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精浆对猪精液冷冻效果影响的研究

作　者: 刘彪
导　师: 刘忠华
学　校: 东北农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 猪精液 精浆 冷冻保存 精子活率 质膜完整性
分类号: S828
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


和其它哺乳动物精子相比,猪精子对温度变化特别敏感,在冷冻过程中极易受温度的变化而受损,导致其冷冻精液生产难度加大,极大地制约了猪冷冻精液的商业化应用。然而精液的冷冻保存打破了精液使用的时空界限,促进了多地区联合育种,同时缩短种畜生产的世代间隔,提高种畜的利用效率,节省大量饲养管理成本,对于现代畜牧业的发展具有深远的意义。因此,深入系统地研究猪精液冷冻机理和生产的关键技术,探讨影响猪冻精活率及受精能力的因素,进一步优化猪精液冷冻方法,提高精液冷冻的效率,已成为国内外养猪生产中急待解决的问题。为了评价含不同精浆浓度的冷冻保护液对猪精液冷冻复苏后活动能力和受精能力的影响,本实验分别以含精浆浓度为10%、20%和30%的冷冻保护剂处理精液,以冻前、冻后精子活力、质膜完整性,冻后IVF卵裂率和囊胚率作为检测指标,同时以含有卵黄的Tris一柠檬酸一葡萄糖(Tris-citric acid-glucose, TCG)精液冷冻基础液作为对照。结果表明,在添加不同精浆浓度的稀释液中,冻前精子活率差异不显著(P>0.05),冻后活率添加10%精浆浓度试验组活率最高(42.24±1.06%),显著高于其它组(P<0.05)；精子质膜完整性在冻前和冻后均显著高于对照组(P<0.05)；在体外受精试验中,添加10%精浆浓度的试验组囊胚率(15.69±0.74%)相对于对照组(12.54±1.04%)显著提高(P<0.05),但卵裂率无明显差别(P>0.05),与鲜精的卵裂率和囊胚率相比,两者均显著降低(P<0.05)。当含有10%精浆浓度冷冻精液解冻后用于人工受精时,与配母猪妊娠率、窝产仔数、窝产活仔数和鲜精相比,均显著降低(P<0.05)。以上结果表明,含10%精浆的冷冻保护剂能提高精子的抗冷冻能力,但冻融后受精能力与鲜精相比还有一定差距。因此,精浆对猪精液冷冻的保护作用还需进一步的研究。

全文目录


摘要  8-9
Abstract  9-11
1 引言  11-27
  1.1 家畜精液成分的组成及理化特性  11-14
    1.1.1 精液的合成  11-12
    1.1.2 精液的生物物理学特性  12-13
    1.1.3 环境条件对精子的影响  13-14
  1.2 猪精液特殊性及冷冻保存的机理  14-15
    1.2.1 猪精子细胞的特殊性  14
    1.2.2 冷冻对猪精子细胞的损伤  14-15
  1.3 影响猪精子冷冻的因素  15-18
    1.3.1 精子冷冻种内个体差异  15
    1.3.2 猪精液冷冻稀释液和冷冻保护剂  15-17
    1.3.3 猪精液稀释的影响  17-18
    1.3.4 降温速度的影响  18
  1.4 猪精液冷冻保存研究进展  18-19
  1.5 精液质量检测  19-21
    1.5.1 精子的感官检查  19
    1.5.2 精子密度  19
    1.5.3 精子活率  19-20
    1.5.4 精子质膜完整性  20-21
    1.5.5 精子顶体完整性  21
  1.6 体外受精  21-25
    1.6.1 精子的体外获能  22
    1.6.2 猪卵母细胞的体外成熟培养  22-24
    1.6.3 猪成熟卵母细胞体外受精  24-25
    1.6.4 猪IVF胚胎的体外培养  25
  1.7 人工授精  25-26
  1.8 本实验研究的内容和意义  26-27
2 试验材料与方法  27-35
  2.1 实验药品  27
  2.2 试剂配制  27
  2.3 主要仪器设备  27-28
  2.4 实验动物的选择和准备  28
    2.4.1 动物的选择  28
    2.4.2 种公猪的调教  28
  2.5 实验方法  28-34
    2.5.1 采精前的准备  28-29
    2.5.2 精液的采集  29
    2.5.3 精液质量的检测  29-30
    2.5.4 精浆的收集  30
    2.5.5 精液的冷冻  30-31
    2.5.6 精液的解冻  31
    2.5.7 体外受精  31-33
    2.5.8 人工授精  33-34
    2.5.9 妊娠诊断  34
  2.6 数据处理  34-35
3 结果与分析  35-40
  3.1 不同精浆浓度冷冻液对冻精活率的影响  35-36
  3.2 不同精浆浓度冷冻液对冻精质膜完整性的影响  36-37
  3.3 不同精浆浓度冷冻液对冻精体外受精后胚胎发育情况的影响  37-38
  3.4 冻精和鲜精输精后受胎率的比较  38-40
4 讨论  40-43
  4.1 不同精浆浓度冷冻液对冻精活率和质膜完整性的影响  40-41
  4.2 关于冻精在体外受精中的应用  41
  4.3 精浆浓度大小对精子冷冻效果的影响  41-42
  4.4 关于冻精在人工授精中的应用  42-43
    4.4.1 猪子宫角深部输精的优点  42
    4.4.2 冻精技术在生产中的应用  42-43
5 结论  43-44
致谢  44-45
参考文献  45-49
附录A  49-52
附录B  52-55
攻读硕士学位期间发表的论文  55

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 家畜 > 猪
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