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蟹寄江氏伪钟虫防治药物的筛选及其对几种淡水生物的毒性作用

作　者: 朱磊
导　师: 陆宏达
学　校: 上海海洋大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 中华绒螯蟹江氏伪钟虫药物筛选毒性作用组织病理变化
分类号: S948
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

江氏伪钟虫(Pseudovorticella jiangi)是在中华绒螯蟹（Eriocheirsinensis）体表寄生的一种致病性纤毛虫，隶属于原生动物亚界的纤毛门（Ciliophora）、寡膜纲（Oligohymenophora）、缘毛目（Peritrichida）、固着亚目（Sessilina），其能在中华绒螯蟹体表尤其是仔蟹体表大量聚集附生，使幼体成白絮状，影响幼体的活动、摄食以及蜕皮，从而导致幼体死亡，给养殖生产带来经济损失，且江氏伪钟虫对现有的治疗药物产生了一定的抗药性，治疗效果不理想。因此有必要对江氏伪钟虫的防治药物进行筛选，为中华绒螯蟹的养殖生产提供安全、高效、经济及使用和储存方便的药物，并对河蟹养殖生产中使用药物提供一定的参考及指导意见。为了对防治江氏伪钟虫的药物进行筛选，本文首先选用了10种药物对江氏伪钟虫毒性实验，观察各种药物的杀灭效果，并根据此结果，选出各方面表现比较好的药物，采用静水生物毒性实验法进行实验，实验结果显示，各药物对江氏伪钟虫24h LC50依次为：结晶紫0.18mg/L、苯扎溴铵0.26mg/L、癸甲溴铵0.93mg/L、高锰酸钾1.53mg/L、月苄三甲氯铵1.81mg/L、硫酸锌2.31mg/L、亚甲基蓝3.53mg/L、磺胺甲氧嘧啶钠5.96mg/L、甲醛23.04mg/L，其中苯扎溴铵因具有良好的安全性，高效性，经济性及使用方便而适合作为杀灭江氏伪钟虫的药物。在确定苯扎溴铵对江氏伪钟虫具有比较好杀灭效果之后，为了探讨在杀灭江氏伪钟虫杀灭浓度下是否对河蟹造成损伤及副作用，本文进行了苯扎溴铵对苯扎溴铵对河蟹大眼幼体，Ⅰ期仔蟹，Ⅳ期仔蟹和幼蟹的急性毒性实验，结果显示，其24h LC50分别为5.5mg/L、14.7mg/L、18.07mg/L和17.99mg/L，安全浓度SC分别为0.48mg/L，0.65mg/L，1.15mg/L及1.74mg/L。由于苯扎溴铵对江氏伪钟虫的24h LC50为0.26mg/L，低于苯扎溴铵对河蟹各期幼体的安全浓度，故苯扎溴铵可以在生产中使用，另外通过浸浴实验，苯扎溴铵对江氏伪钟虫的2hLC50为6.57mg/L，对大眼幼体2h和3h时，10mg/L未对大眼幼体造成伤害。依据安全性、高效性、经济性和方便性为渔药选择原则，苯扎溴铵最适合作为河蟹养殖生产中江氏伪钟虫的防治药物，建议大眼幼体和Ⅰ期仔蟹阶段采用泼洒浓度为0.35mg/L进行防治，大眼幼体阶段也可采用药浴浓度为8.0mg/L，时间为2小时的药浴法进行防治。在生产水体中使用苯扎溴铵能较好的防治江氏伪钟虫，但是否对水体中的其他水生生物造成一定的影响，故本文选取了水体中常见的4种生物进行了苯扎溴铵对其的毒性作用的研究，结果显示，苯扎溴铵对喇叭虫、大型溞、中华圆田螺的24h LC50分别为0.54mg/L、0.55mg/L和24.4mg/L，安全浓度SC分别为0.037mg/L，0.039mg/L和1.008mg/L，其中苯扎溴铵对喇叭虫及大型溞的毒性较大，对中华圆田螺的毒性作用较小。本文使用苯扎溴铵对Ⅰ期仔蟹进行浸浴，观察了Ⅰ期仔蟹的组织病理变化，本实验中，苯扎溴铵对中华绒螯蟹Ⅰ期仔蟹的鳃组织造成了比较明显的变化，且这种变化随着水体中苯扎溴铵浓度的增加而加剧，鳃组织出现了鳃小片变粗，扭曲现象，还有部分的鳃小片发生融合，末端膨大，鳃丝末端增生等现象，对Ⅰ期仔蟹在水体中正常存活造成了一定的威胁；且随着苯扎溴铵浓度的升高和作用时间的增长，肝小管管壁的R细胞明显增多，管壁变厚，F细胞空泡变大，使肝小管腔体积变小,所以在生产中药严格注意用量，以及在杀灭虫体的前提下及时换水。筛选出苯扎溴铵为江氏伪钟虫病的防治药物并探讨了其对几种淡水生物的毒性作用及对河蟹组织病理的影响。

