学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

中分子量羟乙基淀粉对大鼠脊髓损伤后血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响

作　者: 胡新宇
导　师: 陶军; 杨天德
学　校: 第三军医大学
专　业: 麻醉学
关键词: 脊髓损伤 疼痛 血脊髓屏障 羟乙基淀粉 炎症反应 小胶质细胞/巨噬细胞
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 73次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：脊髓损伤(Spinal cord injury，SCI)后血脊髓屏障遭到破坏，其与脊髓损伤后继发性疼痛(Spinal injury-induced pain，SIP)有无相关性目前知之不多。近年来的研究表明，脊髓内神经胶质细胞和炎症因子在SIP的发生发展中发挥了重要作用。本研究通过建立脊髓损伤后疼痛模型，观察大鼠疼痛行为学变化，检测损伤段大鼠脊髓组织内伊文氏蓝含量，观察血脊髓屏障通透性变化和相关炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)，以及小胶质细胞/巨噬细胞的形态学和蛋白表达变化，从而观察中分子量羟乙基淀粉(HES130/0.4)、低分子量羟乙基淀粉(HES40)及生理盐水对脊髓损伤后大鼠血脊髓屏障及疼痛行为学变化的影响。并初步探讨其可能的作用机制，为临床上完善治疗或预防脊髓损伤后继发性疼痛探求一种新思路。方法：1、成年SD大鼠，雄性，体重250±10g，取72只采用随机数字法分为生理盐水组、HES40组、HES130/0.4组、假手术组，每组18只大鼠。其中假手术组只做相应的椎板去除术，其余三组大鼠利用NYU大鼠脊髓撞击仪Ⅰ型制备脊髓(T10)水平撞击伤模型，术后相应各组即刻经尾静脉分别给予生理盐水、HES40、HES130/0.4，以后均每日给药两次。手术组大鼠术后行膀胱按摩人工排尿，每日2-3次，直至大鼠恢复自主排尿反射。2、各组大鼠分别在术前1d、术后10d、14d、20d、30d、60d测后足机械痛敏压力阈值(paw withdraw pressure threshold，PWPT)和热痛敏潜伏期(paw withdrawlatency，PWL)变化，同时观察对比各组大鼠疼痛行为学的表现。3、各组大鼠术后3d，检测损伤段脊髓组织内伊文氏蓝相对含量进而观察血脊髓屏障变化情况。4、术后10d，免疫荧光组织化学法和Western blot观察小胶质细胞/巨噬细胞溶酶体膜蛋白和内钙结合蛋白标记物ED1和Iba1活化及蛋白表达情况。5、ELISA法测定大鼠损伤段脊髓组织内IL-1β、IL-6及TNF-α的表达变化。6、采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果：1、术后3d，HES130/0.4组、HES40组、生理盐水组与假手术组相比，脊髓组织内伊文氏蓝相对含量为：生理盐水组：(2.58±0.29)、HES40组：(2.38±0.47)、HES130/0.4组：(1.38±0.34)。HES130/0.4组伊文氏蓝相对含量分别较生理盐水组和HES40组显著降低(P<0.05)。2、术后10d、14d、20d、30d、60d时间点，HES130/0.4组、HES40组、生理盐水组大鼠PWPT和PWL较术前均显著降低(P<0.05)，HES130/0.4组术后所测各时间点PWPT和PWL较生理盐水组和HES40组均明显升高(P<0.05)。3、术后10d，免疫荧光结果显示：HES130/0.4组、HES40组、生理盐水组Iba1和ED1表达均呈活化状态，但HES130/0.4组活化的数量明显低于生理盐水组和HES40组。4、术后10d，各组大鼠Western blot检测Iba1和ED1蛋白表达情况，Quantity One软件进行灰度值分析，HES130/0.4组、HES40组、生理盐水组大鼠较假手术组均明显升高(P<0.05)。Iba1相对灰度值为：生理盐水组：(0.36±0.034)、HES40组：(0.35±0.029)、HES130/0.4组：(0.27±0.047)、假手术组：(0.12±0.024)；ED1相对灰度值为：生理盐水组：(0.54±0.044)、HES40组：(0.55±0.028)、HES130/0.4组：(0.38±0.054)、假手术组：(0.06±0.015)。HES130/0.4组Iba1和ED1相对灰度值较生理盐水组和HES40组均明显下降(P<0.05)。5、术后10d，ELISA检测HES130/0.4组、HES40组、生理盐水组大鼠损伤段脊髓组织内IL-1β、IL-6、TNF-α与假手术组的相对表达量分别为：IL-1β相对表达量为：生理盐水组：(1.46±0.10)、HES40组：(1.42±0.14)、HES130/0.4组：(1.18±0.11)；IL-6相对表达量为：生理盐水组：(1.32±0.12)、HES40组：(1.33±0.08)、HES130/0.4组：(1.12±0.09)；TNF-α相对表达量为：生理盐水组：(1.41±0.10)、HES40组：(1.39±0.11)、HES130/0.4组：(1.19±0.12)。三种炎症因子HES130/0.4组较生理盐水组和HES40组均明显下降(P<0.05)。结论：1、利用NYU大鼠脊髓撞击仪所致疼痛模型具有较高的稳定性、可操控性，同时其良好的可重复性、临床相关性，可满足脊髓损伤后疼痛研究的实验需要。2、脊髓损伤后大鼠血脊髓屏障破坏，损伤区脊髓组织内小胶质细胞活化，蛋白表达增高，炎症因子表达升高，并伴有大鼠痛阈显著下降。3、HES130/0.4可有效改善BSCB的通透性，减轻损伤区小胶质细胞/巨噬细胞活化引发的炎症反应，下调IL-1β、IL-6、TNF-α表达，并可在一定程度上升高大鼠的痛阈，但大鼠行为学变化未见显著改善。

