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头穴针刺对脑出血大鼠脑组织能量代谢时空效应特性的实验研究

作　者: 鲍春龄
导　师: 东贵荣
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 脑出血能量代谢针刺效应线粒体功能葡萄糖载体蛋白1 琥珀酸脱氢酶
分类号: R245
类　型: 博士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的:通过百会透太阳穴针刺对脑出血大鼠脑组织能量代谢的影响研究,证明针刺的时空效应特性。方法:健康大鼠随机分为正常、假手术、模型、针刺四组。采用胶原酶/肝素联合注入法建立模型。对脑多部位——血肿周围A、对侧B(左尾状核)、血肿远隔C(右海马)和多时点(24h、72h、168h)进行观察。1.生化法测定脑线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na~+-K~+-ATPase及脑组织乳酸(LA)的含量。2.电镜观察线粒体超微结构。3.免疫组化观察葡萄糖载体蛋白1(G1UT1)表达。4.TUNEL法观察凋亡变化。5.RT-PCR法观察H~+-ATPaseβ亚基mRNA及G1UT1 mRNA表达。结果:1.除GLUT1,均呈现为血肿周围、远隔、对侧的病变依次减轻特点。对侧部位仅24h轻微变化;远隔部位除乳酸在24h升高外,变化均较周围部位晚。2.三个时间点间差异显著,其中乳酸和凋亡的高峰在72h,余指标均随时间加重。3.针刺治疗后,对侧未出现异常变化。除24h周围见乳酸升高、Na~+-K~+-ATP酶下降、凋亡发生和远隔部位乳酸升高外,余变化发生均晚于模型组。模型组、针刺组组间差异显著。结论:1.脑出血后存在能量物质匮乏时间恶化性和空间抑制性泛化。2.针刺能在时间上推迟能量物质衰竭的发生,对多部位有良性调节作用。3.针刺具有时空效应。4.针刺即刻效应的机制是解除病灶能量抑制性泛化的时空效应的结果。

全文目录

英文缩略词表  6-7
中文摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-12
第一部分文献综述  12-36
  综述1、针灸效应基础实验研究现状  12-26
  综述2、脑出血后脑的能量代谢障碍与神经细胞损伤及针刺的调节作用  26-36
第二部分实验研究  36-60
  实验一头穴针刺对脑出血后脑组织线粒体超微结构的电镜观察  36-40
    1 实验材料  36
    2 实验方法  36-38
      2.1 组别设计  37
      2.2 观测部位和时间分组  37
      2.3 造模方法  37
      2.4 针刺方法  37-38
      2.5 线粒体超微结构观察  38
    3 统计学处理  38
    4 结果  38-40
  实验二头穴针刺对脑出血后脑组织LA和线粒体SDH、Na~+-K~+-ATPase的影响研究  40-47
    1 实验材料  40
    2 实验方法  40-42
      2.1 组别设计  41
      2.2 观测部位和时间分组  41
      2.3 造模方法  41
      2.4 针刺方法  41
      2.5 大鼠神经功能缺损评分  41
      2.6 线粒体提取  41-42
      2.7 线粒体琥珀酸脱氢酶SDH比活性测定  42
      2.8 Na~+-K~+-ATPase测定  42
      2.9 乳酸(LA)测定  42
    3 统计学处理  42
    4 结果  42-47
      4.1 针刺对脑出血大鼠神经功能缺损评分的影响  42-43
      4.2 针刺对脑出血后脑组织线粒体SDH活性的影响  43-44
      4.3 针刺对脑出血后脑组织线粒体Na~+-K~+-ATP酶的影响  44-45
      4.4 针刺对脑出血后脑组织乳酸LA含量的影响  45-47
  实验三头穴针刺对脑出血后脑组织的病理形态学影响研究  47-54
    1 实验材料  47
    2 实验方法  47-49
      2.1 组别设计  47-48
      2.2 观测部位和时间分组  48
      2.3 造模方法  48
      2.4 针刺方法  48
      2.5 组织病理学检查  48
      2.6 HE染色方法  48-49
      2.7 原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡方法  49
      2.8 免疫组化染色方法  49
    3 统计学处理  49-50
    4 结果  50-54
      4.1 针刺对脑出血后脑组织病理形态学的影响  50-51
      4.2 针刺对脑出血后脑组织GLUT1表达的影响  51-53
      4.3 针刺对脑出血后脑组织TUNEL阳性细胞表达变化的影响  53-54
  实验四头穴针刺对脑出血后脑组织GLUT1mRNA、H~+-ATPase β亚基mRNA表达的影响研究  54-60
    1 实验材料  54-55
    2 实验方法  55-57
      2.1 组别设计  55
      2.2 观测部位和时间分组  55
      2.3 造模方法  55
      2.4 针刺方法  55
      2.5 RT-PCR步骤  55-57
    3 统计学处理  57
    4 结果  57-60
      4.1 针刺对脑出血后脑组织GLUT1mRNA表达变化的影响  57-58
      4.2 针刺对脑出血后脑组织线粒体H~+-ATPase β亚基mRNA表达的影响  58-60
讨论  60-76
  1 头穴针刺治疗急性脑出血的临床及实验基础  60
  2 方法学评价  60-62
    2.1 组别设计  60-61
    2.2 模型制备  61
    2.3 选穴原则  61
    2.4 电针疗法的选择  61-62
  3 本课题组在头穴针刺治疗急性脑出血方面的研究  62-63
  4 实验指标选取依据及意义  63-64
  5 结果分析  64-73
    5.1 血肿周围部位病变规律及原因  64-70
    5.2 血肿对侧部位病变规律及原因  70-71
    5.3 血肿同侧远隔区部位的病变规律及原因  71-72
    5.4 头穴针刺时空治疗作用  72-73
  6 头穴针刺时空效应的理论与实验依据  73-76
    6.1 脑出血后存在多部位的病理变化  74
    6.2 头针针刺机理  74
    6.3 针刺具有时空效应  74-75
    6.4 针刺时空效应的实现途径  75-76
结论  76-77
致谢  77-78
参考文献  78-87
攻读博士学位期间发表的论文  87-88
原创性声明  88
关于论文使用授权的说明  88-89
个人简历  89-90
附图  90-102

头穴针刺对脑出血大鼠脑组织能量代谢时空效应特性的实验研究

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