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长双歧杆菌通过下调NLRP6炎症小体表达抑制PI-IBS回肠粘膜免疫

作　者: 刘娜
导　师: 侯晓华
学　校: 华中科技大学
专　业: 消化内科
关键词: 感染后肠易激综合征 NLRP6炎症小体白细胞介素-18长双歧杆菌旋毛虫
分类号: R574
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：研究NLRP6炎症小体是否参与PI-IBS发病，长双歧杆菌干预是否对NLRP6炎症小体信号通路有调节作用。方法：将40只NIH小鼠随机分为五组：2周正常对照组（NC-2W），感染后2周组（PI-2W），8周正常对照组（NC-8W），感染后8周组（PI-8W）和长双歧杆菌干预组（PI-B）。采用旋毛虫感染制造PI-IBS动物模型。NC-2W，PI-2W在旋毛虫感染两周后处死，NC-8W，PI-8W在感染后8周处死，PI-B在感染八周后再长双歧杆菌灌胃干预一周后处死，分别取出回肠末端组织，用免疫荧光标记检测NLRP6及其配体ASC、caspase-1的表达部位；采用western-blot方法检测CD172a，NLRP6及其配体ASC、CARD8、caspase-1，下游细胞因子IL-18，IL-1β的表达情况。每只小鼠处死前均做AWR评分。结果：1、内脏敏感性改变（AWR评分）： PI-2W和PI-8W组AWR评分在40mmHg和60mmHg压力下，与其对照组（NC-2W，NC-8W）比较显著升高（P＜0.05）；在20mmHg和80mmHg压力下，较其对照组没有显著性差异（P＞0.05）。PI-B组在40mmHg和60mmHg压力下与PI-8W组比较，AWR评分显著下降（P＜0.05）；在20mmHg和80mmHg压力下，较PI-8W组没有显著性差异（P＞0.05）。2、CD172a的表达情况：PI-2W组与NC-2W组比较，CD172a的表达水平显著升高（P<0.01）； PI-8W组与NC-8W组比较，CD172a的表达水平没有显著性差异（P>0.05）； PI-B组与PI-8W组比较，CD172a的表达水平没有显著性差异（P>0.05）。3、NLRP6及其重要配体表达部位：免疫荧光标记检测结果显示，NLRP6及其配体ASC、caspase-1均只在回肠组织黏膜层表达，其中在肠上皮中表达最丰富，且均为胞浆内表达，三者表达位置一致。4、NLRP6炎症小体相关蛋白的表达情况4.1NLRP6的表达情况：NLRP6在PI-2W组和PI-8W组的表达水平较其各自的正常对照组（NC-2W组和NC-8W组）均显著升高（P<0.05）；因为NC-2W和NC-8W组间没有显著性差异，所以可以将急性感染期和慢性感染期进行比较，结果显示NLRP6的表达水平在两组之间没有统计学差异（P>0.05）。而PI-B组NLRP6的表达水平较PI-8W组显著下降(P<0.05)。4.2NLRP6相关蛋白的表达情况：CARD8、ASC和caspase-1在PI-2W组的表达水平均较NC-2W组显著升高（P<0.05），PI-8W组较NC-8W组也均有显著升高（P<0.05）。三者的表达水平在NC-8W组与NC-2W组之间没有统计学差异（P>0.05）。PI-8W组和PI-2W组比较，三者的表达水平均没有统计学差异（P>0.05）。在PI-B组，CARD8、ASC和CASPASE-1的表达水平较PI-8W组均有显著性下降（P<0.05）。4.3NLRP6炎症小体下游细胞因子的表达情况：IL-18、IL-1β在PI-2W组的表达水平与NC-2W组均显著升高（P<0.05），但在PI-8W组仅IL-18较NC-8W组表达水平显著升高（P<0.05）。NC-8W组与NC-2W组比较，IL-18、IL-1β的表达水平无显著差异（P>0.05）。IL-18在PI-8W组的表达水平较PI-2W组显著下降（P<0.05），而IL-1β的表达水平在PI-8W组和PI-2W组间没有显著差异（P>0.05）。PI-B组IL-18的表达水平较PI-8W组亦有显著下降（P<0.05），而IL-1β无显著差异（P>0.05）。结论：NLRP6炎症小体信号通路参与了PI-IBS发病，长双歧杆菌干预对该信号通路具有负性调节作用。

全文目录

英文缩写词表  6-7
摘要  7-9
Abstract  9-12
引言  12-15
材料和方法  15-18
实验结果  18-23
讨论  23-27
参考文献  27-31
综述  31-41
  参考文献  38-41
致谢  41-42
附录一（攻读学位期间发表论文目录）  42

长双歧杆菌通过下调NLRP6炎症小体表达抑制PI-IBS回肠粘膜免疫

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