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热处理对UVB辐射后人表皮黑素细胞活性影响的研究

作　者: 宋文婷
导　师: 赵广; 孟如松
学　校: 第四军医大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 热 UVB 黑素细胞黑素合成酪氨酸酶活性细胞周期
分类号: R758.41
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的白癜风是一种常见的以局部或全身皮肤黏膜色素脱失为特征的皮肤病。人群患病率约为0.1～2%,多于幼年起病，无明显种族及性别差异。皮损可发生于任何部位，皮肤病理显示皮损处表皮黑素细胞明显减少或消失。该病病因不明，目前认为可能与遗传、自身免疫异常、氧化应激、神经精神等因素有关。白癜风临床治疗较为棘手，主要包括药物治疗、光疗、手术治疗等。光疗，特别是波长为311～313nm的中波紫外线，由于疗效确切、安全可靠，现已成为白癜风临床治疗的首选方法之一。近年来，人们逐渐发现热处理(42℃,1h）与紫外线相似，能够增加黑素细胞的酪氨酸酶活性及黑素合成，促使黑素细胞和角质形成细胞共培养体系中酪氨酸酶相关蛋白-1阳性的黑素细胞明显增多；同时，以热效应为主的红外线可明显减少大剂量UVB辐射诱导的角质形成细胞凋亡。以上结果提示我们热与UVB的联合治疗可能将成为白癜风治疗的重要手段。本实验研究热处理对UVB辐射后人表皮黑素细胞的增殖活性、酪氨酸酶活性、黑素合成及细胞周期的影响，并初步探讨其机制，为今后热疗与UVB联合应用治疗白癜风等色素脱失性皮肤病提供理论依据。方法1.以体外培养的正常人黑素细胞作为研究对象，分别以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm~2NB-UVB辐射，采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测细胞存活率，并选择最佳照射剂量进行后续实验。2.以42℃,1h为热处理剂量，将黑素细胞分为四组：正常对照组、UVB组、加热组、UVB+热组，分别给予不同干预，连续3d，末次干预24h后以MTT法检测细胞增殖活性，左旋多巴(L-Dopa)为底物测定酪氨酸酶活性，NAOH法测定黑素含量，流式细胞仪检测细胞周期变化。结果1.分别以20、30、50、70、90、120、180mJ/cm~2UVB连续照射黑素细胞3d后，细胞存活率随着剂量的增加而降低，选择50mJ/cm~2作为最佳照射剂量。2.黑素细胞经不同干预后比较细胞增殖活性，UVB组较对照组减少7.1%（P>0.05），加热组、UVB+热组细胞较对照组分别增加25.3%和58.1%（P<0.05）。热处理与UVB共同干预具有协同作用。3.黑素细胞经不同干预后，UVB组、加热组、UVB+热组细胞的酪氨酸酶活性较对照组分别增长3.8%、11.5%和31.9%（P<0.05），三组细胞的黑素含量较对照组分别增加17.5%、31.6%和67.3%（P<0.05）。热处理与UVB辐射联合干预具有协同作用。4.黑素细胞给予不同干预后，UVB组、加热组、UVB+热组处于G1期的细胞较对照组分别下降24.61%、13.16%和32.02%（P<0.05）；处于S期的细胞较对照组分别增加15.02%、8.58%和17.14%（P<0.05），处于G2期的细胞分别增加12.93%、7.52%、23.60%（P<0.05）。热处理与UVB辐射联合干预具有协同作用。结论1.热处理（42℃,1h）能有效促进黑素细胞增殖，与UVB辐射（50mj/cm2）联合干预具有协同作用。2.热处理（42℃,1h）和UVB辐射（50mj/cm2）均可显著增加黑素细胞内酪氨酸酶活性及黑素合成，两者联合干预具有协同作用。3.热处理（42℃,1h）及UVB辐射（50mj/cm2）干预均可促使细胞周期阻滞在S期和G2期，减少处于G1期的细胞数量，两者联合干预具有协同作用。

热处理对UVB辐射后人表皮黑素细胞活性影响的研究

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