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小分子干扰RNA（siRNA）抑制PKC-α表达对卵巢癌耐药的影响
作 者: 赵丽君
导 师: 王金华
学 校: 南京医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 卵巢癌 耐药 MDR1 PKC-α SiRNA
分类号: R737.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 25次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
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目的：采用小分子干扰RNA（siRNA）沉默PKC-α基因，探讨PKC-α基因沉默后人卵巢癌细胞中MDR1的表达及其化疗耐药是否发生逆转，为临床肿瘤耐药的逆转提供新的思路。方法：设计合成针对PKC-α基因的特异性寡核苷酸链。荧光显微镜下比较三种转染试剂的转染效率，选择转染效率较高的试剂进行实验。实验分为：空白对照组（敏感细胞空白对照组及耐药细胞空白对照组）、耐药细胞转染组(pEGFP-iLenti-PKC-α492,746,1114及1676)及耐药细胞空质粒阴性对照。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白印迹法（western blot）检测siRNA干扰前后人卵巢癌敏感细胞株与耐药株中MDR1及PKC-α基因及蛋白的表达差异；MTT法检测siRNA干扰前后人卵巢癌耐药细胞对顺铂或紫杉醇敏感性的变化。结果：经EnoGeneFec2000转染的细胞中的荧光信号强度明显高于另外两种转染试剂转染的细胞，即EnoGeneFec2000的转染效率较高，因此以下实验均选用EnoGeneFec2000作为转染工具。转染针对PKC-α的siRNA干扰前，人卵巢癌耐药细胞株OV1228/DDP及OV1228/Taxol中MDR1及PKC-α基因及蛋白的表达显著高于敏感株OV1228.耐药细胞株转染siRNA后，siRNA能抑制PKC-α基因及蛋白的表达，同时抑制MDR1的表达，且能显著提高耐药株对化疗药物的敏感性。结论：利用siRNA干扰PKC-α基因不仅可以抑制人卵巢癌耐药细胞株PKC-α基因，而且可以抑制MDR1基因和蛋白表达，从而部分逆转肿瘤耐药，基于siRNA沉默PKC-α基因的治疗技术可能为临床肿瘤耐药研究提供新的思路，PKC-α和MDR1之间的关系有待进一步研究。
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全文目录
目录 4-5
中文摘要 5-7
Abstract 7-9
前言 9-14
参考文献 11-14
1 引言 14
2 材料 14-21
3 方法 21-33
4 结果 33-38
5 讨论 38-41
参考文献 41-43
结论 43-45
文献综述 45-65
参考文献 53-65
主要中英文缩略词表 65-66
在读期间发表论文、所获专利和奖励 66-67
致谢 67
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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