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龙葵多糖对S_（180）、H_（22）荷瘤小鼠红细胞膜功能影响研究

作　者: 袁洪亮
导　师: 季宇彬
学　校: 哈尔滨商业大学
专　业: 药理学
关键词: 龙葵多糖红细胞膜膜流动性膜封闭度 SA SOD
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

龙葵多糖是从茄科茄属植物龙葵Solanum nigrum L.的全草中提取的生物活性大分子成分,近年来对其药理作用有较多研究报道,特别是其在临床应用及药理作用机制方面有较多发现,而且在抗肿瘤方面也有较大进步。有文献报道,荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性、封闭度以及唾液酸和超氧化物岐化酶含量都较正常小鼠的红细胞膜低。另有文献报道龙葵多糖通过增强荷瘤小鼠红细胞免疫功能达到抗肿瘤的作用,表明龙葵多糖对肿瘤有一定的作用,而且这种作用与红细胞有着一定的关系,但对龙葵多糖调控荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响未见报道,因此本文从对红细胞膜功能影响的角度进行龙葵多糖抗肿瘤作用的研究。通过体内移植肿瘤细胞株造模方法,进行了龙葵多糖的药效学研究；采用DPH荧光探针标记荧光分光光度计测定S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜的流动性,采用比色法测定龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜封闭度的影响；采用比色法测定龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量及红细胞超氧化物歧化酶含量的影响的研究,为龙葵多糖的进一步研究和临床应用提供重要的实验依据。对龙葵多糖的体内药效学进行研究,首先建立小鼠S180肉瘤模型和H22腹水瘤模型,分别对S180和H22小鼠抑瘤率和生命延长率进行测定,发现龙葵多糖31.25mg/kg、62.50 mg/kg、125mg/kg剂量组均可抑制S180实体瘤生长,其平均瘤重均明显低于阴性对照组(P<0.01),其中龙葵多糖125mg/kg剂量组的抑瘤率达到55.62%。龙葵多糖31.25mg/kg、62.50mg/kg、125mg/kg剂量组能延长H22小鼠生存期,龙葵多糖62.50mg/kg、125mg/kg、剂量组生命延长率分别达到55.81%和65.12%,与阴性对照组比较,差异非常显著(P<0.01)。通过龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性影响进行研究,分别对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性进行测定,发现龙葵多糖可以明显提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性。其中125mg/kg剂量组提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性为5.1618±0.0763,龙葵多糖62.50mg/kg剂量组提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性为4.9329±0.0430,与阴性对照组比较,差异非常显著(P<0.01)。龙葵多糖可以明显提高H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性,其中125mg/kg剂量组提高H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性为5.3092±0.4801,与阴性对照组比较,差异非常显著(P<0.01)。龙葵多糖62.50mg/kg剂量组提高H22荷瘤小鼠红细胞膜流动性为4.8243±0.4152,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.05)。通过龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜封闭度影响进行研究,发现龙葵多糖62.50mg/kg剂量组和125mg/kg剂量组可以明显提高S180荷瘤小鼠红细胞膜封闭度,分别为37.73±4.24%和55.01±3.85%,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.05、P<0.01)。其中龙葵多糖62.50mg/kg剂量组和125mg/kg剂量组可以提高H22荷瘤小鼠红细胞膜封闭度封闭度分别为29.22±3.70%和30.52±1.41%,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.05)。通过龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量影响进行研究,用比色法对荷瘤小鼠红细胞膜上的SA含量进行测定,结果表明龙葵多糖62.50mg/kg、125mg/kg剂量组能显著提高SA含量,与阴性对照组比较,差异非常显著(P<0.01),且龙葵多糖125mg/kg剂量组S180和H22小鼠SA含量分别达到1.9545±0.0624mmol/gprot、0.1620±0.0140mmol/gprot。龙葵多糖62.50mg/kg剂量组S180和H22小鼠SA含量为2.0227±0.2714mmol/gpro、0.1146±0.0203mmol/gprot,与阴性对照组比较,存在明显差异(P<0.05,P<0.01)。