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红树林根际土壤真菌Penicillium sp. MA-37的化学成分研究

作　者: 张一
导　师: 王斌贵
学　校: 中国科学院研究生院（海洋研究所）
专　业: 海洋生物学
关键词: 海洋真菌 红树林 根际土壤 青霉 发酵条件 次生代谢产物 生物活性
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


本文以发酵产物量、薄层色谱分析结果、高效液相色谱分析结果等作为评价依据，选择一株红树林植物木榄根际土壤来源的青霉属真菌Penicillium sp. MA-37作为研究对象，对其进行了不同发酵方式（静态与动态）和不同培养基（组成、盐度和pH）条件下的筛选，研究了其在不同发酵方式（静置培养和摇床培养）下发酵产物的化学成分，并对分离得到的部分化合物进行了初步的生物活性评价。采用硅胶柱层析、反相硅胶柱层析，葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析、制备薄层层析（pTLC）、制备高效液相色谱（pHPLC）以及重结晶等方法分离纯化得到单体化合物，利用各种现代波谱技术（UV、IR、MS、NMR和CD）、X射线单晶衍射，化学衍生以及与标准品和文献数据比对的方法鉴定单体化合物的结构。从Penicillium sp. MA-37静置MH2培养基中鉴定了22个化合物的结构，其中5个为新结构化合物，包括4个混源萜类衍生物（MJ1、MJ2、MJ3、MJ4）和1个丙酰胺酸衍生物（MJ10）。从Penicillium sp. MA-37摇床MH2培养基的部分代谢产物中鉴定了9个化合物的结构，包括3个二苯醚类新结构化合物（MY1、MY5、MY7）。对分离得到的部分化合物的生物合成途径做了初步推测。对以上分离鉴定的部分单体化合物进行了抗菌活性（3株细菌和4株植物病原真菌）和卤虫致死活性的初步评价。化合物MY5和MY8对革兰氏阳性细菌藤黄微球菌Micrococcus luteus及革兰氏阴性细菌大肠埃希式杆菌Escherichia coli具有一定抑制活性，MY5对两株细菌MIC值分别为64、16μg/mL，MY8对两株细菌MIC值分别为256、32μg/mL；化合物MY1、MY2、MY4表现中等卤虫致死活性（LD50值分别为47.86、58.96、27.91μg/mL）。本文从真菌发酵条件的筛选与优化、真菌次生代谢产物的分离与结构鉴定、生物活性评价这三个角度，对菌株Penicillium sp. MA-37进行了较系统的研究，为海洋微生物资源的有效利用提供了一定的科学依据。

全文目录


致谢  4-5
摘要  5-6
Abstract  6-9
化合物结构式  9-11
1 绪论  11-24
  1.1 引言  11-12
  1.2 海洋生态环境中的微生物群落  12-15
  1.3 不同培养策略在微生物次生代谢产物研究中的应用  15-24
    1.3.1 改变培养基及培养条件的策略  15-19
    1.3.2 添加前体和酶抑制剂的策略  19-21
    1.3.3 混菌共培养策略  21-24
2 菌株Penicillium sp. MA-37 的鉴定与发酵条件的筛选  24-33
  2.1 菌株Penicillium sp. MA-37 的分离与鉴定  24-29
    2.1.1 菌株Penicillium sp. MA-37 的分离  24-25
    2.1.2 菌株Penicillium sp. MA-37 的鉴定  25-29
  2.2 菌株Penicillium sp. MA-37 发酵条件的筛选  29-33
    2.2.1 不同筛选条件  29-30
    2.2.2 发酵培养物的提取与分析  30
    2.2.3 结果与分析  30-33
3 Penicillium sp. MA-37 静置发酵的次生代谢产物及生物活性研究  33-62
  3.1 化合物结构的鉴定  33-48
    3.1.1 新结构化合物的鉴定  33-42
    3.1.2 其他化合物的结构鉴定  42-48
  3.2 生源合成途径探讨  48-50
  3.3 实验部分  50-59
    3.3.1 仪器与试剂  50-51
    3.3.2 菌株发酵培养  51-52
    3.3.3 提取与分离  52
    3.3.4 化合物的物理常数与波谱数据  52-59
  3.4 单体化合物生物活性的初步评价  59-62
    3.4.1 抑菌活性测试  59-60
    3.4.2 卤虫致死活性测试  60-61
    3.4.3 试验结果  61-62
4 Penicillium sp. MA-37 摇床发酵的次生代谢产物及生物活性研究  62-75
  4.1 化合物的结构鉴定  62-68
    4.1.1 新结构化合物的鉴定  62-66
    4.1.2 已知化合物的结构鉴定  66-68
  4.2 实验部分  68-72
    4.2.1 仪器与试剂  68-69
    4.2.2 菌株发酵培养  69
    4.2.3 提取与分离  69-70
    4.2.4 化合物的物理常数与波谱数据  70-72
  4.3 单体化合物生物活性的初步评价  72-75
    4.3.1 抑菌活性测试  72-73
    4.3.2 微量稀释法MIC的测定  73-74
    4.3.3 卤虫致死活性测试  74-75
5 结论与创新点  75-77
  5.1 结论  75
  5.2 创新点  75-77
参考文献  77-82
作者简历  82-83
待发表的论文  83-84
部分化合物谱图  84-89

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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