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RECK基因在食管癌中的表达特点及意义

作　者: 王晓艳
导　师: 徐飞
学　校: 大连医科大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: RECK 食管癌 免疫组织化学 免疫细胞化学 RT-PCR
分类号: R735.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


食管癌是由食管的鳞状上皮或腺状上皮异常增生发展而来的。食管癌的发生由多因素、多基因共同参与经过多个阶段（不典型增生、原位癌、浸润癌）慢慢演化而来，此病发展中国家多发，并以鳞癌为主，而我国食管癌患者的发病率和死亡率居世界首位。目前随着分子生物学发展，食管癌的分子机制备受关注，近年来研究发现RECK基因可能在食管癌的发生发展中起着重要作用。目的：RECK(reversion inducing cysterne rich protein with Kazal motifs)是Takallashi新近发现的一种新型转移抑制基因，其机制可能是RECK通过抑制MMP-2、MMP-9及MTI-MMP的分泌活性，从而抑制肿瘤的生长、侵袭和转移。尽管RECK基因发生突变、缺失、甲基化等异常与众多肿瘤的发生转移密切相关已经被证实，但在食管癌中表达特点及与肿瘤转移关系的研究并不多见，所以本文通过实验检测RECK基因在食管癌组织和食管癌细胞株中的表达情况，来发现RECK与食管癌的关系，希望能找到食管癌发生的新的分子靶点。方法：食管癌旁正常粘膜、癌前组织和食管癌组织均为鞍山市肿瘤医院近十年来收集的未经化放疗的手术切除标本。另外3例新鲜食管癌标本取自大连医科大学附属医院且术前未经放化疗。实验所需的2个人食管癌细胞株TE-1与ECA-109从中科院上海细胞库引进。本研究采用石蜡组织微阵列技术和免疫组织化学(IHC)检测RECK在食管癌旁相对正常粘膜、癌前组织和食管癌组织的表达，用免疫细胞化学(ICC)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCT)检测RECK在3例新鲜标本和2个食管癌细胞株中的表达。统计学分析使用SPSS11.0软件包，应用Kruskal-Wallis和Mamm Whitney的检验方法，检验水准a=0.05。结果：1.RECK在不同病变食管癌组织以及2个人食管癌细胞系中的表达。结果显示：RECK的表达在癌旁正常粘膜、癌前病变和食管癌组织中的表达率分别为100%、57.6%和32.5%，呈现逐渐下降的趋势。食管癌组同癌旁相对正常组和癌前病变组相比较，具有显著的统计学差异(P=0.00,P=0.03)，癌旁相对正常组与癌前病变组也有显著的统计学差异(P=0.018)。但在食管癌的不同组织鳞癌和腺癌中，尚无统计学差异(P>0.05)。RECK在食管癌细胞株ECA-109有表达，但是在食管癌细胞株TE-1中不表达。2．RECK与食管癌浸润转移的关系RECK的表达与食管癌的淋巴结转移密切相关。有淋巴结转移组的食管癌组织中RECK的表达率明显低于无淋巴结转移组，组间比较具有显著的统计学意义(P=0.044)。RECK的表达与代表侵润深度的T分期无关，无统计学意义(P>0.05)。但在临床分期上Ⅰ-Ⅱ期RECK的表达明显高于Ⅲ-Ⅳ期，组间具有显著的统计学意义（P=0.011）。3.RECK与肿瘤各种病理指标的关系。在食管的高分化、中分化和低分化组织中，其RECK阳性表达率依次降低，低、高分化食管癌中RECK表达差异有统计学意义(P=0.034)，中、高分化食管癌中RECK的表达差异有统计学意义(P=0.045)，但中、低分化之间无统计学意义。另外RECK的表达与肿瘤大小有关，直径>3cm的食管癌RECK的表达明显低于<3cm的肿瘤，两者间有统计学差异（p=0.016）。RECK蛋白上的表达与食管癌患者的性别、年龄及肿瘤浸润深度无关(P>0.05)。结论：1.在癌旁相对正常粘膜组、癌前病变组和食管癌组中RECK基因的表达逐渐降低。其表达在食管癌的发生发展中起到重要的作用，有可能成为食管癌发生的分子指标。2.RECK基因的表达与食管癌的浸润转移有关系。其表达率在有淋巴结转移组显著低于无淋巴结转移组，而且其表达在Ⅲ-Ⅳ期显著低于Ⅰ-Ⅱ期。RECK可能是食管癌侵袭、转移的重要生物学标记，具有重要的肿瘤诊断学意义。3.RECK与患者年龄、性别及浸润深度无关，但随着瘤体的增大和分化程度的降低，RECK的表达明显降低。4.在食管癌组织和食管癌细胞株ECA-109中RECK蛋白和RECK mRNA有表达，在细胞株TE-1中不表达。

全文目录


一、摘要  6-11
  （一）中文摘要  6-8
  （二）英文摘要  8-11
二、正文  11-30
  （一）前言  11-12
  （二）材料和方法  12-18
  （三）结果  18-22
  （四）讨论  22-25
  （五）结论  25-26
  （六）参考文献  26-30
三、综述  30-40
  （一）综述  30-36
  （二）参考文献  36-40
四、附录  40-41
五、致谢  41-42

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 食管肿瘤
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