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肝素结合表皮生长因子与卵巢癌细胞化疗敏感性

作　者: 汤小晗
导　师: 卢美松
学　校: 哈尔滨医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: HB-EGF EGFR 卵巢癌耐药
分类号: R737.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：探讨HB-EGF抑制剂CRM197逆转人卵巢癌敏感细胞A2780、紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol及顺铂耐药细胞A2780/CDDP耐药的作用和对EGFR信号通路的作用。方法：卵巢癌细胞经CRM197作用后，激光共聚焦显微镜双重免疫荧光染色法检测EGFR与HB-EGF配体结合情况；real-time RT-PCR检测细胞内MDR1mRNA、ERCC1mRNA的表达情况；Western blot检测MDR1和ERCC1蛋白的表达情况。结果：卵巢癌敏感细胞A2780、耐药细胞A2780/Taxol和A2780/CDDP经CRM197作用后，HB-EGF和EGFR蛋白表达水平明显下降(P<0.01)，MDR1mRNA、ERCC1mRNA和蛋白的表达水平明显下降(p＜0.01)。结论：CRM197可有效抑制HB-EGF、EGFR的表达从而抑制EGFR信号通路，并通过降低MDR1和ERCC1的表达增强卵巢癌亲本及耐药细胞对紫杉醇、顺铂的敏感性。

全文目录

中文摘要  6-7
Abstract  7-8
1、文献综述  8-19
  1.1 HB-EGF、EGFR、CRM1976  8-13
    1.1.1 EGFR  8-9
    1.1.2 HB-EGF 与卵巢癌  9-12
    1.1.3 CRM197 与卵巢癌  12-13
  1.2 HB-EGF 与卵巢癌耐药  13-14
  1.3 HB-EGF与顺铂  14-15
  1.4 HB-EGF与紫杉醇  15-16
  1.5 卵巢癌耐药机制  16-18
    1.5.1 多药耐药基因(MDR1)  16-17
    1.5.2 切除修复交叉互补基因（ERCC1）  17-18
  1.6 小结  18-19
2、前言  19-20
3、材料与方法  20-29
  3.1 实验材料  20-22
    3.1.1 细胞株  20
    3.1.2 主要试剂  20-21
    3.1.3 主要仪器  21-22
    3.1.4 常用试剂配制  22
  3.2 实验方法  22-29
    3.2.1 耐药细胞的诱导与培养  22-23
    3.2.2 细胞的分组与药物处理  23
    3.2.3 激光共聚焦显微镜双重免疫荧光染色检测 EGFR 与 HB-EGF 结合情况  23
    3.2.4 Real-time RT-PCR 检测 MDR1、ERCC1、EGFR mRNA 水平  23-26
    3.2.5 Western blot 检测 MDR1、ERCC1 蛋白表达  26-28
    3.2.6 统计学方法  28-29
4、结果  29-34
  4.1 激光共聚焦显微镜双重免疫荧光染色法检测 HB-EGF、EGFR  29
  4.2 Real-time RT-PCR 检测 MDR1、ERCC1 mRNA  29-33
  4.3 Western blot 检测 MDR1、ERCC1 蛋白表达  33-34
5、讨论  34-37
6、结论  37-38
8、参考文献  38-40
9、个人简历  40

肝素结合表皮生长因子与卵巢癌细胞化疗敏感性

内容摘要

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