32,Cx43 mRNA表达的变化  35
  4.4 Cx32,Cx43表达下降与其启动子甲基化的关系  35-37
5 结论  37-38
参考文献  38-42
综述  42-56
  参考文献  51-56
研究生期间主要成果目录  56-57
致谢  57

幽门螺杆菌相关胃癌发生不同阶段Cx32，Cx43表达与甲基化研究

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