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聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒载P16a基因的制备及在喉癌细胞中的表达

作　者: 周燚
导　师: 赵德安
学　校: 福建医科大学
专　业: 耳鼻咽喉科学
关键词: 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒 P16 a基因 喉癌细胞
分类号: R739.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:制备携带P16a基因的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒并在喉癌细胞中进行表达。方法:选用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒( PBCA- NPs),以激光粒度分析仪及透射电子显微镜分析纳米粒的形态和粒径。用阳离子表面活性剂十六烷基三乙基溴化铵( CTAB)对纳米粒进行表面修饰。构建真核表达载体pIRES2-EGFP- P16a经过酶切鉴定及测序后与PBCA- NPs连接,转染喉癌细胞Hep-2,荧光显微镜检测转染效率,蛋白印迹法检验P16a基因的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制PBCA- NPs粒径均匀、Zeta电位较高,较为理想;重组质粒pIRES2-EGFP- P16a经过酶切鉴定及测序后,表明真核表达载体构建正确;PBCA- NPs可以介导pIRES2-EGFP- P16a高效转染喉癌细胞,蛋白印迹检测表明转染后喉癌细胞能够表达外源P16a基因,外源P16a基因的表达能有效抑制喉癌细胞的恶性增殖并能诱导细胞凋亡。结论:聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,为喉癌的基因治疗提供了新思路。

全文目录


主要缩略词表  4-5
中文摘要  5-6
Abstract  6-8
正文  8-40
  前言  8-10
  材料和方法  10-14
  实验步骤  14-23
  结果  23-32
  讨论  32-36
  结论  36-37
  参考文献  37-40
致谢  40-41
综述  41-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 耳鼻咽喉肿瘤 > 喉肿瘤
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