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以角朊细胞作靶细胞进行基因转染、基因表达的实验研究

作 者: 廖文俊
导 师: 刘彦仿;刘玉峰
学 校: 第四军医大学
专 业: 病理学
关键词: 角朊细胞 基因治疗 β-半乳糖苷酶基因 绿色荧光蛋白基因 人白细胞介素2基因
分类号: R346
类 型: 博士论文
年 份: 1998年
下 载: 34次
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内容摘要


基因治疗研究已成为近十年来医学生物学界的一项热点研究课题。虽然已取得很大进展,但仍存在一些问题亟待解决,其中靶细胞的选择便是影响基因治疗效果的关键问题之一。 随着对皮肤角朊细胞研究的深入和发展,人们已发现角朊细胞具有许多未曾被认识到的功能和活性,它除了符合基因治疗中靶细胞的基本条件外,还具有许多其它类型靶细胞所不具备的优点,如取材方便,容易获得,易于回植,便于观察和调控基因表达情况及不良反应,且角朊细胞本身就能分泌一些细胞因子和生长因子,因而表皮被认为是一种理想的靶器官,以角朊细胞作为靶细胞进行基因治疗的设想也随之诞生,并受到了生物学界的重视,这一技术被称为角朊细胞基因治疗(Keratinocyte gene therapy)。 为研究角朊细胞基因转染的可行性,本实验拟进行①正常人皮肤角朊细胞的分离、原代培养、传代培养,观察角朊细胞的生长特性及代谢活性,为基因转染做好靶细胞准备;②β-半乳糖苷酶(β-gal)、绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染角朊细胞的瞬时表达检测;③人白细胞介素2(IL-2)基因转染角朊细胞的稳定表达检测。 实验中用胰酶消化法分离正常人皮肤角朊细胞,以无血清培养基进行

全文目录


英文缩写词  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
前言  10-11
文献回顾  11-28
  第一部分:角朊细胞的功能及体外培养  11-16
    一、表皮的细胞因子网络及其作用  11-12
    二、角朊细胞与内分泌  12-13
    三、角朊细胞的体外培养  13-16
  第二部分:角朊细胞基因治疗  16-28
    一、角朊细胞作为靶细胞的优点及可行性  17-18
    二、角朊细胞的基因转移方法  18-21
    三、基因转移途径  21-22
    四、角朊细胞基因治疗的几个重要环节  22-25
    五、角朊细胞基因治疗的应用展望  25-28
实验研究  28-58
  第一部分:正常人皮肤角朊细胞的无血清培养  28-34
    材料和方法  28-30
    结果  30-32
    讨论  32-34
  第二部分:β-gal、EGFP基因转染角朊细胞的瞬时表达检测  34-43
    材料和方法  34-38
    结果  38-39
    讨论  39-43
  第三部分:IL-2基因转染角朊细胞的稳定表达检测  43-58
    材料和方法  43-52
    结果  52-55
    讨论  55-58
小结  58-59
致谢  59-60
参考文献  60-68
照片  68-72
学习期间论丈发表情况  72

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体生物化学、分子生物学
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