学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

小梅山公猪生后生殖轴神经介素S及其受体的发育性变化

作　者: 赵洋阳
导　师: 雷治海
学　校: 南京农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 神经介素S NMUR-2 梅山公猪 生殖 发育 荧光定量PCR 免疫组化
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 0次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


神经介素S(Neuromedin S,NMS)是2005年分离纯化得到的一种新的神经肽,为G蛋白偶联受体NMUR-1(FM-3/GPR66)和NMUR-2(FM-4/TGR-1)的内源性配体,广泛分布于中枢神经系统及外周组织。近年来的研究证实,NMS主要通过其受体在动物体内发挥生理调节作用,包括神经内分泌、昼夜节律、能量代谢、应激和动物摄食等方面。到目前为止,关于NMS对家畜生殖功能调节方面的研究报道较少并且文献中未见有NMS对公猪生殖调控的研究报道。本文以3d、30d、60d、90d、120d的小梅山公猪为研究对象,通过荧光定量PCR和免疫组织化学技术,探索了出小梅山公猪生后生殖轴中NMS及其受体的发育性变化。结果如下：1、小梅山公猪NMS及其受体基因的克隆与分析本实验采用同源克隆技术克隆了小梅山公猪NMS及其受体(NMUR-1和NMUR-2)基因序列,并进行了生物信息学分析。结果显示,小梅山猪NMS前体蛋白原与其他物种在结构上十分保守,但与其他物种相比缺失了12个氨基酸。NMUR-1和NMUR-2的核苷酸和氨基酸序列与其它物种相比均具有较高的同源性。2、小梅山公猪生后生殖轴NMS及其受体NMUR-2mRNA的发育性变化采用荧光定量PCR技术检测了随机选取的生后3d、30d、60d、90d、120d五个不同日龄小梅山公猪下丘脑、垂体和睾丸三种组织中NMS和NMUR-2mRNA表达丰度的变化。结果显示,NMS及NMUR-2mRNA在小梅山公猪生后下丘脑、垂体、睾丸中都有表达,且呈现波动性变化。在下丘脑中,NMS及NMUR-2mRNA都呈现逐步升高的趋势,且于90d丰度最高,120d开始下降。但NMS mRNA60d时丰度略低于30d,而NMUR-2mRNA在60d时丰度高于30d。在垂体中,NMS及NMUR-2mRNA变化趋势不同,NMS呈现先降低后升高的趋势,其中60d丰度最低,120d丰度最高。而NMUR-2呈现先升高后降低的趋势,其中60d丰度最高。在睾丸中,NMS总体呈现逐步升高的趋势,但60d丰度明显低于其它d,而NMUR-2呈现先降低后升高的趋势,60d丰度最低,90d丰度最高。3、小梅山公猪生后下丘脑和睾丸组织中NMUR-2蛋白的发育性变化采用免疫组化技术检测了小梅山公猪生后下丘脑和睾丸组织中NMUR-2蛋白的发育性变化。结果显示：NMUR-2免疫阳性细胞主要存在于生后各个日龄小梅山公猪下丘脑室旁核和睾丸间质细胞中。在下丘脑室旁核中,随着日龄的增长,NMUR-2阳性细胞不断增大,数量不断增多,其中在60-90d时变化最明显。在睾丸中,生后30d到60d,睾丸间质细胞数量明显减少,但免疫阳性明显增强,90d和120d时NMUR-2免疫阳性反应与60d相似。本实验从基因和蛋白水平,研究了小梅山公猪生后各个阶段NMS及其受体NMUR-2的发育性变化。结果表明,NMS及其受体NMUR-2在小梅山公猪生后生殖轴发育过程中呈现发育性变化,提示NMS及其受体NMUR-2在生殖轴发育调控中可能发挥一定作用。调控机制有待深入研究。

