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VC及VE联合应用对红细胞保存质量的影响

作　者: 马海民
导　师: 王磊
学　校: 河北医科大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: MAP VC VE ROS MDA CAT Cu-Zn SOD 氧化应激
分类号: R457
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要


临床治疗过程中为患者输注红细胞是提高血液运氧能力，改善组织缺氧状态的一种重要方法。为了保证足够的红细胞供应，需要对其进行储存。但研究表明：红细胞在4℃时其代谢并没有完全停止，随着贮存时间的延长，红细胞会发生一系列生物化学与结构上的改变,被称之为红细胞贮存损伤。这些损伤是影响输注后红细胞生存和功能改变的主要原因。目前国内应用的MAP红细胞保存液中含有：葡萄糖、磷酸二氢钠加枸橼酸钠、枸橼酸、腺嘌呤、甘露醇与氯化钠；它可以起到防止红细胞溶血与凝血、为红细胞提供能量、调节和稳定溶液pH、维持渗透压的作用。尽管如此，随着红细胞保存时间的延长，储存损伤仍不可避免。氧化应激是导致红细胞储存损伤的重要机制之一。它是由活性氧族（reactive oxygen species：ROS)造成的。ROS的化学性质活泼，能氧化红细胞膜内的脂质及重要蛋白，改变胞膜的结构和功能，甚至引起红细胞的死亡。维生素C(Vitamin C,VC）又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。它不仅具有治疗坏血病、预防动脉硬化等作用；而且还具有较强的还原性，在体内可作为抗氧化剂防止自由基对人体的伤害。维生素E（Vitamin E，VE）是一种脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。维生素E除了具有促进性激素分泌、提高生育能力的作用外，它还具有保护红细胞、抗自由基氧化的作用。VC、VE均具有抗氧化作用。本研究向MAP保存液中加入VC及VE，观察VC与VE是否会对贮存过程中的红细胞形态、红细胞内过氧化水平及抗氧化酶系的活性产生影响。目的：本研究通过在悬浮红细胞内加入抗氧化剂维生素C和维生素E,于储存第7天、21天分别观察红细胞形态学改变，红细胞内过氧化水平及红细胞内主要抗氧化酶Cu, Zn-SOD、CAT和GSH-Px的活性，探讨维生素C和维生素E联合使用能否降低红细胞的过氧化损伤，改善红细胞保存质量。方法：1血液标本制备采集健康志愿者血液制备去白悬浮红细胞。分装血液，加入VC、VE使其终浓度分别为VC10m mol/L, VE2g/L/。2测定指标及方法2.1红细胞形态通过扫描电镜观察红细胞形态结构的改变。2.2红细胞内丙二醛含量测定按照丙二醛含量测定试剂盒检测红细胞内丙二醛含量。2.3红细胞内活性氧族(ROS)含量测定按照ROS含量测定试剂盒检测红细胞内ROS含量。2.4红细胞内铜-锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)活性测定按照Cu-Zn SOD活性测定试剂盒操作步骤检测Cu-Zn SOD的活性。2.5红细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性测定按照GSH-PX活性测定试剂盒操作步骤检测GSH-PX的活性。2.6红细胞内过氧化氢酶(CAT)活性测定按照CAT活性测定试剂盒操作步骤检测CAT的活性。结果：1.红细胞超微结构的比较红细胞扫描电镜结果显示：与对照组相比VC及VE联合应用处理组在第7天、21天均观察到棘型红细胞的数量减少。2.红细胞内MDA含量7天对照组MDA含量为0.032±0.003nmol/mgHb，VC+VE组为0.018±0.003nmol/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。21天对照组MDA含量为0.059±0.007nmol/mgHb，VC+VE组为0.039±0.004nmol/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。3.红细胞内ROS含量7天对照组ROS含量为827.956±65.581，VC+VE组为731.186±33.963，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.05）。21天对照组ROS含量为1108.778±40.105，VC+VE组为909.652±30.587，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。4.红细胞内Cu-Zn SOD活性7天对照组Cu-Zn SOD活性为10.112±0.248U/mgHb，VC+VE组为11.092±0.454U/mg Hb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。21天对照组Cu-Zn SOD活性为5.471±0.281U/mg Hb，VC+VE组为8.163±0.127U/mg Hb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。5.红细胞内GSH-PX活性7天对照组GSH-PX活性为32.658±3.394活力单位/mgHb，VC+VE组为51.341±4.041活力单位/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。21天对照组GSH-PX活性为22.097±3.167活力单位/mgHb，VC+VE组为29.958±5.087活力单位/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.05）。6.红细胞内CAT活性7天对照组CAT活性为1.327±0.08U/mgHb，VC+VE组为1.667±0.258U/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.05）。21天对照组CAT活性为0.729±0.196U/mgHb，VC+VE组为1.214±0.125U/mgHb，与对照组相比有统计学意义（P﹤0.01）。结论：1.维生素C和维生素E联合使用能改善红细胞形态。2.维生素C和维生素E联合使用能降低红细胞氧化应激水平，提高抗氧化酶活性。

全文目录


摘要  4-7
ABSTRACT  7-11
前言  11-12
材料与方法  12-20
结果  20-22
附图  22-27
附表  27-30
讨论  30-31
结论  31-32
参考文献  32-35
综述 红细胞输注  35-48
  参考文献  41-48
致谢  48-49
个人简历  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 治疗学 > 血液疗法
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