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宫内窘迫大鼠脑组织促红细胞生成素及其受体的表达及意义

作　者: 张志敏
导　师: 田兆方
学　校: 南京医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 促红细胞生成素促红细胞生成素受体脑宫内窘迫新生大鼠
分类号: R722.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

背景研究资料显示宫内窘迫会对大脑、肾脏、心脏、电解质、胃肠、代谢、肺脏、肝脏、视网膜造成不同程度的损害，其中损伤后影响最深远、后果最严重的是对大脑的损伤，直接关系到新生儿的生存率和死亡率。目前宫内窘迫是胎儿围产期死亡及新生儿神经系统后遗症的常见原因。寻求一种早期评估神经系统发育状态的方法迫在眉睫。近年相关研究指出促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)对神经系统有保护作用，EPO可能对宫内窘迫所致大脑损伤的预后有一定应用价值。目的通过观察EPO及其受体(EPOR)在宫内窘迫大鼠生后脑组织的动态表达规律，进而探讨EPO及EPOR在预测宫内窘迫所致脑损伤中的价值，并同时探索外源性EPO治疗新生动物缺氧缺血性脑损伤的最佳时间窗。方法（1）采用结扎足月妊娠待产母鼠双侧子宫动脉10分钟，之后行剖宫产术的方法制作新生大鼠宫内窘迫的模型，并以此作为实验组；未结扎双侧子宫动脉的剖宫产新生大鼠作为对照组；（2）利用病理学技术，观察实验组新生大鼠生后不同时间点（0h、2h、6h、12h、24h、48h、3d和7d）脑组织形态学方面的变化；以对照组新生鼠72h时点处的脑组织切片为参照物，对这两组病理图片进行对比分析；（3）通过RT-PCR技术，研究新生大鼠生后不同时间点脑组织mRNA(EPO、EPOR)的表达情况；（4）利用Western blot实验技术，研究新生大鼠生后不同时间点脑组织EPO及EPOR的动态表达情况；（5）利用ELISA实验技术检测血清EPO的表达水平。实验所得数据用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果与对照组相比，实验组新生大鼠脑组织中EPO蛋白和mRNA的表达在2h、6h、12h，3个时点明显增强，差异有统计学意义（均P<0.05）；EPOR蛋白和mRNA的表达2h、6h、12h、24h、48h、3d，6个时点间均明显增加，差异有统计学意义（均P<0.05）。新生大鼠血清EPO水平在生后2h实验组高于对照组，差异有统计学意义（t=2.52, P=0.02）。结论（1）宫内窘迫新生大鼠生后脑组织EPO与EPOR在短期内迅速增加，其中EPOR持续高表达，且持续时间较EPO长。（2）外源性EPO治疗宫内窘迫致新生儿脑损伤具有可行性。（3）EPO与EPOR水平的变化规律对宫内窘迫致新生儿脑损伤的诊断和治疗具有一定的意义。

全文目录

中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-12
材料与方法  12-27
  1. 实验动物与分组  12
  2. 实验动物模型制作  12-13
  3. 样本采集  13
  4. 病理切片  13-16
  5. 病理学检测脑组织情况  16-17
  6. Western blot 检测脑组织 EPO 和 EPOR 蛋白表达  17-23
  7. RT-PCR 检测脑组织 mRNA(EPO、EPOR)的表达  23-25
  8. 血清 EPO 浓度的检测  25-26
  9. 统计学分析  26-27
结果  27-37
  1. 实验动物  27
  2. 脑组织病理学检测结果  27-29
  3. 血清 EPO 水平  29-30
  4. 脑组织中 EPO 的表达  30-31
  5. 脑组织中 EPO mRNA 的表达  31-33
  6. 脑组织中 EPOR 的表达  33-35
  7. 脑组织中 EPOR mRNA 的表达  35-37
  8. 统计学分析  37
讨论  37-41
结论  41
未来研究展望  41
参考文献  41-47
文献综述  47-63
  参考文献  56-63
中英文缩略词对照表  63-65
攻读学位期间发表文章情况  65
致谢  65-66

宫内窘迫大鼠脑组织促红细胞生成素及其受体的表达及意义

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