全文目录


摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
英文缩写词表  12-14
引言  14-16
第一部分 文献综述  16-42
  第一章 NMS及公猪生殖发育调控研究进展  16-42
    1 NMS及其受体生物学特性  16-23
      1.1 NMS的发现  16-17
      1.2 NMS基因及蛋白的结构  17-18
      1.3 哺乳动物体内NMS的分布  18-19
      1.4 NMS受体的结构  19-21
      1.5 哺乳动物体内NMS受体的分布  21-22
      1.6 NMS受体的作用机制  22-23
    2 NMS的生物学功能  23-28
      2.1 NMS对生物节律影响  24-25
      2.2 NMS对摄食和饮水的影响  25-26
      2.3 NMS对内分泌的影响  26-28
    3 公猪生殖发育调控及NMS对生殖的影响  28-33
      3.1 公猪生殖器官的生长发育  28-30
      3.2 公猪生殖功能的调控  30-32
      3.3 NMS对生殖的调节作用  32-33
    4 研究目的与意义  33-35
    参考文献  35-42
第二部分 实验研究  42-84
  第二章 小梅山公猪NMS及其受体基因的克隆与分析  42-60
    1 材料与方法  42-48
      1.1 材料  42-43
      1.2 方法  43-48
    2 结果  48-56
      2.1 总RNA提取结果  48-49
      2.2 PCR扩增结果  49
      2.3 测序结果  49-51
      2.4 小梅山公猪NMS及其受体序列分析  51-56
    3 讨论  56-58
      3.1 基因克隆  56-57
      3.2 基因序列分析  57-58
    4 小结  58-59
    参考文献  59-60
  第三章 小梅山公猪生后生殖轴NMS及NMUR-2 mRNA的发育性变化  60-72
    1 材料与方法  60-62
      1.1 试剂与仪器  60
      1.2 试验动物  60
      1.3 实验方法  60-62
      1.4 数据统计分析  62
    2 结果  62-65
      2.1 NMS mRNA在公猪生殖轴的发育性变化  62-64
      2.2 NMUR-2 mRNA在公猪生殖轴的发育性变化  64-65
    3 讨论  65-69
      3.1 实时荧光定量PCR  65-66
      3.2 NMS及其受体在小梅山公猪生殖轴的发育性变化  66-69
    4 小结  69-70
    参考文献  70-72
  第四章 小梅山公猪生后下丘脑与睾丸NMUR-2免疫阳性细胞的发育性变化  72-84
    1 材料与方法  72-73
      1.1 实验动物  72
      1.2 实验试剂  72
      1.3 实验方法  72-73
      1.4 观察  73
      1.5 数据统计  73
    2 结果  73-77
      2.1 小梅山公猪下丘脑中NMUR-2的发育性变化  73-75
      2.2 小梅山公猪睾丸中NMUR-2的发育性变化  75-77
    3 讨论  77-80
      3.1 免疫组织化学  77-78
      3.2 小梅山公猪生后下丘脑室旁核NMUR-2的发育性变化  78-79
      3.3 小梅山公猪生后睾丸NMUR-2的发育性变化  79-80
    4 小结  80-81
    参考文献  81-84
全文结论  84-86
在读期间发表论文状况  86-88
致谢  88

相似论文

  1. Let-7 microRNA在小鼠胎肺发育时期的表达检测及其腺病毒穿梭质粒的构建,Q78
  2. 草菇采后生理生化及保鲜方法的研究,S646.13
  3. 江蓠为基质的双齿围沙蚕亲体培育及个体早期发育研究,S968.9
  4. 珊瑚共附生可培养真菌菌群多样性及其生物活性研究,R284
  5. 棉铃虫和烟夜蛾生殖生物学特性比较研究,S433
  6. 水氮耦合对宜宾植烟土壤理化性状及烟叶产质量影响的研究,S572
  7. 氮肥运筹及与留叶数互作对白肋烟生长发育和产量质量的影响,S572
  8. 温度及育苗方式对草莓生长发育的影响,S668.4
  9. 弯孢属种分子鉴定体系的建立及其在疑难种上的应用,Q949.32
  10. 微生物有机肥防治土传棉花黄萎病的效果及对根际微生物影响,S144.1
  11. 不同肥料配施对烤烟生长发育、品质及土壤养分的影响,S572
  12. 新疆紫草细胞的稀土生物学效应及遗传转化,S567.239
  13. 转录因子在棉纤维起始期的表达特征及三个转录因子基因的克隆与功能初步分析,Q943
  14. 寄主种类和人工饲养对斑痣悬茧蜂的寄生选择和子代发育的影响,S476.3
  15. 寄主体型和日龄对广大腿小蜂产卵选择和后代发育适合度的影响,S476.3
  16. 荧光定量PCR方法在土传烟草青枯病生防研究中的应用,S435.72
  17. 西藏生防芽孢杆菌鉴定及其脂肽化合物分析,S476.1
  18. 大白菜霜霉菌诱导抑制性消减cDNA文库的构建及防御相关基因的表达分析,S436.341
  19. 双组分系统基因MoSLN1和MoSKN7在稻瘟病菌生长发育与致病过程中的功能研究,S435.111.41
  20. 烟夜蛾气味受体基因和精氨酸激酶基因的克隆与表达分析,S433.4
  21. 棉铃虫与烟夜蛾寄主选择机制的比较研究,S435.622.3

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 猪
© 2012 www.xueweilunwen.com