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以角朊细胞作靶细胞进行基因转染、基因表达的实验研究
作 者: 廖文俊
导 师: 刘彦仿;刘玉峰
学 校: 第四军医大学
专 业: 病理学
关键词: 角朊细胞 基因治疗 β-半乳糖苷酶基因 绿色荧光蛋白基因 人白细胞介素2基因
分类号: R346
类 型: 博士论文
年 份: 1998年
下 载: 34次
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内容摘要
基因治疗研究已成为近十年来医学生物学界的一项热点研究课题。虽然已取得很大进展,但仍存在一些问题亟待解决,其中靶细胞的选择便是影响基因治疗效果的关键问题之一。 随着对皮肤角朊细胞研究的深入和发展,人们已发现角朊细胞具有许多未曾被认识到的功能和活性,它除了符合基因治疗中靶细胞的基本条件外,还具有许多其它类型靶细胞所不具备的优点,如取材方便,容易获得,易于回植,便于观察和调控基因表达情况及不良反应,且角朊细胞本身就能分泌一些细胞因子和生长因子,因而表皮被认为是一种理想的靶器官,以角朊细胞作为靶细胞进行基因治疗的设想也随之诞生,并受到了生物学界的重视,这一技术被称为角朊细胞基因治疗(Keratinocyte gene therapy)。 为研究角朊细胞基因转染的可行性,本实验拟进行①正常人皮肤角朊细胞的分离、原代培养、传代培养,观察角朊细胞的生长特性及代谢活性,为基因转染做好靶细胞准备;②β-半乳糖苷酶(β-gal)、绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染角朊细胞的瞬时表达检测;③人白细胞介素2(IL-2)基因转染角朊细胞的稳定表达检测。 实验中用胰酶消化法分离正常人皮肤角朊细胞,以无血清培养基进行
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全文目录
英文缩写词 4-5 中文摘要 5-7 英文摘要 7-10 前言 10-11 文献回顾 11-28 第一部分:角朊细胞的功能及体外培养 11-16 一、表皮的细胞因子网络及其作用 11-12 二、角朊细胞与内分泌 12-13 三、角朊细胞的体外培养 13-16 第二部分:角朊细胞基因治疗 16-28 一、角朊细胞作为靶细胞的优点及可行性 17-18 二、角朊细胞的基因转移方法 18-21 三、基因转移途径 21-22 四、角朊细胞基因治疗的几个重要环节 22-25 五、角朊细胞基因治疗的应用展望 25-28 实验研究 28-58 第一部分:正常人皮肤角朊细胞的无血清培养 28-34 材料和方法 28-30 结果 30-32 讨论 32-34 第二部分:β-gal、EGFP基因转染角朊细胞的瞬时表达检测 34-43 材料和方法 34-38 结果 38-39 讨论 39-43 第三部分:IL-2基因转染角朊细胞的稳定表达检测 43-58 材料和方法 43-52 结果 52-55 讨论 55-58 小结 58-59 致谢 59-60 参考文献 60-68 照片 68-72 学习期间论丈发表情况 72
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体生物化学、分子生物学
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