学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

hEGF和hbFGF cDNA导入角朊细胞后的表达及对皮肤三种主要修复细胞的生物学效应

作　者: 胡大海
导　师: 陈璧
学　校: 第四军医大学
专　业: 外科学
关键词: 表皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子基因转染角朊细胞真皮成纤维细胞真皮微血管内皮细胞
分类号: R641
类　型: 博士论文
年　份: 1998年
下　载: 59次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

多肽生长因子的发现及其与创面愈合之间关系的研究，向人们展示了其巨大的临床应用潜力，但目前存在其应用时难以在创面局部维持有效的生物学浓度及应用时尚没有令人满意的联合应用的手段。分子生物学的发展，尤其是外源性某些蛋白质的cDNA在角朊细胞内成功表达及分泌的研究，向人们展示了新的途径。为探讨人角朊细胞能否有效地被改造成一种分泌所需生长因子的载体，以便最后试用于创面，选用了两种具有协调作用生长因子的基因hEGF cDNA和hbFGF cDNA，做为目的基因，将其分别克隆入真核表达载体pcDNA₃-neo内构建了真核表达载体pcDNA₃-hEGF和pcDNA₃-hbFGF；利用脂质体转染法，将其分别导入体外培养的正常人角朊细胞，利用G418（geneticin）对转染后的细胞进行筛选纯化后，经核酸分子原位杂交确认是两个载体均被成功地导入正常培养的人角朊细胞内，进一步应用免疫细胞化学，放射免疫分析及中和抗体拮抗实验；证明两种转基因后的人角朊细胞，其胞浆内分别有hEGF和hbFGF翻译表达，转基因hEGF cDNA的角朊细胞可向胞外较高水平地稳定释放hEGF，初步鉴定转基因后的角朊细胞有特异性hEGF和hbFGF活性物质向胞外释放。

全文目录

一、英文缩写词表  4-5
二、中文摘要  5-8
三、英文摘要  8-11
四、文献综述  11-40
五、前言  40-42
六、真核细胞表达载体pcDNA3-hEGF和pcDNA3-hbFGF的构建  42-56
七、PcDNA_3-hEGF和pcDNA_3-hbFGF导入培养的正常人角朊细胞  56-71
八、含pcDNA_3-hEGF和pcDNA_3-hbFGF的HK细胞表达及分泌hEGF和hbFGF的观察分析  71-85
九、转基因HK培养细胞对NHK、HDFb和真皮微血管内皮细胞(HDMEC)生长增殖生物学特性的影响  85-98
十、转基因HK细胞培养上清对NHK、HDFb细胞EGF受体(EGFR)和bFGF受体(bFGFR)的调节作用的初步研究  98-106
十一、讨论  106-114
十二、致谢  114-115
十三、参考文献  115-131

hEGF和hbFGF cDNA导入角朊细胞后的表达及对皮肤三种主要修复细胞的生物学效应

内容摘要

全文目录

相似论文