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桉树根际土壤功能菌多样性与抗青枯病的关系研究

作　者: 袁耀彬
导　师: 何成新; 龚庆芳
学　校: 广西师范大学
专　业: 生态学
关键词: 功能菌青枯病生物防治桉树凋落物挥发性成分
分类号: S792.39
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

桉树人工林种植面积的迅速增加,有效缓解了我国木材和林产品供需的矛盾,但由于桉树产业的迅速发展,而经营、管理、技术等方面不配套,出现地力衰退和病虫害频发等现象,成为桉树产业可持续发展面临的重要问题。本研究拟通过研究桉树根际土壤功能菌多样性与青枯病病原菌、桉树品种的相互作用关系,揭示桉树青枯病的发病规律,寻找既能提高土壤肥力有能有效抑制青枯病发生的有益菌,为有益菌应用于桉树人工林的实践奠定基础。主要研究结果如下：(1)从桉树人工林根际土壤中分离、纯化出50个菌株,其中有机磷细菌7株,分别为Y1、Y2、Y5、Y8、Y9、Y10、Y13;无机磷细菌10株,分别为W1、W4、W6、W9、 W11、W16、W17、W18、W28、W29;氨化细菌23株,分别为AN3、AN6、AN8、AN11、 AN13、AN14、AN16、AN17、AN18、AN19、AN20、AN21、AN22、AN24、AN26、AN28、 AN31、AN33、AN34、AN35、AN38、AN40、AN41;反硝化细菌10株,分别为F2、F3、F32、F33、F37、F38、F40、F41、F45、F48、(2)采用MPN稀释法比较尾巨桉、巨尾桉、赤桉、巨桉、柳桉、邓恩桉、粗皮桉、尾赤桉等人工林根际土壤的氨化细菌、反硝化细菌、有机磷细菌和无机磷细菌的数量。研究结果表明：各品种桉树土壤氨化细菌数量依次为尾巨桉>巨尾桉>赤桉>巨桉>柳桉>邓恩桉>尾赤桉>粗皮桉；反硝化细菌数量依次为巨桉>巨尾桉>柳桉>邓恩桉>赤桉>尾赤桉>粗皮桉>尾巨桉；有机磷细菌数量依次为巨尾桉>尾巨桉>柳桉>粗皮桉>邓恩桉>尾赤桉,而从巨桉和赤桉根际土壤中未检测出有机磷细菌；无机磷细菌数量依次为巨尾桉>巨桉>尾巨桉>柳桉>赤桉>邓恩桉>粗皮桉>尾赤桉。(3)通过滤纸片法测定功能细菌对桉树青枯病的作用,结果表明：Y5、Y8、W9、 W11、AN20、AN21、AN28、AN35和F38等9个菌株对青枯病病原菌具有抑制作用的菌株。,(4)通过功能菌对桉树凋落物提取物耐受性测试研究,结果表明邓恩桉、巨桉和赤桉凋落物浓度在1～10-2mg/mL时,提取物的浓度对功能微生物种群结构影响极其显著,提取物浓度为10-2～10-4mg/mL,浓度的改变对功能微生物的影响无显著差异。邓恩桉提取物浓度在1～10-4mg/mL对青枯病菌均产生促进作用,随着浓度减少,促进作用也随之减弱。巨桉在浓度为1～10-1mg/mL时具有明显促进青枯病菌生长的作用,在浓度为10-2～10-4mg/mL对青枯病的生长影响不明显。赤桉在浓度为1～10-2mg/mL均具有促进青枯病菌生长的作用,且这浓度区间差异不显著。(5)通过桉树凋落物对青枯病病原菌、拮抗青枯病的有益菌的影响研究,结果表明：邓恩桉凋落物提取物能对W11和F38的生长起促进作用；巨桉凋落物提取物对AN35和F38的生长有促进作用；赤桉凋落物提取物对W11. AN20. AN28和F38的生长有促进作用。(6)通过GC-MS测定桉树凋落物挥发性成分,结果表明尾赤桉、粗皮桉、尾巨桉、柳桉、赤桉、邓恩桉凋落物,其主要成分为桉叶油素、龙脑、α-松油醇、香橙烯、水芹烯、小茴香醇、g-松油烯、蒎烯、蒈烯、a-古芸烯、b-芹子烯、香叶烯、树油烯等。桉叶油素是尾赤桉、粗皮桉、尾巨桉、柳桉、赤桉和邓恩桉挥发性化学成分中共同成分。这6种桉树提取物中挥发油的主要成分含量具有明显的差异。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-8
目录  8-10
1 前言  10-18
  1.1 土壤微生物的研究概况  10-14
    1.1.1 土壤微生物群落的概念  10
