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8-烷基小檗碱衍生物降血脂活性及对肝脏LDLR表达的影响

作　者: 史青
导　师: 叶小利
学　校: 西南大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 小檗碱 小檗碱衍生物 降血脂 LDLR
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 12次
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内容摘要


小檗碱是我国传统名贵中药黄连的主要活性成分,有很好的降脂效果。为了改善小檗碱在治疗高血脂症中所存在的缺陷,本实验利用烷基修饰的小檗碱,以HepG2细胞,高血脂症鼠为模型,研究小檗碱衍生物的降血脂活性和对肝脏LDLR的影响。研究结果如下：在HepG2细胞生长良好的状态下,采用MTT法检测不同浓度的小檗碱和小檗碱衍生物对HepG2细胞增殖的影响,结果表明小檗碱的浓度达到0.2mg/L时,细胞存活率能够达到80%左右：而所有小檗碱衍生物的浓度为0.03mg/L时,细胞存活率均能够达到80%左右。所以选取0.2mg/L小檗碱,0.03mg/L小檗碱衍生物进行后续实验。首先,选取生长状态良好的HepG2细胞,进行培养,给药等程序后,分别研究0.2mg/L的小檗碱和0.03mg/L小檗碱衍生物对LDLR蛋白的影响,结果表明：所有的实验组的LDLR蛋白表达量均高于对照组,各个组上调LDLR蛋白的能力随着碳链的延长显著提高,8-十六烷基小檗碱表现出最强的上调水平。其次,选择了高低两个不同浓度进行上述实验,利用western blot方法检测其对LDLR蛋白的影响。结果表明：高浓度小檗碱衍生物刺激LDLR蛋白表达的能力比低浓度的强,可推测出LDLR蛋白表达对小檗碱衍生物有一定程度上的剂量依赖性。最后,参照文献64和65,用添加1%胆固醇的饲料培育高脂高胆固醇金黄地鼠模型,当TC和TG分别达到2mmol/L和8mmol/L时说明造模成功,再给造模成功的金黄地鼠按体重喂带药的饲料三个月,最后通过眼眶取血并测各项指标,计算相对肝重,检测药物对肝脏中LDLR的影响。结果表明：经过三个月的实验期,药物组的体重增幅都比高脂组低,8-十六烷基小檗碱组的体重最接近正常组,肝脏也有相似的结果,同时药物组中TC,TG, LDL-C均有所下降,HDL-C均有所增加,8-十六烷基小檗碱组调节TC, TG, LDL-C和HDL-C的能力最强。说明药物在改善体重和相对肝重上有一定的效果,8-十六烷基小檗碱效果最好。

全文目录


目录  4-6
摘要  6-7
Abstract  7-8
第1章 文献综述  8-16
  1.1 前言  8-10
    1.1.1 高血脂症与高血脂症并发症及流行趋势  8-9
    1.1.2 高血脂症并发症  9
    1.1.3 高血脂症的治疗  9-10
  1.2 高血脂症的发病机理和药物治疗  10-12
    1.2.1 高血脂症的发病机理  10-11
    1.2.2 高血脂症的西药药物治疗  11-12
  1.3 中药研究高血脂症的意义  12-13
    1.3.1 单味中药对高血脂症的治疗  12-13
    1.3.2 复方中药对高血脂症的治疗  13
  1.4 小檗碱降脂作用研究  13-15
    1.4.1 小檗碱降脂的优势  14-15
    1.4.2 小檗碱降脂的不足之处  15
  1.5 小檗碱衍生物降脂作用研究的意义  15
  1.6 本课题研究的可行性论证  15-16
第2章 引言  16-17
  2.1 研究的目的和意义  16
  2.2 研究主要内容  16-17
第3章 小檗碱衍生物对HepG2细胞增殖作用初步研究  17-22
  3.1 实验材料  17-18
    3.1.1 主要实验材料和试剂  17-18
    3.1.2 主要实验仪器  18
  3.2 实验方法  18-19
    3.2.1 溶液的配制  18-19
    3.2.2 HepG2细胞的培养及MTT实验  19
    3.2.3 统计分析  19
  3.3 结果  19-21
  3.4 小结与讨论  21-22
第4章 小檗碱衍生物对HepG2细胞中LDLR蛋白的影响  22-28
  4.1 实验材料  22
    4.1.1 主要实验材料和试剂  22
    4.1.2 主要实验仪器  22
  4.2 实验方法  22-25
    4.2.1 溶液的配制  22-23
    4.2.2 细胞培养与给药  23
    4.2.3 细胞蛋白的提取  23-24
    4.2.4 细胞蛋白总量的测定  24
    4.2.5 Western blot检测细胞中LDLR的变化  24-25
  4.3 实验结果  25-26
    4.3.1 同浓度衍生物对LDLR的影响  25-26
    4.3.2 不同浓度衍生物对LDLR的影响  26
  4.4 小结与讨论  26-28
第5章 小檗碱衍生物对金黄地鼠降血脂和LDLR影响的研究  28-33
  5.1 实验材料  28
    5.1.1 主要实验材料和试剂  28
    5.1.2 主要实验仪器  28
    5.1.3 实验动物  28
    5.1.4 动物实验室  28
  5.2 实验方法  28-29
    5.2.1 高血脂鼠模型建立  28
    5.2.2 高血脂鼠随机分组  28-29
    5.2.3 高血脂鼠药物喂养  29
    5.2.4 高血脂鼠处理  29
    5.2.5 高血脂鼠肝脏蛋白提取  29
  5.3 实验结果  29-31
    5.3.1 小檗碱衍生物对体重和肝重的影响  29-30
    5.3.2 小檗碱衍生物对血脂的影响  30-31
    5.3.3 小檗碱衍生物对肝脏LDLR的影响  31
  5.4 小结与讨论  31-33
第6章 总结  33-35
  6.1 小檗碱衍生物对HepG2细胞增殖作用初步研究  33
  6.2 小檗碱衍生物对HepG2细胞中LDLR蛋白的影响  33
  6.3 小檗碱衍生物对金黄地鼠降血脂和LDLR影响的研究  33-35
参考文献  35-40
致谢  40-41
攻读硕士学位期间发表论文  41

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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