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摘要  4-6
ABSTRACT  6-11
引言  11-16
  1 中华绒螯蟹缘毛类固着亚目纤毛虫的研究现状  11-14
    1.1 固着亚目纤毛虫的分类  11
    1.2 固着亚目纤毛虫的致病机理  11-12
    1.3 固着亚目纤毛虫病的防治研究  12-14
  2 季铵盐消毒剂的研究现状  14-15
    2.1 季铵盐阳离子表面活性剂性质  14
    2.2 季铵盐阳离子表面活性剂的作用机理  14-15
  3 本论文研究的目的和意义  15-16
第一章杀灭江氏伪钟虫药物的筛选  16-32
  1 材料与方法  16-18
    1.1 实验对象  16-17
    1.2 实验药品  17
    1.3 实验方法  17
    1.4 数据处理方法  17-18
  2 各药物对江氏伪钟虫的杀灭效果  18-29
    2.1 江氏伪钟虫的中毒症状  18
    2.2 苯扎溴铵对江氏伪钟虫的杀灭效果  18-19
    2.3 结晶紫对江氏伪钟虫的杀灭效果  19
    2.4 亚甲基蓝对江氏伪钟虫的杀灭效果  19-21
    2.5 甲醛对江氏伪钟虫的杀灭效果  21
    2.6 硫酸锌对江氏伪钟虫的杀灭效果  21-22
    2.7 高锰酸钾对江氏伪钟虫的杀灭效果  22-23
    2.8 月苄三甲氯铵对江氏伪钟虫杀灭效果  23-24
    2.9 癸甲溴铵对江氏伪钟虫的杀灭效果  24-25
    2.10 磺胺甲氧嘧啶钠对江氏伪钟虫的杀灭效果  25
    2.11 乳酸三甲氧苄氨嘧啶（TMP）对江氏伪钟虫的杀灭效果  25-26
    2.12 各种药物对江氏伪钟虫的 LC50  26-29
  3 讨论  29-32
第二章苯扎溴铵对不同生长期中华绒螯蟹的毒性影响  32-39
  1 材料与方法  32-33
    1.1 实验药品  32
    1.2 实验对象  32
    1.3 实验条件  32-33
    1.4 实验方法  33
    1.5 数据处理及分析  33
  2 结果  33-36
    2.1 大眼幼体的中毒症状及急性毒性  33-34
    2.2 Ⅰ期仔蟹的中毒症状及急性毒性  34-35
    2.3 Ⅳ期仔蟹的中毒症状及急性毒性  35-36
  3 讨论与结论  36-39
    3.1 不同规格河蟹对苯扎溴铵的敏感性差异  36-37
    3.2 不同水生动物对苯扎溴铵的敏感性差异  37
    3.3 生产用渔药的选用  37-39
第三章苯扎溴铵对几种淡水生物的急性毒性  39-45
  1 材料与方法  39-40
    1.1 实验药品  39
    1.2 实验对象  39
    1.3 实验条件  39
    1.4 实验方法  39-40
    1.5 数据处理及分析  40
  2 结果  40-43
    2.1 喇叭虫的中毒症状及急性毒性  40-41
    2.2 大型溞的中毒症状及急性毒性  41-42
    2.3 中华圆田螺的中毒症状及急性毒性  42-43
  3 讨论与结论  43-45
第四章苯扎溴铵对中华绒螯蟹Ⅰ期仔蟹的组织损伤  45-53
  1 材料与方法  45-47
    1.1 材料  45
    1.2 实验方法  45
    1.3 样品处理  45
    1.4 部分实验试剂配制方法  45-46
    1.5 组织切片制作、染色及观察拍照  46-47
  2 结果  47-52
    2.1 苯扎溴铵对中华绒螯蟹Ⅰ期仔蟹鳃的组织损伤  47-49
    2.2 苯扎溴铵对中华绒螯蟹Ⅰ期仔蟹肝胰腺的组织损伤  49-52
  3 讨论  52-53
结论  53-54
参考文献  54-58
致谢  58-59
附录  59

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