在龙葵多糖对S180和H22荷瘤小鼠红细胞SOD含量影响的实验中发现：龙葵多糖62.50mg/kg、125mg/kg剂量组均能显著提高荷瘤小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量,且龙葵多糖62.50mg/kg剂量组S180和H22小鼠SOD活性达到13.44±2.16U/mgHb、5.11±3.89U/mgHb,与阴性对照组比较,差异性分别为(P<0.01、P<0.05)。龙葵多糖125mg/kg剂量组S180和H22小鼠SOD活性分别达到13.70±0.90U/mgHb、5.74±0.66U/mgHb,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.01、P<0.05)。龙葵多糖31.25mg/kg剂量组对Siso小鼠SOD活性达到12.56±1.30U/mgHb,与阴性对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。综上所述,龙葵多糖对移植性肿瘤S180细胞的生长具有明显的抑制作用,对移植肿瘤H22具有明显的生命延长作用；同时,龙葵多糖可以明显提高荷瘤小鼠红细胞膜流动性和封闭度,提高荷瘤小鼠红细胞膜的唾液酸含量及红细胞超氧化物歧化酶含量,结果表明龙葵多糖可能通过改善和恢复荷瘤小鼠红细胞膜功能,从而达到抗肿瘤作用。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-12
英文缩略词表  12-13
1 绪论  13-25
  1.1 中药多糖的抗肿瘤研究进展  13-16
    1.1.1 中药多糖抗肿瘤细胞机制研究进展  14-16
  1.2 龙葵研究进展  16-22
    1.2.1 龙葵概述  16-17
    1.2.2 龙葵的化学成分  17-20
    1.2.3 龙葵的药理作用  20-22
  1.3 红细胞抗肿瘤功能概述  22-24
    1.3.1 红细胞抗肿瘤作用机制  22-23
    1.3.2 测定红细胞膜功能的意义  23-24
  1.4 本课题来源及研究目的与意义  24-25
2 龙葵多糖对的S_(180)、H_(22)荷瘤小鼠药效学研究  25-30
  2.1 引言  25
  2.2 实验部分  25-26
    2.2.1 实验材料  25
    2.2.2 实验方法  25-26
  2.3 实验结果  26-28
    2.3.1 龙葵多糖对S_(180)荷瘤小鼠抑瘤率的影响  26-27
    2.3.2 龙葵多糖对H_(22)小鼠生命延长率的影响  27-28
  2.4 本章小结  28-30
3 龙葵多糖对移植性S_(180)、H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜流动性的影响  30-35
  3.1 引言  30
  3.2 实验部分  30-32
    3.2.1 实验材料  30-31
    3.2.2 实验方法  31-32
  3.3 实验结果  32-34
    3.3.1 龙葵多糖对移植性S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜流动性的影响  32-33
    3.3.2 龙葵多糖对移植性H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜流动性的影响  33-34
  3.4 本章小结  34-35
4 龙葵多糖对移植性S_(180)、H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜封闭度的影响  35-40
  4.1 引言  35
  4.2 实验部分  35-37
    4.2.1 实验材料  35
    4.2.2 实验方法  35-37
  4.3 实验结果  37-39
    4.3.1 龙葵多糖对移植性S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜封闭度的影响  37-38
    4.3.2 龙葵多糖对移植性H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜封闭度的影响  38-39
  4.4 本章小结  39-40
5 龙葵多糖对移植性S_(180)、H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量的影响  40-45
  5.1 引言  40
  5.2 实验部分  40-42
    5.2.1 实验材料  40-41
    5.2.2 实验方法  41-42
  5.3 实验结果  42-43
    5.3.1 龙葵多糖对移植性S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸的影响  42-43
    5.3.2 龙葵多糖对移植性H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸的影响  43
  5.4 本章小结  43-45
6 龙葵多糖对移植性S_(180)、H_(22)荷瘤小鼠红细胞SOD含量的影响  45-49
  6.1 引言  45
  6.2 实验部分  45-46
    6.2.1 实验材料  45
    6.2.2 实验方法  45-46
  6.3 实验结果  46-48
    6.3.1 龙葵多糖对移植性S_(180)荷瘤小鼠红细胞SOD含量的影响  46-47
    6.3.2 龙葵多糖对移植性H_(22)荷瘤小鼠红细胞SOD含量的影响  47-48
  6.4 本章小结  48-49
讨论  49-53
结论  53-54
参考文献  54-59
攻读学位期间发表的学术论文  59-60
致谢  60

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