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塞来昔布及丁酸盐对大肠腺瘤和大肠癌细胞作用的实验研究

作　者: 曹先乾
导　师: 王朝晖
学　校: 大连医科大学
专　业: 消化内科学
关键词: 塞来昔布 丁酸钠 大肠癌 COX-2 端粒酶
分类号: R735.34
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：观察非甾体抗炎药（NSAIDs）塞来昔布及丁酸钠对大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞株抗增殖作用的影响，并探讨其可能的作用机制。。方法：不同浓度的塞来昔布（100,200,400umol/L）、丁酸钠（0.5,1.0,2.0mmol/L）及联合用药（塞来昔布100umol/L+丁酸钠0.5mmol/L）处理对数生长期的大肠腺瘤细胞与大肠癌HCT-116细胞株，培养不同时间（24,48,72h）后收集细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增值的变化，流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期分布的变化，PCR-ELSA检测端粒酶活性，RT-PCR法检测端粒酶逆转录酶hTERTmRNA和COX-2mRNA水平表达的变化。结果：1.塞来昔布及丁酸钠在一定时间范围（24,48,72h）内呈剂量、时间依赖性地抑制大肠腺瘤细胞与大肠癌HCT-116细胞的增殖，各浓度组与对照组比较有显著性差异，（P<0.05）。塞来昔布与丁酸钠联合用药对大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞增殖的抑制效应明显高于单一用药，与单一用药组比较具有统计学意义，（P<0.05）。2.不同浓度的塞来昔布与丁酸钠处理大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞，48h后收集细胞，流式细胞仪检测结果提示随着药物浓度的升高，大肠腺瘤细胞与大肠癌HCT-116细胞G1期百分率明显升高，各药物浓度组与对照组比较，差异具有统计学意义，（P<0.05）。塞来昔布与丁酸钠联合用药组G1期比例明显高于单一用药组，与单一用药组比较具有统计学意义，（P<0.05）。3.不同浓度的塞来昔布与丁酸钠处理大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞，48h后收集细胞，流式细胞仪检测结果发现随着药物浓度越高，大肠腺瘤细胞与大肠癌HCT-116细胞凋亡率越高，各药物浓度组与对照组比较有显著性差异，（P<0.05）。塞来昔布与丁酸钠联合用药组细胞凋亡率明显高于单一用药组，与单一用药组比较具有统计学意义（P<0.05）。4.不同浓度的塞来昔布与丁酸钠处理大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞，48h后收集细胞，PCR-ELSA检测结果提示伴随着药物浓度的升高，大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞内的端粒酶活性逐渐降低，不同药物浓度组与对照组比较有显著性差异，（P<0.05），而RT-PCR检测结果提示端粒酶逆转录酶hTERT与COX-2mRNA表达也逐渐降低，各药物浓度组与对照组比较，差异具有统计学意义，（P<0.05）。塞来昔布与丁酸钠联合用药组端粒酶活性、hTERT及COX-2mRNA表达均明显低于单一用药组，与单一用药组比较均具有统计学意义，（P<0.05）。结论：1.塞来昔布与丁酸钠对大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞有明显的增殖抑制作用，并呈现剂量与时间依赖性。塞来昔布与丁酸钠联合应用具有协同抑制效应。细胞周期阻滞可能是塞来昔布与丁酸钠抑制大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞增殖的机制。2.塞来昔布与丁酸钠对大肠腺瘤细胞和大肠癌HCT-116细胞的增殖抑制作用可能与通过抑制COX-2、端粒酶逆转录酶hTERT的表达，降低端粒酶活性，减少前列环素的合成及诱导细胞凋亡有关。

全文目录


摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
材料与方法  11-19
结果  19-32
讨论  32-37
结论  37-38
参考文献  38-42
综述  42-60
  参考文献  54-60
附图  60-61
致谢  61-62

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 大肠肿瘤
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