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阿托伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞中LXRα及其靶基因、炎症因子、粘附因子表达的影响

作　者: 顾文娟
导　师: 李江
学　校: 中南大学
专　业: 内科学
关键词: 人脐静脉内皮细胞 肝X受体 血小板内皮细胞粘附因子1 细胞间粘附因子1 白介素-6
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人脐静脉内皮细胞,在体外模拟内皮细胞的炎症状态,观察阿托伐他汀、LXR激动剂T0901317及两者合用对LPS刺激的人脐静内皮细胞中胆固醇调节受体LXRα及其靶基因ABCA1 SREBP-lc,炎症因子IL-6、粘附因子PEC AM-1 ICAM-1的mRNA表达的影响,并探讨其相关机制。方法：将人脐静脉内皮细胞用含有10%胎牛血清、1%双抗(链霉素／青霉素)的Gibco1640培养基进行培养,并按细胞计数后培养至6孔板中,进行以下干预实验。①对照组(加入2μl的PBS溶液)与脂多糖干预组(用终浓度为100ng/ml的LPS干预细胞24小时)；②阿托伐他汀干预组(用不同浓度的阿托伐他汀0.1μmol/L、1μmol/L 10μmol/L及DMSO)干预细胞2小时,然后加入脂多糖共同干预22小时；③LXR激动剂T0901317干预组(先用T0901317 1μmol/L或DMSO干预细胞2小时,然后加入脂多糖共同干预22小时)；④阿托伐他汀+T0901317组(先用DMSO.阿托伐他汀、T0901317以及阿托伐他汀和T0901317共同干预2小时,然后加入脂多糖100ng/ml共同干预22小时)。以上所有实验后收获细胞,用Trizol提取细胞总RNA,然后进行逆转录,并行real-time PCR进行半定量测定。比较各组中LXRα及其靶基因、炎症因子及粘附因子的表达变化。结果：与对照组相比,LPS可以抑制人脐静脉内皮细胞中LXRα及其靶基因ABCA1、SREBP-1 mRNA的表达,促进炎症因子IL-6及粘附因子ICAM-1、PECAM-1 mRNA的表达；阿托伐他汀可以呈浓度依赖性地上调细胞中LXRα及其相应靶基因的表达,抑制相应炎症因子及粘附因子表达,而T0901317可以明显上调细胞中LXRα、ABCA1及SREBP-1的表达,抑制IL-6、ICAM-1及PECAM-1的表达；T0901317和阿托伐他汀合用可明显增强以上基因的表达变化。结论：1、LPS可以抑制人脐静脉内皮细胞中LXRα及其靶基因的表达；2、阿托伐他汀可能部分通过LXRα信号通路抑制内皮细胞的炎症状态；3、LXR激动剂T0901317具有改善内皮细胞功能的作用；4、阿托伐他汀与LXR激动剂合用对抑制内皮细胞的炎症反应有协同效应。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
第一章 前言  10-13
第二章 材料与方法  13-19
  2.1 实验试剂和仪器  13-14
  2.2 研究方法  14-18
  2.3 统计学分析  18-19
第三章 结果  19-28
  3.1 HUVECs的培养及表面形态学变化  19-21
  3.2 脂多糖刺激HUVECs下各目的基因的表达变化  21-22
  3.3 不同浓度阿托伐他汀对于LPS刺激下目的基因表达的影响  22-24
  3.4 LXR激动剂T0901317对LPS刺激下HUVECs各目的基因表达的影响  24-26
  3.5 两药合用对LPS刺激下HUVECs各目的基因表达的影响  26-28
第四章 讨论  28-34
  4.1 LPS抑制HUVECs中LXRα及其靶基因表达,同时上调炎症因子及粘附因子的表达  31
  4.2 阿托伐他汀呈剂量依赖性上调LXRα及其靶基因表达,同时抑制炎症因子及粘附因子的表达  31-32
  4.3 LXR激动剂T0901317可以上调LXRα及其靶基因表达,同时抑制炎症因子及粘附因子的表达  32-33
  4.4 两药合用对内皮细胞中LXRα的表达及炎症状态的影响  33-34
第五章 结论  34-35
参考文献  35-38
综述  38-48
  参考文献  44-48
致谢  48-49
攻读硕士期间主要研究成果  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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