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西瓜花发育的细胞形态学观察及其性别决定候选基因ClACS-7的表达分析

作 者: 单文英
导 师: 于喜艳
学 校: 山东农业大学
专 业: 蔬菜学
关键词: 西瓜 性别分化 细胞形态学观察 性别决定候选基因 实时荧光定量PCR
分类号: S651
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 8次
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内容摘要


西瓜[Citrullus. lanatus (Thunb.) Mansf]是葫芦科西瓜属一年生蔓性草本植物,是典型的雌雄同株作物。其花性别分为雄花、雌花和完全花,根据花器官的组成和着生部位可分为:雌雄异花同株系、完全花雄花系、雌性系、完全花系等性型。开展研究西瓜性型性别分化,可培育雌性系品种运用于生产,可促进西瓜制种产业革命,将有效降低制种成本、提高制种效率、提高种子纯度。本试验以西瓜雌雄异花同株系、雌性系和完全花雄花系3种性型的雄花、雌花、完全花3种花芽为材料,对其不同发育时期的花芽制成石蜡切片进行细胞形态学观察。明确了西瓜3种性型之间性别分化及不同性别花发育在细胞学和形态学上的分化差异,并推测了其性别分化过程中的发育分界点。利用实时荧光定量PCR技术分析基因ClACS-7在西瓜3种性型花芽的时空表达情况,已初步验证基因ClACS-7与西瓜性型的性别分化具有相关性。主要研究结果如下:(1)西瓜3种性型之间性别分化起始及同种性别之间花器官发育过程并没有明显差异。(2)雄花、雌花和完全花细胞形态学差异出现在花芽长度约为0.8-1mm时:雄花和完全花的雄蕊原基快速增大,雌花和完全花的雌蕊原基开始分化为柱头和子房。在3种花芽发育过程中,完全花的花芽在两性期后明显比同时期的雄、雌花的花芽长度更长。(3)雌性系植株上,有些雌花的雌蕊原基在发育过程中受阻,而雄蕊原基却开始分化,最终发育成产生成熟花粉粒、子房不发达的“畸形雌花”。(4)西瓜ClACS-7基因在西瓜雄花中不表达,而在雌花和完全花中表达,可知候选基因与西瓜雌蕊分化发育密切相关;另外,ClACS-7在雌花和完全花的两性期时表达最高,由此可知两性期为西瓜性别分化的临界点。

全文目录


摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
1 引言  10-27
  1.1 植物性别分化研究进展  10-15
    1.1.1 植物性别分化的细胞形态学观察  11-12
    1.1.2 植物性别分化与性别决定基因  12-13
    1.1.3 调控植物花器官形成的基因  13-14
    1.1.4 环境对植物性别分化的影响  14
    1.1.5 激素对植物性别分化的影响  14-15
  1.2 瓜类作物性别分化研究进展  15-21
    1.2.1 黄瓜性别分化研究进展  17-18
    1.2.2 甜瓜性别分化研究进展  18-20
    1.2.3 西瓜性别分化研究进展  20-21
  1.3 基因表达调控技术的研究  21-26
    1.3.1 半定量 RT-PCR 技术  22-23
    1.3.2 实时荧光定量 PCR 技术  23-26
  1.4 本研究的目的及意义  26-27
2 试验材料与方法  27-32
  2.1 试验材料及试剂  27-28
    2.1.1 试验材料  27
    2.1.2 试剂  27
    2.1.3 仪器设备  27-28
  2.2 材料处理  28
    2.2.1 石蜡切片材料处理  28
    2.2.2 RNA 提取材料处理  28
  2.3 试验方法  28-32
    2.3.1 常规石蜡切片制作方法  28-29
    2.3.2 RNA 的提取  29-30
    2.3.3 RNA 的检测  30
    2.3.4 cDNA 第一条链的合成  30-31
    2.3.5 实时荧光定量 PCR 引物序列  31
    2.3.6 实时荧光定量 PCR 反应体系  31-32
3 结果与分析  32-46
  3.1 西瓜花芽分化细胞形态学特征  32-41
    3.1.1 西瓜花芽分化从起始到两性期的细胞形态学特征  32-33
    3.1.2 由两性期花芽发育为雄花的细胞形态学特征  33-35
    3.1.3 由两性期花芽发育为雌花的细胞形态学特征  35-37
    3.1.4 由两性期花芽发育为完全花的细胞形态学特征  37-39
    3.1.5 由两性期花芽发育为“畸形雌花”的细胞形态学特征  39-41
  3.2 RNA 质量检测  41-43
  3.3 西瓜性别决定候选基因 ClACS-7 的初步验证  43-46
4 讨论  46-49
  4.1 西瓜性别分化的细胞形态学特征  46-47
  4.2 西瓜“畸形雌花”细胞形态学特征  47
  4.3 西瓜性别决定候选基因 ClACS-7 时空表达分析  47-49
5 结论  49-50
参考文献  50-57
致谢  57-58
攻读学位期间完成的学术论文  58

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中图分类: > 农业科学 > 园艺 > 瓜果园艺 > 西瓜
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