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知母活性成分提取工艺优化及降糖活性研究

作　者: 高帅
导　师: 郭辉; 钱俊青
学　校: 浙江工业大学
专　业: 生药学
关键词: 知母 RP-HPLC-ELSD 提取工艺优化 糖尿病 降血糖
分类号: R284.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 4次
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内容摘要


糖尿病己成为继肿瘤、心血管疾病之后死亡率最高的慢性疾病。知母对糖尿病有明显的治疗作用,研究知母活性成分的化学成分、提取工艺及降糖活性具有重要的学术价值和现实意义。首先,采用柱层析分离技术及UV、IR和NMR定性技术,分离得到6个化合物：新芒果苷、芒果苷、知母皂苷AⅠ、知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ,并建立了一种快速灵敏、专属性强和准确度高的RP-HPLC-ELSD方法来测定知母药材中芒果苷、新芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ的含量。该方法适合对知母药材进行定量分析和质量控制。其次,采用热回流提取法,以知母中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ的含量为指标,采用单因素法考查不同溶剂体系、浸提时间、料液比、提取时间、药材颗粒大小、pH值和提取次数对知母中活性成分提取效果的影响,获得知母活性成分最佳提取工艺：知母药材粉末(60-100目),按料液比1：8加入pH值11.0的75%乙醇,浸提20min,热回流提取3h(自微沸开始计时),提取3次,得到的75%乙醇知母浸膏中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ的含量分别为5.82%,4.33%,38.67%,15.55%,以知母皂苷BⅡ的含量为最高。最后,以四氧嘧啶型糖尿病小鼠为对象,对75%乙醇知母浸膏和知母皂苷AⅢ进行降血糖活性实验。实验结果表明知母75%乙醇提取物和知母皂苷AⅢ能通过提高肝SOD活力、降低MDA含量来提高四氧嘧啶型糖尿病小鼠抗氧化能力,发挥胰岛素增敏作用,促进葡萄糖的利用,促进糖原合成,抑制糖原异生,从而达到调节糖代谢,降低血糖,改善糖尿病症状的作用。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-12
符号说明  12-13
第一章 绪论  13-30
  1.1 糖尿病的研究进展  13-17
    1.1.1 糖尿病现状  13-14
    1.1.2 糖尿病的分类和发病机制  14
    1.1.3 糖尿病治疗药物现状  14-17
  1.2 知母研究概况  17-28
    1.2.1 知母的主要化学成分  18-24
    1.2.2 知母的药理作用  24-28
  1.3 论文目的及意义  28-30
第二章 知母中化学成分的研究及质量控制  30-48
  2.1 引言  30
  2.2 实验材料与仪器  30-32
    2.2.1 材料与试剂  30-31
    2.2.2 实验仪器  31-32
  2.3 实验方法  32-35
    2.3.1 提取与分离  32
    2.3.2 化合物的鉴定  32
    2.3.3 知母的质量控制  32-35
  2.4 实验结果  35-47
    2.4.1 提取与分离  35-36
    2.4.2 化合物的结构鉴定  36-40
    2.4.3 知母的质量控制  40-47
  2.5 结论  47-48
第三章 知母活性成分提取工艺的研究  48-60
  3.1 引言  48
  3.2 实验材料与仪器  48-50
    3.2.1 材料与试剂  48-49
    3.2.2 实验仪器  49-50
  3.3 实验方法  50-51
    3.3.1 原料的预处理  50
    3.3.2 热回流提取法提取知母活性成分  50
    3.3.3 提取工艺的优化  50
    3.3.4 RP-HPLC-ELSD法测定知母活性成分  50-51
  3.4 实验结果  51-59
    3.4.1 标准曲线的制备  51
    3.4.2 提取工艺的优化  51-59
  3.5 结论  59-60
第四章 知母提取物降血糖活性的研究  60-75
  4.1 引言  60
  4.2 实验材料与仪器  60-62
    4.2.1 实验动物与试剂材料  60-61
    4.2.2 实验仪器  61-62
  4.3 实验方法  62-64
    4.3.1 溶液的配置  62
    4.3.2 取血及测定方法  62
    4.3.3 四氧嘧啶型糖尿病小鼠模型的建立  62-63
    4.3.4 实验小鼠的分组  63
    4.3.5 小鼠的一般观察  63
    4.3.6 小鼠血糖值的测定  63
    4.3.7 小鼠糖耐量的测定  63
    4.3.8 小鼠糖化血清蛋白的测定  63-64
    4.3.9 小鼠血清胰岛素的测定  64
    4.3.10 小鼠抗氧化作用的测定  64
    4.3.11 小鼠脏器重和脏体比的测定  64
    4.3.12 统计学处理  64
  4.4 实验结果  64-73
    4.4.1 小鼠的一般观察  64-65
    4.4.2 小鼠体重变化的测定  65-66
    4.4.3 小鼠血糖值的测定  66-67
    4.4.4 小鼠糖耐量的测定  67-68
    4.4.5 小鼠糖化血清蛋白的测定  68-69
    4.4.6 小鼠血清胰岛素的测定  69-70
    4.4.7 小鼠抗氧化作用的测定  70-72
    4.4.8 小鼠脏器重和脏体比的测定  72-73
  4.5 结论  73-75
第五章 结论与展望  75-77
参考文献  77-85
致谢  85-86
攻读学位期间发表的学术论文  86-87
附图  87-92

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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