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应用免疫学方法和聚合酶链反应技术检测微量残留急性白血病细胞的研究

作　者: 乐晓峰
导　师: 杨天楹
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 临床血液学
关键词: 微量残留白血病双色免疫荧光染色聚合酶链反应 N-ras癌基因 CD10 急性白血病
分类号: R733.71
类　型: 博士论文
年　份: 1991年
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内容摘要

微量残留白血病细胞(MRLC)的检测是急性白血病(AL)研究中的重要问题，具有很大的应用价值。如确定高危组患者，早期检测复发，提高自身骨髓移植(ABMT)效果(决定采髓的最好时机和检测移植骨髓中MRLC)等。在现有的检测方法(细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、克隆形成试验和分子生物学等)中，免疫学标志分析法(双色免疫荧光染色，DCIF)和分子生物学方法(聚合酶链反应，PCR)是检测MRLC的二种敏感方法。本文建立了二种实用性检测MRLC的方法。一种是用于CD10~+急性淋巴细胞白血病(ALL)检测MRLC的DCIF联合密度梯度离心剂Percoll(简称DCIF法)，检测微量CD10~+淋巴细胞的敏感度是1／10000。检测CD10~+MRLC的敏感度是1／1000～1／10000，特异性较强，临床检测了Common型ALL(C-ALL)患者10例，在其中4例临床已判断完全缓解(CR)的外周血标本中检出0.08％或以上的MRLC，1例比临床提前6周预测了白血病细胞的重现。另一种是用于检测以N-ras癌基因点突变为克隆标志的急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓内MRLC的PCR技术加寡核苷酸探针杂交法(简称PCR法)，可扩增出10pg的微量DNA。检测MRLC敏感水平是0.5％～0.1％，特异性强，临床筛选检测了10例AML患者，证实其中3例出现N-ras基因第13位点突变(突变率30％)，随访其中2例的初步结果表明N-ras点突变可作为白血病细胞克隆标志用于检测MRLC。本文介绍的两种MRLC检测方法在国内是首次报道，检测敏感度和特异性达到国际上同类研究的先进水平，对进一步开展MRLC的临床和实验研究具有理论和临床应用价值。

全文目录

应用免疫学方法和聚合酶链反应技术检测微量残留急性白血病细胞的研究(论文)  4-53
  中文摘要  4-5
  英文摘要  5-6
  前言  6-7
  第一部分：应用免疫学方法检测微量残留急性淋巴细胞白血病的研究  7-29
    材料与方法  8-19
    结果  19-27
    讨论  27-29
  第二部分：应用聚合酶链反应技术检测微量残留急性髓细胞白血病的研究  29-46
    材料与方法  30-40
    结果  40-44
    讨论  44-46
  小结  46
  展望  46-48
  致谢  48-49
  参考文献  49-53
微量残留白血病细胞的检测(综述Ⅰ)  53-101
  参考文献  89-101
CALLA抗原(CD10)与急性淋巴细胞白血病(综述Ⅱ)  101-121
  参考文献  117-121
白血病与ras癌基因突变(综述Ⅲ)  121-145
  参考文献  142-145

应用免疫学方法和聚合酶链反应技术检测微量残留急性白血病细胞的研究

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