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苏合香GC-MS分析及药代动力学研究

作　者: 彭颖
导　师: 夏厚林; 王建
学　校: 成都中医药大学
专　业: 药物分析
关键词: 苏合香 GC-MS 肉桂酸 药代动力学 组织分布
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


苏合香为金缕梅科植物苏合香树Liquidambar orientalis Mill的树干渗出的香树脂经加工精制而成。始载于《名医别录》,列为上品,性温、味辛,归经于心、脾,具有开窍、破秽、止痛之功效,用于中风痰厥、卒然昏倒、胸腹冷痛、惊痫、湿疟,主产于非洲、印度及土耳其等地,药用历史悠久。本论文隶属于国家重点基础研究发展计划项目(973计划)“中药药性理论相关基础问题研究”——中药系统药性的物质基础及其特异性效应表达规律研究课题,主要开展了苏合香有效部位的GC-MS分析及药代动力学研究。方法：①按照《中国药典》(2010年版)苏合香项下进行质量检测。②采用GC-MS技术对苏合香有效部位石油醚部位、乙醚部位和常规水蒸气蒸馏的挥发油、顶空固相微萃取的挥发性成分进行分析。③利用HPLC建立以肉桂酸为测定指标的苏合香药代动力学研究方法。④测定苏合香在大鼠肝、脑、肺、脾、肾、心组织中的分布情况。结果：①按照《中国药典》(2010年版)苏合香项下进行了质量检测,试验用苏合香药材符合药典标准。②应用GC-MS技术,鉴定出苏合香溶剂提取27个化合物(其中石油醚部位23个化合物、乙醚部位10个化合物),水蒸气蒸馏的挥发油42个化合物,顶空固相微萃取28个化合物。三种方法所得成分中皆含有α-蒎烯、莰烯、氢化肉桂酸、反式石竹烯和马苄烯酮等十种化学成分,溶剂提取与水蒸气蒸馏所得的成分中有14种相同成分,水蒸气蒸馏提取与顶空固相微萃取有24个相同成分。③建立了以肉桂酸为测定指标的苏合香药代动力学研究方法及相关药代动力学参数：血浆用甲醇沉淀蛋白处理后经HPLC分析,血浆中肉桂酸在0.125-64μg·mL-1范围内肉桂酸峰面积(A)与其质量浓度X具有良好线性关系(r=0.99995)；精密度试验中低、中、高3种浓度的日内精密度RSD分别为5.66%、3.76%、4.16%,日间精密度RSD分别为3.49%、1.08%、3.71%；稳定性试验中低、中、高3种质量浓度RSD分别为0.72%、0.78%和1.75%；提取回收率中低浓度的平均提取回收率为74.62%,RSD为3.17%；中浓度的平均提取回收率为81.60%,RSD为2.45%；高浓度的平均提取回收率为81.91%,RSD为2.92%。灌胃给予9只大鼠苏合香药液,建立肉桂酸血药浓度-时间曲线,计算其相应药物动力学参数。所得主要药动学参数为：雌性Cmax=19.0228μg-mL-1；Tmax=24.1367min；AUC=2689.593μg-mL-1；雄性Cmax=10.6980μg-mL-1；Tmax=28.6939min；AUC=1303.6717μg·mL-1。药代动力学参数表明苏合香中肉桂酸在大鼠体内的药时过程符合二室模型。④苏合香在大鼠肺、肝、脾、肾、心、脑组织中均有分布,平均含量依次为0.8048μg·g-1、0.6850μg-g-1、0.6513μg·g-1、0.3924μg·g-1、0.3798μg-g1、0.1229μg·g-1。结论：本研究进行了苏合香有效部位的GC-MS研究,分析了苏合香不同提取方法挥发性成分的异同,为进一步确认苏合香发挥芳香开窍药效的物质基础研究奠定基础；进行了苏合香中肉桂酸在大鼠体内的药代动力学过程及肉桂酸在大鼠组织中的分布情况,为阐明中医药理论及中药临床用药打下基础。

全文目录


中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
前言  10-14
  1. 苏合香研究概述  10-12
  2. 立题目的、意义  12
  3. 主要研究内容  12-13
  4. 技术路线  13-14
1. 实验仪器与材料  14-16
  1.1 药材  14
  1.2 实验动物  14
  1.3 对照品  14
  1.4 试剂  14
  1.5 仪器  14-16
2. 药材质量检测  16-21
  2.1 检测依据  16
  2.2 性状  16
  2.3 鉴别  16-17
    2.3.1 理化鉴别  16
    2.3.2 薄层鉴别  16-17
  2.4 检查  17-18
    2.4.1 水分  17
    2.4.2 酸值  17-18
    2.4.3 皂化值  18
  2.5 含量测定  18-20
    2.5.1 色谱条件与系统适用性试验  18
    2.5.2 对照品溶液制备  18-19
    2.5.3 供试品溶液制备  19
    2.5.4 样品测定  19-20
  2.6 小结  20-21
3. 苏合香GC-MS分析  21-33
  3.1 供试品制备  21-23
    3.1.1 石油醚部位  21
    3.1.2 乙醚部位  21
    3.1.3 水蒸气蒸馏挥发油部位  21
    3.1.4 顶空固相微萃取挥发性成分部位  21-23
  3.2 GC-MS条件考察  23-24
    3.2.1 程序升温条件考察  23-24
    3.2.2 GC-MS条件确定  24
  3.3 样品测定  24-32
  3.4 小结  32-33
4. 苏合香中肉桂酸在大鼠体内药代动力学研究  33-56
  4.1 溶液配制  33-34
    4.1.1 对照品溶液配制  33
    4.1.2 灌胃用空白药液配制  33
    4.1.3 灌胃用苏合香药液配制  33-34
  4.2 给药及取血时间点的确定  34-35
    4.2.1 给药  34
    4.2.2 取血时间点的确定  34-35
  4.3 血浆样品处理方法考察  35-38
    4.3.1 提取溶剂考察  35-36
    4.3.2 提取次数考察  36-37
    4.3.3 提取离心转速考察  37-38
  4.4 色谱条件及系统适应性试验  38-39
    4.4.1 流动相考察  38
    4.4.2 检测波长确定  38-39
    4.4.3 色谱条件  39
  4.5 专属性考察  39-43
  4.6 线性范围考察  43-44
  4.7 定量限  44-45
  4.8 精密度试验  45-46
  4.9 稳定性试验  46-47
  4.10 提取回收率试验  47-48
  4.11 检测限  48-49
  4.12 苏合香中肉桂酸在大鼠体内的含量测定及药时曲线绘制  49-53
  4.13 苏合香中肉桂酸在大鼠体内药代动力学参数  53-55
  4.14 小结  55-56
5. 苏合香中肉桂酸在大鼠组织中分布情况研究  56-59
  5.1 溶液配制  56
  5.2 给药及组织样品处理  56
    5.2.1 给药  56
    5.2.2 组织样品供试品制备  56
  5.3 色谱条件及系统适用性试验  56
  5.4 专属性  56-57
  5.5 苏合香中肉桂酸在大鼠各组织中浓度  57-58
  5.6 小结  58-59
结果与讨论  59-61
致谢  61-62
附图  62-64
参考文献  64-66
文献综述  66-76
  参考文献  73-76
公开发表的学术论文、专著及科研成果  76-77

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 化学分析与鉴定
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