学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

鸡源乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性研究

作　者: 罗睿
导　师: 熊焰
学　校: 四川农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 乳酸菌 分离 筛选 抑菌 细胞黏附
分类号: S852.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 80次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


本研究采集了四川多个地区健康鸡的肠道和粪便,经筛选培养后,共分离出唾液乳杆菌(Lactobacillu salivarius)、发酵乳杆菌(Lactobacillus feumentum)、懒惰乳杆菌(Lactobacillus desidiosus)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、肠乳杆菌(Lactobacillus intestinalis)和乳链球菌(Lactococcus sp)等42株细菌。对分离菌株进行产酸性能、低酸度环境和高胆盐浓度培养及高蛋白酶耐受试验,筛选出能使培养液pH值从初始的6.0分别下降至稳定的3.78、3.55、3.62和3.76,且能在pH值为2.5的酸性环境、03%胆盐及1%胰蛋白酶中存活率达到80%以上的4株菌,并分别命名为LR-1、LR-5、LR-6和LR-15。4株乳酸菌37℃培养48h发现,菌株LR-5和LR-6生长速度最快,在16h时即可达到1.79×1010和1.15×1010cfu/ml。用4株菌菌液(109cftu/ml)分别灌服18-20g左右的健康昆明鼠,每天1次,每次0.5ml,连续15天,无一只小鼠发病和死亡4株乳酸菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有明显的抑菌作用,其抑菌圈分别在17.51-22.68mm、12.74-21.29 mm和11.32-16.46mm之间。其中,菌株LR-5的对3种细菌的抑菌作用显著高于LR-1、LR-6和LR-15(p<0.01)。在混合培养抑菌试验中,4株乳酸菌与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌混合培养24h后,3种肠道细菌活菌数分别从2.01×108 cfu/ml、4.92×108 cfu/ml和3.15×108 cfu/ml下降至0×100cfu/ml。其中,菌株LR-5的抑菌作用明显强于其它3株分离的乳酸菌(p<0.05),在混合培养18h后能完全抑制3种肠道菌的生长,而分离的另3株乳酸菌完全抑制肠道菌的时间为24h。细胞黏附试验显示,LR-5对人克隆结肠腺癌细胞(Caco-2细胞)具有较强的黏附作用。正交试验结果表明,在pH值为6时,用耗尽培养上清(SCS)悬浮LR-5(109cfu/ml),37℃培养3h的黏附效果最优,平均黏附数达到59.23±1.40个菌/细胞,而LR-1、LR-6和LR-15仅为30.03±1.14、36.63+0.31和30.57±0.91个菌/细胞(p<0.01)。通过对4株乳酸菌的产酸能力、耐酸性、耐胆盐特性、胰蛋白酶耐受性、生长特性、抑菌能力和对Caco-2细胞黏附性能的综合分析,最终筛选出1株(LR-5)优良的鸡源乳酸菌菌株。经常规细菌学鉴定和16Sr RNA扩增(NCBI基因注册号为JF745115),鉴定为路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-7
1 文献综述  7-16
  1.1 鸡消化道菌群及疾病  7-10
  1.2 益生菌的研究概况  10-13
  1.3 乳酸菌的益生作用机制  13-15
  1.4 乳酸菌制剂的前景和发展方向  15-16
2 本研究的目的与意义  16
3 试验材料  16-18
  3.1 供试样品  16
  3.2 试验动物、指示菌株及试验细胞  16-17
  3.3 试验仪器  17
  3.4 试剂和药品  17
  3.5 主要培养基  17-18
  3.6 溶液配制  18
4 试验方法  18-24
  4.1 菌株的分离  18-19
  4.2 乳酸菌的筛选  19-20
  4.3 乳酸菌的生长特性研究  20
  4.4 乳酸菌菌株的安全性试验  20
  4.5 乳酸菌体外抑菌试验  20-21
  4.6 乳酸菌黏附Caco-2细胞试验  21-22
  4.7 乳酸菌的分子生物学鉴定  22-24
  4.8 数据分析  24
5 试验结果  24-35
  5.1 菌株的分离  24-27
  5.2 乳酸菌的筛选  27-30
  5.3 乳酸菌的生长特性研究  30-31
  5.4 乳酸菌菌株安全性试验结果  31
  5.5 乳酸菌体外抑菌效果  31-32
  5.6 乳酸菌黏附Caco-2细胞的条件优化试验  32-34
  5.7 乳酸菌分子生物学鉴定结果  34-35
6 讨论  35-40
  6.1 菌株的分离及鉴定  35-36
  6.2 乳酸菌的筛选  36-38
  6.3 乳酸菌生长特性及安全性  38
  6.4 乳酸菌体外抑菌特性  38-39
  6.5 乳酸菌黏附Caco-2细胞性能  39-40
  6.6 乳酸菌的分子生物学鉴定  40
7 结论  40-41
参考文献  41-44
致谢  44

相似论文

  1. 附面层抽吸对扩压叶栅气动性能影响的数值研究,TH453
  2. 缝隙式扩压叶栅流动机理研究,TK474.8
  3. 高温分离器布置对循环流化床锅炉炉内动力场影响的研究,TK229.66
  4. 苹果多酚对γ射线引起的免疫系统损伤防护作用研究,S661.1
  5. 分离镜系统的滑模变结构控制及抖振抑制,TP273
  6. 扩展青霉TS414脂肪酶在毕赤酵母的表达、纯化及其催化外消旋萘普生酯化拆分的研究,Q814
  7. 乙草胺降解株Y3B-1的分离、鉴定及降解特性研究,X172
  8. 米曲霉FS-1脂肪酶发酵优化、分离纯化与酶学特性的研究,TQ925.6
  9. 金花茶多糖的分离纯化及化学结构的研究,S567.19
  10. 三种羧酸系列金属配合物的合成及活性研究,O621.13
  11. 凡纳滨对虾虾头内源性蛋白酶分离纯化与酶学特性研究,S985.21
  12. 高产色素红曲菌株的选育及所产色素性质的研究,TS202.3
  13. 罗非鱼分离蛋白的制备及其性质研究,TS254.4
  14. 珊瑚共附生可培养真菌菌群多样性及其生物活性研究,R284
  15. 芴甲氧羰基-D-色氨酸及D-苯丙氨酸分子印迹聚合物的制备及分离性能研究,O631.3
  16. 雪莲果低聚果糖提取分离及分析研究,TS255.1
  17. 抑制植物病原菌的植物提取物筛选,S482.2
  18. 地黄内生菌的分离鉴定和产梓醇菌株的筛选及其发酵研究,TQ461
  19. 杨梅落果花色苷的提取、纯化及其抑菌活性研究,TQ914.1
  20. 二化螟温州种群Cry1Ab抗性基因频率的F2检测及氨肽酶N基因CsAPN3的克隆,S435.112.1
  21. 弯孢属种分子鉴定体系的建立及其在疑难种上的应用,Q949.32

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医基础科学 > 家畜微生物学（兽医病原微生物学）
© 2012 www.xueweilunwen.com