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山楂黄酮提取、纯化工艺及其对酒精性肝损伤影响的研究

作　者: 常陆林
导　师: 张菊娥；王明臣
学　校: 郑州大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 山楂黄酮 ALT SOD GSH-Px MDA
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究不同的影响因素对山楂黄酮提取率及大孔吸附树脂纯化分离工艺的影响,应用单因素分析与正交试验相结合的方法优化提取及纯化工艺,获得最佳提取、纯化分离工艺路线,并通过酒精诱导小鼠急性肝损伤,探讨山楂黄酮的抗炎作用。方法：1.采用单因素分析法考查固液比、提取时间、超声功率、乙醇浓度对山楂黄酮提取工艺的影响,并用正交试验确定最优条件。2.采用单因素分析法考查流速、温度、乙醇浓度、pH值对山楂黄酮提纯工艺的影响,并用正交试验确定最优条件。3.建立小鼠酒精性肝损伤模型,研究探讨山楂黄酮对酒精性肝损伤小鼠动物模型的血清中ALT、AST及肝组织的SOD、GSH-PX、NO、MDA、TNF-α的影响。结果：1.通过单因素实验,确定各个因素的影响条件,通过正交试验确定最佳超声提取条件为：A3B2C3D3,即：以85%的乙醇为溶媒,加15倍的溶媒,功率为700W超声波辅助提取40min。2.通过单因素实验,确定D101为最佳纯化树脂,通过预实验选择温度、pH、流速、洗脱液进行正交试验,结果确定最佳纯化工艺条件为：A3B3C3D2,即：以75%的乙醇为洗脱液,在80℃、pH为7.5条件下,以流速为2.0mL/min进行洗脱。3.酒精诱导酒精性肝损伤动物模型,通过不同剂量的山楂黄酮治疗,结果显示不同剂量的山楂可以明显降低血清中ALT、AST的含量(P<0.05),增加肝组织GSH-PX、SOD的含量(P<0.05),降低MDA、NO、TNF-α水平(P<0.05),说明山楂黄酮对酒精性肝损伤具有一定的保护作用。结论：1.与传统提取方法相比,平均得率4.736%,提取效率较好,该法超声辅助提取能大大节省提取时间,降低提取成本,并有很好的黄酮提取率。2.通过大孔吸附树脂富集与纯化,纯度为81.37%,回收率79.12%,该法可以较好地纯化山楂黄酮成分。3.山楂黄酮对酒精诱导酒精性肝损伤动物模型具有一定的保护作用,可能与其降低小鼠血清中自由基的水平、抑制脂质过氧化有关。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-9
英文缩略词表  9-10
实验一山楂总黄酮的提取工艺的研究  10-25
  1 前言  10
  2 实验部分  10-25
    2.1 材料与仪器  10-12
    2.2 方法  12-14
    2.3 方法学研究  14-16
    2.4 提取工艺的选择  16-23
    2.5 讨论  23-25
实验二山楂黄酮的纯化工艺的研究  25-37
  1 前言  25-26
  2 材料与方法  26-28
  3 结果与分析  28-33
  4 正交试验  33-35
  5 结论与讨论  35-37
实验三山楂黄酮对肝损伤的影响  37-48
  1 前言  37
  2 试验材料  37-38
  3 动物分组及酒精性肝损伤动物模型的建立和给药方法  38-40
  4 实验结果  40-46
  5 讨论  46-48
结论  48-49
参考文献  49-52
综述部分山楂黄酮的提取、纯化工艺及药理作用  52-65
  参考文献  62-65
附录部分  65-66
  个人简历及在研究生期间发表的论文  65-66
  致谢  66

山楂黄酮提取、纯化工艺及其对酒精性肝损伤影响的研究

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