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南丰蜜桔的遗传鉴定与马家柚苗木真实性分析

作　者: 张新建
导　师: 伊华林
学　校: 华中农业大学
专　业: 果树学
关键词: 南丰蜜桔马家柚分子标记 AFLP IRAP SRAP SSR
分类号: S666
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 31次
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内容摘要

柑橘是我国第二大水果,现阶段,我国柑橘产业规模在不断扩大,产量持续提高,市场竞争也越来越激烈。同时,人们的生活质量在不断提高,对产品的质量要求越来越苛刻。优良的品种将在市场竞争中取得优势。本研究以广西柳城两个南丰蜜桔和华农基地的南丰蜜桔为材料,用AFLP、SRAP和IRAP等分子标记分析了它们之间DNA水平上的差别,进一步分析比较了多个地区南丰蜜桔(Citrus reticulata Blanco)的遗传关系。另外本研究还分析了一个柚子优良品种——马家柚(Citrus grandis(L.)Osbeck),鉴定其苗木纯度,为规模化生产提供帮助。具体研究结果如下：1、用游标卡尺测量华中农大和柳城产的南丰蜜桔三个优株叶片指标,它们叶形指数分别是2.57,1.7和2.31。2、以120对AFLP引物组合、156对SRAP引物组合与56对IRAP引物组合对华中农大和柳城产的三个南丰蜜桔材料进行鉴定,结果发现AFLP与IRAP分子标记没有区分出它们之间的遗传差异；SRAP引物组合中有6对可以鉴别出他们之间的差异。3、用18个SRAP引物组合对10个不同产地的南丰蜜桔进行鉴定,这些引物组合能区别他们之间的遗传差异。4、把回收的差异片段序列用BLAST与NCBI数据库比对,未找到相应的匹配序列。5、用SSR分子标记分析了马家柚与广丰当地主要栽培其他几个柚类品种,电泳结果发现马家柚有两种谱带类型,与现在我国其他主栽柚子品种存在明显差别。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
1 前言  9-20
  1.1 课题的提出  9-10
  1.2 前人研究进展  10-19
    1.2.1 柑橘的生物学特性  10
    1.2.2 柑橘育种途径  10-12
      1.2.2.1 杂交育种  10-11
      1.2.2.2 诱变育种  11
      1.2.2.3 芽变育种  11
      1.2.2.4 生物技术育种  11-12
    1.2.3 芽变选种在果树育种中的应用  12-16
      1.2.3.1 柑橘的芽变育种  12-13
      1.2.3.2 苹果的芽变育种  13-14
      1.2.3.3 葡萄的芽变育种  14-15
      1.2.3.4 桃的芽变育种  15
      1.2.3.5 梨的芽变育种  15
      1.2.3.6 李和杏的芽变育种  15-16
    1.2.4 芽变的鉴定手段  16-19
      1.2.4.1 形态学和物候学鉴定  16
      1.2.4.2 细胞学鉴定  16-17
      1.2.4.3 同工酶鉴定  17
      1.2.4.4 分子标记鉴定  17-19
  1.3 本研究的目的和内容  19-20
2 材料和方法  20-31
  2.1 南丰蜜桔的分子标记鉴定  20-31
    2.1.1 材料  20
    2.1.2 方法  20-30
      2.1.2.1 DNA的提取  20-23
      2.1.2.2 南丰蜜桔叶片取样测量  23
      2.1.2.3 AFLP分析  23-25
      2.1.2.4 SRAP分析  25-26
      2.1.2.5 IRAP分析  26
      2.1.2.6 变性PAGE凝胶的制备  26-27
      2.1.2.7 电泳  27-28
      2.1.2.8 染色  28
      2.1.2.9 片段回收和TA克隆  28-30
    2.1.3 马家柚木苗木纯度的鉴定  30-31
      2.1.3.1 材料  30
      2.1.3.2 马家柚苗木样品的采集方法  30
      2.1.3.3 SSR分子标记分析  30-31
3 结果与分析  31-38
  3.1 南丰蜜桔的结果与分析  31-35
    3.1.1 三种南丰蜜桔叶形指数的分析  31-32
    3.1.2 南丰蜜桔的分子标记分析  32-35
      3.1.2.1 AFLP鉴定结果  32
      3.1.2.2 SRAP鉴定结果  32-34
      3.1.2.3 IRAP鉴定结果  34-35
      3.1.2.4 差异条带的信息学分析  35
  3.2 马家柚苗木的纯度鉴定结果与分析  35-38
    3.2.1 几个主要柚子栽培品种的分析  35-36
    3.2.2 采穗圃马家柚的分析  36
    3.2.3 苗木的鉴定结果  36-38
      3.2.3.1 方法一取样样品SSR扩增结果  36-37
      3.2.3.2 方法二取样样品SSR扩增结果  37-38
4 讨论  38-43
  4.1 南丰蜜桔的分子标记鉴定的讨论  38-41
    4.1.1 三种标记方法的比较  38-39
    4.1.2 叶形差异原因的探讨  39-41
  4.2 马家柚苗木鉴定的讨论  41-43
参考文献  43-52
附录  52-55
致谢  55

南丰蜜桔的遗传鉴定与马家柚苗木真实性分析

内容摘要

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