全文目录


英文缩略词表  4-6
Abstract  6-9
摘要  9-12
前言  12-14
材料与方法  14-31
结果  31-40
讨论  40-46
全文总结  46-47
致谢  47-48
参考文献  48-52
文献综述 脊髓损伤后神经病理性疼痛的机制及治疗研究现状  52-62
  参考文献  59-62
硕士在读期间发表文章  62

相似论文

  1. 利多卡因在痔术后尿潴留导尿中的应用研究,R472
  2. 腑安汤对小鼠术后肠麻痹的作用及肥大细胞相关机制,R285.5
  3. 骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤移植途径的实验研究,R651.2
  4. 急性脊髓损伤的3.0TMR-DTI及DTT应用研究,R651.2
  5. BMS-345541对大鼠脊髓损伤后粒细胞浸润及运动功能影响的实验研究,R651.2
  6. 脊髓胶质细胞在蜜蜂毒诱致的疼痛与炎症中作用的研究,R741
  7. 复合功能载药微球的制备及在脊髓损伤治疗中的应用初探,R943
  8. 曲马多联合电针对神经病理性疼痛大鼠模型的治疗及其相关机制的研究,R245
  9. 迷走神经切断及烟碱预处理对大鼠SIRS影响的初步研究,R363
  10. 红细胞生成素（EPO）与甲泼尼龙（MPSS）联合应用对损伤星形胶质细胞影响的研究,R363
  11. 五羟色胺-2A受体激动剂改善脊髓损伤大鼠排尿障碍的研究,R651.2
  12. 高压氧治疗对大鼠脊髓损伤后iNOS表达的影响,R651.2
  13. 6%羟乙基淀粉HES130/0.4预扩容在颅脑外伤患者围术期的应用研究,R614
  14. 髓样细胞触发受体-1（TREM-1）在大肠埃希菌诱导新生大鼠败血症中的意义,R363
  15. 骨髓间充质干细胞联合脑源性神经营养因子移植治疗大鼠脊髓损伤的研究,R651.2
  16. 上消化道术后肠屏障功能及细菌易位的研究,R656
  17. 促酰化蛋白对3T3-L1脂肪细胞炎症反应的影响,R363
  18. 主动脉夹层患者临床表现及住院死亡危险因素分析,R543.1
  19. p120在甲醛致气道上皮细胞炎症反应中对NF-κB信号通路的影响,R114
  20. p120在机械划伤致气道上皮细胞炎症反应中对NF-κB信号通路的影响,R363
  21. ω-3多不饱和脂肪酸对脓毒症免疫功能的影响,R459.7

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科学各论 > 头部及神经外科学 > 脊髓
© 2012 www.xueweilunwen.com