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Toll样受体4在发情周期和妊娠期山羊子宫的定位和表达

作　者: 代盈盈
导　师: 赵慧英
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 基础兽医学
关键词: Toll样受体4 发情周期及妊娠期子宫免疫组织化学SP法荧光定量RT-PCR 奶山羊
分类号: S827
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

哺乳动物子宫免疫调节一直是生殖免疫学研究的热点，近年研究证实Toll样受体4（Toll-like receptor4, TLR4）在生殖系统免疫中发挥重要的作用，为了探讨TLR4在不同生理状态下子宫的分布和表达规律，为进一步研究其在子宫免疫调节中的作用及机理提供依据，本试验应用免疫组织化学法和荧光定量RT-PCR技术分别对发情周期的发情前期、发情期、发情后期、间情期以及妊娠期的妊娠早期（1-30d）、妊娠中期（31-120d）、妊娠晚期（121-150d）关中奶山羊子宫中TLR4的表达进行了研究。获得了以下研究结果：1.发情周期山羊子宫中TLR4的分布和表达。在整个发情周期山羊子宫内膜层、肌层和浆膜均有不同程度的棕黄色TLR4免疫反应阳性产物分布，主要分布在子宫内膜上皮、腺上皮和间质细胞，在子宫肌层和浆膜TLR4呈弱阳性表达。除发情前期外，在子宫内膜间质TLR4的表达比子宫内膜上皮和腺上皮高，且与其他时期相比，间情期TLR4在间质中的表达占优势(P <0.01)。TLR4蛋白在发情周期相对表达量呈发情期>间情期>发情前期>发情后期的趋势，发情期TLR4的表达量极显著高于发情后期(P <0.01)，间情期TLR4的表达显著高于发情后期(P <0.05)。荧光定量RT-PCR试验结果显示，TLR4mRNA在发情周期各个时期的表达量规律与TLR4蛋白相一致，TLR4mRNA在发情期表达量最高，发情后期表达量最低；2.妊娠期山羊子宫中TLR4的分布和表达。TLR4免疫反应阳性产物在关中奶山羊子宫的子宫内膜、肌层和浆膜均有不同程度分布，其中在子宫内膜的上皮和腺上皮中阳性细胞最多、着色最深，肌层和浆膜层中免疫细胞着色较浅；随妊娠时期推移子宫内膜上皮细胞着色逐渐变浅，固有层中子宫腺上皮细胞着色先显著增强到妊娠晚期又有所减弱；妊娠期子宫中TLR4相对表达量在妊娠期子宫内膜呈低-高-低的规律性变化，妊娠中期表达量极显著高于妊娠早期和晚期（P＜0.01），妊娠早期表达量最低且极显著低于妊娠中期和晚期（P＜0.01）；在妊娠各期山羊子宫中的TLR4mRNA的表达量变化规律与TLR4相对表达量一致。表明TLR4在发情周期及妊娠期关中奶山羊子宫的分布和表达具有一定的规律并参与不同生殖时期子宫的生殖免疫调节功能。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-10
文献综述  10-19
  第一章 Toll 样受体 4 与生殖免疫调节  10-19
    1.1 子宫的免疫调节  10-13
      1.1.1 免疫细胞在子宫生殖免疫中的作用  10-11
      1.1.2 细胞因子的免疫调节作用  11-12
      1.1.3 性激素对子宫免疫的调节  12
      1.1.4 母胎免疫调节  12-13
    1.2 TLRs 家族及 TLR4 与生殖免疫  13-19
      1.2.1 TLRs 在免疫系统中的作用  14-15
      1.2.2 TLRs 与发情周期和性激素的关系  15
      1.2.3 TLRs 与妊娠的关系  15-16
      1.2.4 TLRs 在雌性生殖免疫中的作用  16-17
      1.2.5 TLR4 在雌性生殖免疫中的作用  17-19
试验研究  19-34
  第二章发情周期奶山羊子宫中 TLR4 的分布和表达  19-28
    2.1 材料与方法  19-22
      2.1.1 试验动物  19-20
      2.1.2 主要试剂和仪器  20
      2.1.3 免疫组化 SP 法确定子宫中 TLR4 的分布  20-21
      2.1.4 RT-PCR 法检测发情周期奶山羊子宫中 TLR4 mRNA 的表达  21-22
    2.2 结果  22-26
      2.2.1 发情周期关中奶山羊子宫中 TLR4 的分布  22-23
      2.2.2 发情周期关中奶山羊子宫中 TLR4 的相对表达量变化  23
      2.2.3 发情周期关中奶山羊子宫中 TLR4 mRNA 的表达  23-26
    2.3 讨论  26-27
    2.4 小结  27-28
  第三章妊娠期关中奶山羊子宫中 TLR4 的定位和表达  28-34
    3.1 材料与方法  28-29
      3.1.1 试验动物  28
      3.1.2 主要试剂和仪器  28
      3.1.3 免疫组化 SP 法确定子宫中 TLR4 的分布  28
      3.1.4 qRT-PCR 法检测妊娠关中奶山羊子宫中 TLR4 mRNA 的表达  28-29
    3.2 结果  29-32
      3.2.1 妊娠期关中奶山羊子宫中 TLR4 的分布  29
      3.2.2 妊娠不同时期关中奶山羊子宫中 TLR4 的相对表达量变化  29-30
      3.2.3 妊娠不同时期关中奶山羊子宫中 TLR4 mRNA 的表达  30-32
    3.3 讨论  32-33
    3.4 小结  33-34
结论  34-35
参考文献  35-40
致谢  40-41
作者简介  41

Toll样受体4在发情周期和妊娠期山羊子宫的定位和表达

内容摘要

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