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温阳通淋法对致慢性肾盂肾炎大肠杆菌体外细胞粘附作用的影响

作　者: 曹明明
导　师: 童延清
学　校: 长春中医药大学
专　业: 中医内科
关键词: 温阳通淋法肾盂肾炎细胞粘附
分类号: R277.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：探讨温阳通淋法对致慢性肾盂肾炎大肠杆菌（UPEC）体外尿路上皮细胞粘附作用的影响。方法：按照温阳通淋原则制取水溶性中药小分子物质；临床分离UPEC J96菌；进行UPEC J96毒力基因的检测，用PCR扩增方法扩增UPEC J96毒力因子papC、Hly、Cnf1、Aer；应用改良后的尿路上皮细胞原代培养方法，培养正常人尿路上皮细胞；观察按照温阳通淋法提取的水溶性中药小分子物质对UPEC J96与原代细胞粘附作用的影响。结果：受试UPEC J96菌株毒力因子papC、Hly、Cnf1、AerPCR扩增产物于各自扩增长度处出现预期扩增带，而普通E.coli未出现扩增带，表明papC、Hly、Cnf1、Aer为临床分离UPEC J96特异毒力基因；按照改良后的尿路上皮细胞原代培养方法培养的尿路上皮原代细胞，经形态学观察符合上皮细胞形态学表现，此结果表明改良后尿路上皮细胞原代培养方法是可行的，这为尿路上皮细胞原代培养提供了一种新的方法；按照温阳通淋原则提取的中药水溶性小分子物质可有效降低UPEC J96对体外尿路上皮细胞的粘附（P<0.05）,且药物作用的强度与药物浓度呈正比（P＜0.01)；UPEC J96对宿主细胞的粘附作用在30分钟内随时间的增加而显著递增（P＜0.05），30分钟时点后的UPECJ96对宿主细胞的粘附作用仍逐渐递增，但与30分钟时点无显著性差异（P>0.05）；作为对照的普通UPEC对尿路上皮细胞粘附率与粘附指数在各个时点均为0。结论：按照温阳通淋原则提取的中药水溶性小分子物质可降低UPEC J96对体外尿路上皮细胞的粘附作用，是其治疗尿路感染的作用机制之一。

全文目录

中文摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
英文缩略语  7-8
前言  8-10
文献综述  10-17
  一温阳通淋法的提出及研究概况  10-12
  二致肾盂肾炎大肠埃希菌的毒力因子  12-15
  三原代培养技术  15-17
实验研究  17-28
  一实验方法  17-23
    1 实验材料及用品  17-18
      1.1 实验菌株、细胞株  17
      1.2 实验药品、试剂  17-18
        1.2.1 实验药品  17
        1.2.2 实验试剂  17-18
        1.2.3 实验仪器、用品  18
        1.2.4 实验溶液的配制[5  18
    2 实验方法及步骤  18-23
      2.1 检测受试 UPEC J96 毒力基因  18-20
      2.2 肾盂移行上皮细胞培养  20-22
      2.3 受试 UPEC J96 的细胞粘附试验  22-23
      2.4 统计分析  23
  二实验结果  23-28
    1 受试 UPEC J96 毒力基因的检测  23-25
    2 肾盂移行上皮细胞的原代培养  25-27
    3 原代细胞的粘附试验  27-28
讨论  28-31
结论  31-32
致谢  32-33
参考文献  33-37

温阳通淋法对致慢性肾盂肾炎大肠杆菌体外细胞粘附作用的影响

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