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油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取及其分离纯化
作 者: 余红军
导 师: 李立祥
学 校: 安徽农业大学
专 业: 食品科学
关键词: 多糖 原花青素 油茶籽壳 提取 分离
分类号: TS201.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
多糖(Polysaccharides),又称多聚糖,是由多个单糖分子缩合而成的一类结构复杂的生物大分子物质。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分,科学研究证明多糖具有抗肿瘤、免疫、降血糖、抗病毒等多种生物功能,且对机体几乎无毒副作用。它广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中。原花青素(Proanthocyanidins,简称PC),是一类由不同数量的单体黄烷-3-醇或黄烷-3,4-二醇缩合而成的多酚类化合物,具有抗氧化、抗肿瘤、降低胆固醇等多种药理活性,是一种高效、低毒、高生物利用度的天然物质。广泛分布于自然界中。油茶籽壳为油茶树(Camellia oleifera Abel)种籽的外种皮,质地比较坚硬,主要成分为纤维素和多缩戊糖等,目前油茶籽壳的利用研究仅集中在糠醛、活性炭与木糖醇的制备上;因此,本文从油茶籽壳中综合提取多糖和原花青素,并对其进行分离纯化研究,旨在利用油茶籽壳进行多糖和原花青素的开发,扩大天然活性物质的提取资源,为油茶籽壳的进一步研究和综合利用提供理论依据,促进油茶生产的发展。以油茶籽壳为材料,采用超声波进行多糖和原花青素的综合提取研究,以超声功率、料液比、乙醇浓度、浸提温度、超声时间为影响因子,进行单因素提取研究;为了更好的进行综合提取,在单因素实验的基础上,采用正交试验研究了超声功率(A)、料液比(B)、乙醇浓度(C)、浸提温度(D)和超声时间(E)对多糖和原花青素提取率的影响,方差分析表明,对综合提取影响较为显著的是乙醇浓度(C),其次是超声功率(A),料液比(B)、浸提温度(D)和超声时间(E)对综合提取影响较小,并确定了超声波综合提取最佳工艺条件为:超声功率300W,料液比1:70(g/mL),60%乙醇,浸提温度60℃,超声时间30min,在此条件下,多糖和原花青素提取率达到0.204%、2.10%。最佳工艺条件下实验的可重复性较好,结果稳定可靠。采用大孔吸附树脂和活性碳对油茶籽壳粗多糖进行静态脱色研究,筛选出HPD-200A、HPD-400A、HPD-700型大孔树脂,其对多糖的脱色率和保留率相对较高;为优化脱色条件,通过正交试验研究了树脂种类(A)、脱色时间(B)、脱色温度(C)对脱色率和多糖保留率的影响,结果表明,采用HPD-700,30min,30℃条件下,多糖脱色率为20.92%,多糖保留率为93.36%。对初步分离纯化后的油茶籽壳多糖理化性质进行分析,并利用GC-MS初步鉴定出油茶籽壳多糖中的单糖组成中含有赤藓糖、D-果糖。采用Sephadex LH-20凝胶分离油茶籽壳原花青素,依次采用60%乙醇、60%的丙酮水溶液作为洗脱液洗脱,并对所得到的乙醇洗脱液(冷冻干燥得样品1)和丙酮洗脱液(冷冻干燥得样品2)进行分析鉴定,通过UV扫描、花青素反应和HPLC等检测。结果表明:样品1、2均为原花青素,样品1、2的得率分别为19.5mg/g、12.1mg/g,纯度分别为3.8%、57.3%,判断样品1含有GA,样品2含有ECG等原花青素单体物质。
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全文目录
中文摘要 3-5 Abstract 5-9 1 文献综述 9-25 1.1 油茶籽壳概述 9 1.2 多糖和原花青素概述 9-25 1.2.1 多糖概述 9-18 1.2.2 原花青素概述 18-25 2 引言 25-27 2.1 研究目的及意义 25 2.2 研究内容和技术路线 25-27 2.2.1 研究内容 25-26 2.2.2 技术路线 26-27 3 材料与方法 27-33 3.1 材料、试剂及仪器 27-28 3.1.1 实验材料 27 3.1.2 试剂及试材 27 3.1.3 仪器 27-28 3.2 实验方法 28-33 3.2.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取 28-30 3.2.2 油茶籽壳多糖的分离纯化 30-31 3.2.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化 31-33 4 结果与分析 33-43 4.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取 33-38 4.1.1 油茶籽壳其他成分 33 4.1.2 单因素提取 33-35 4.1.3 提取参数的优化 35-38 4.2 油茶籽壳多糖的分离纯化 38-40 4.2.1 油茶籽壳多糖的脱色研究 38-40 4.2.2 油茶籽壳多糖的纯化鉴定 40 4.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化 40-43 4.3.1 Sephadex LH-20 洗脱特性 40-41 4.3.2 样品分析 41-43 5 讨论 43-46 5.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取 43 5.2 油茶籽壳多糖的脱色研究 43-44 5.3 油茶籽壳多糖的鉴定 44 5.4 葡聚糖凝胶 SEPHADEX LH-20 分离原花青素 44-46 6 结论 46-47 6.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取 46 6.2 油茶籽壳多糖的分离纯化 46 6.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化 46-47 参考文献 47-53 附录 53-54 致谢 54-55 作者简介 55
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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 一般性问题 > 基础科学 > 食品化学
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