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microRNA-1对宣威肺癌细胞生长抑制的研究

作　者: 杨凡
导　师: 朱启顺; 伍治平
学　校: 云南中医学院
专　业: 中西医结合基础
关键词: 宣威肺癌细胞 PCMV-premiR-1 重组真核表达质粒 瞬时转染 c-MET
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：探讨microRNA-1对宣威肺癌细胞的抑制情况及对靶基因c-MET的调控。方法：1、采用脂质体介导重组真核表达质粒PCMV-premiR-1瞬时转染于宣威肺癌细胞中，实验分为四组：转染组（转染PCMV-premiR-1重组质粒）、空质粒组（转染PCMV-MIR空质粒）、未转染组（只含有10%FBSRPMI1640的培养基）、脂质体对照组（只含有转染试剂Lipofectamine2000）；2、采用实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测转染质粒后的宣威肺癌细胞中microRNA-1及c-MET基因在mRNA水平和蛋白水平的表达；3、采用MTT比色法和流式细胞学方法监测microRNA-1转入宣威肺癌细胞后细胞的生长情况。结果：成功构建PCMV-premiR-1重组真核表达质粒。转染后48h，细胞死亡率最高，该时段活细胞数明显少于其它时段， GFP绿色荧光蛋白的表达量最多；转染PCMV-premiR-1重组质粒的宣威肺癌细胞生长缓慢，细胞形态发生改变；与未转染组和空质粒转染组细胞相比，质粒转染组的宣威肺癌细胞中，microRNA-1、c-MET基因mRNA水平的表达和蛋白水平的表达均显著降低，差异有统计学意义（p<0.05）。结论：microRNA-1通过下调其靶基因c-MET的表达而发挥抑制癌细胞增殖、促进其凋亡的作用。

全文目录


中文摘要  5-6
Abstract  6-8
英文缩写词表  8-10
引言  10-12
实验材料  12-16
实验方法  16-37
结果  37-46
讨论  46-48
结论  48
展望  48-49
参考文献  49-51
附录  51-53
综述  53-63
  参考文献  60-63
致谢  63-64
附件  64

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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