    1.1.2 土壤微生物群落结构及生态功能  10-14
  1.2 桉树青枯病的基本概况  14-15
    1.2.1 桉树青枯病的病原菌  14-15
    1.2.2 桉树青枯病的流行和发病  15
  1.3 桉树青枯病的防治概况  15-18
    1.3.1 桉树抗病品种及品系的选育与推广  16
    1.3.2 加强检疫,控制青枯病扩散  16
    1.3.3 桉树青枯病的化学防治  16
    1.3.4 生物防治  16-18
2 研究目的与意义  18-19
3 桉树根际土壤功能菌的分离  19-28
  3.1 材料与方法  19-22
    3.1.1 培养基  19
    3.1.2 实验试剂  19-20
    3.1.3 桉树人工林土壤样品采集  20
    3.1.4 土壤功能菌的测定、分离、纯化和保存  20-21
    3.1.5 功能菌计数  21-22
    3.1.6 分离,纯化和保存  22
  3.2 结果与分析  22-26
    3.2.1 不同桉树种系桉树人工林地功能菌多样性比较分析  22-23
    3.2.2 不同品种的桉树人工林根际土壤中的氨化细菌比较  23-24
    3.2.3 不同品种的桉树人工林根际士壤中的反硝化细菌比较  24-25
    3.2.4 不同品种的桉树人工林根际土壤中的磷细菌比较  25-26
    3.2.5 菌种分离、纯化  26
  3.3 讨论  26-28
4 抗桉树青枯病菌的土壤功能细菌筛选  28-31
  4.1 材料与方法  28
    4.1.1 材料  28
    4.1.2 研究方法  28
  4.2 结果与分析  28-30
  4.3 讨论  30-31
5 功能菌和青枯病菌对各桉树种系凋落物的提取物耐受性研究  31-50
  5.1 材料与方法  31-32
    5.1.1 材料、试剂和仪器  31
    5.1.2 桉树凋落物的提取  31
    5.1.3 桉树凋落物的提取物溶液配制  31
    5.1.4 功能菌对各桉树种系凋落物的提取物耐受性研究  31-32
    5.1.5 桉树青枯病菌液吸光度的测量  32
    5.1.6 各桉树种系凋落物的提取物对桉树青枯病菌的影响  32
    5.1.7 数据分析方法  32
  5.2 结果与分析  32-49
    5.2.1 含提取物的培养液的吸光度  32-33
    5.2.2 有机磷细菌在不同品种桉树凋落物提取物的耐受性比较  33-34
    5.2.3 无机磷细菌在不同品种桉树凋落物提取物的耐受性比较  34-37
    5.2.4 氨化细菌在不同品种桉树凋落物提取物的耐受性比较  37-41
    5.2.5 反硝化细菌在不同品种桉树凋落物提取物的耐受性比较  41-44
    5.2.6 不同浓度桉树凋落物的提取物对功能细菌的作用  44-45
    5.2.7 桉树凋落物的提取物对功能细菌的作用比较  45-46
    5.2.8 青枯病菌液浓度与吸光度间关系  46-47
    5.2.9 桉树凋落物的提取物对桉树青枯病的影响  47
    5.2.10 桉树凋落物的提取物、功能菌和病原菌的关系  47-49
  5.3 讨论  49-50
6 各品种桉树凋落物的成分分析  50-58
  6.1 材料与方法  50
    6.1.1 材料、仪器和试剂  50
    6.1.2 凋落物中挥发性成分的提取  50
  6.2 气相色谱-质谱联用仪成分分析  50
    6.2.1 GC-MS条件  50
    6.2.2 分析方法  50
  6.3 结果与讨论  50-58
    6.3.1 挥发性成分及含量分析结果  50-57
    6.3.2 结果与讨论  57-58
7 展望  58-59
参考文献  59-65
致谢  65-66

桉树根际土壤功能菌多样性与抗青枯病的关系研究

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