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TLR2参与调控猪链球菌诱导细胞自噬作用的研究
作 者: 李文华
导 师: 杨振国
学 校: 吉林大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 2型猪链球菌 Toll-样受体2 自噬 巨噬细胞
分类号: S855.11
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
猪链球菌是一种对养猪业危害严重的革兰氏阳性致病菌,也是重要的人兽共患病原菌。猪链球菌可引起人和多种动物的脑膜炎、败血症、关节炎、肺炎、中毒性休克样综合征和心内膜炎等疾病。TLR2在猪链球菌引起的炎症应答中起着重要的作用,一旦猪链球菌活化TLR2,可促进促炎细胞因子的表达。已有研究表明,猪链球菌感染TLR2缺失的小鼠星形胶质细胞后,促炎细胞因子的表达受到显著抑制。自噬在机体抗细胞内病原菌和病毒感染过程中发挥不可或缺的作用,并能进行抗原呈递及清除胞内病原,但自噬也能导致程序性细胞死亡(PCD)。目前的研究还发现,自噬在癌症、神经退行性变、肌病、发育和老化等方面都有可能发挥作用。此外,Toll-样受体(TLRs)和自噬在天然免疫和获得性免疫中均发挥重要作用,参与对抗病原菌及病毒感染引起的免疫应答。且已有报道证实TLRs和自噬间存在相互作用关系,如TLRs配体能诱导自噬,自噬相关蛋白也可调节TLRs信号途径。因此,研究TLR2与2型猪链球菌(SS2)诱导的细胞自噬的关系,可能为猪链球菌及某些炎性病症或免疫性疾病的防治提供一定的理论基础。本实验采用直接灌胃的方式经消化道对Balb/c小鼠灌服SS2菌液,应用ELISA方法检测SS2对小鼠肠组织细胞因子分泌的影响,荧光定量PCR方法检测SS2对肠组织细胞TLR2表达的影响,Western blot方法检测SS2对肠道细胞自噬作用的影响。结果显示,SS2可促进IL-12和IL-17A的表达,激活TLR2及其下游核转录因子NF-κB,并诱导肠组织细胞的自噬。通过TLR2抗体阻断J774A.1巨噬细胞表面TLR2,再用SS2感染细胞,采用ELISA方法检测SS2和TLR2对细胞因子分泌的影响,荧光定量PCR方法检测SS2对细胞TLR2表达的影响,Western blot方法检测SS2和TLR2对细胞自噬的影响。结果显示,SS2可促进TNF-α和IL-12的表达,激活细胞内TLR2及下游核转录因子NF-κB,并诱导细胞自噬;阻断TLR2可显著抑制SS2诱导的细胞因子的分泌和细胞自噬。综上所述,SS2能通过消化道感染小鼠,引起小鼠肠组织细胞因子、TLR2和自噬作用的改变,为以后猪链球菌感染动物模型的建立提供了理论依据;TLR2参与调控SS2诱导的细胞自噬,可能成为某些免疫性疾病、癌症或老化等疾病防治新的切入点。
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全文目录
中文摘要 4-6 Abstract 6-11 前言 11-12 第一篇 文献综述 12-28 第一章 猪链球菌 12-16 1 概述 12 2 病原及血清型 12-13 3 流行病学 13-14 4 感染途径 14 5 治疗与预防 14-16 第二章 TLRs 16-22 1 概述 16 2 TLRs 的结构和定位 16 3 TLRs 的功能 16-18 4 TLRs 信号转导途径 18-22 第三章 自噬 22-28 1 概述 22 2 自噬的作用 22-23 3 自噬标志蛋白 LC3 23 4 自噬与免疫的联系 23-25 5 自噬与 TLR 25-28 第二篇 研究内容 28-49 第一章 SS2对Balb/c小鼠肠道细胞自噬作用及TLR2表达的影响 28-41 1 材料 28-31 2 方法 31-36 3 结果 36-38 4 讨论 38-39 5 小结 39-41 第二章 TLR2 在 SS2 感染 J774A.1 细胞中的表达及其与细胞自噬的关系 41-49 1 材料 41 2 方法 41-43 3 结果 43-47 4 讨论 47-48 5 小结 48-49 结论 49-50 参考文献 50-59 导师简介 59-60 作者简介 60-61 致谢 61
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医传染病学 > 细菌病 > 球菌
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