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多肽水凝胶对支架材料生物相容性和骨引导性影响的研究

作　者: 彭莎莎
导　师: 章非敏
学　校: 南京医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 多肽水凝胶纳米羟基磷灰石/胶原脂肪干细胞增殖分化
分类号: R783.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本研究制备了一种新型的复合支架材料，通过多肽水凝胶对纳米羟基磷灰石/胶原（nano-Hydroxyapatite/Collagen, nHAC）进行表面修饰，未复合水凝胶的nHAC为对照组，探讨其对大鼠脂肪干细胞（Rat adipose-derived stemcells，rADSCs）黏附增殖和骨向分化能力以及体内骨再生能力的影响。本实验将rADSCs接种到两种支架材料上，使用扫描电子显微镜（Field emission scanningelectron microscope, FESEM）和共聚焦显微镜（Confocal laser scanningmicroscope, CLSM）进行表征，以CCK-8检测细胞毒性， DNA荧光比色法检测细胞增殖情况。以碱性磷酸酶（ALP）活性为早期成骨分化指标，并通过实时定量PCR检测成骨标志基因的表达，比较rADSCs的骨向分化情况。将支架植入大鼠颅顶骨缺损模型，在植入4周和6周后处死大鼠，观测体内骨再生情况。结果显示多肽水凝胶成纳米纤维多孔网状结构，孔径约300μm，在nHAC表面形成涂层，rADSCs在多肽水凝胶复合支架材料（cnHAC）上黏附、铺展的更好。CCK-8及DNA荧光比色结果显示cnHAC能促进rADSCs在支架上的增殖，两组间差异有统计学意义。ALP和实时定量PCR结果表明cnHAC能显著促进rADSCs的骨向分化。大鼠颅顶骨缺损实验结果显示cnHAC能在早期有效地促进大鼠新骨形成。本研究结果表明cnHAC与nHAC相比，能显著促进细胞的黏附增殖、骨向分化及体内骨再生能力。用多肽水凝胶对nHAC进行表面修饰可作为一种简单有效的改性方式，提高支架材料的生物相容性和骨引导性。

全文目录

摘要  7-8
Abstract  8-10
前言  10-13
1 多肽水凝胶复合支架的制备与形貌表征  13-17
  1.1 材料与方法  13-14
  1.2 结果  14-15
  1.3 讨论  15-17
2 细胞实验  17-32
  2.1 材料与方法  17-21
  2.2 结果  21-29
  2.3 讨论  29-32
3 动物实验  32-38
  3.1 材料与方法  32-33
  3.2 结果  33-36
  3.3 讨论  36-38
全文总结与研究展望  38-39
参考文献  39-45
文献综述  45-58
  参考文献  54-58
论文发表情况  58-59
致谢  59

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