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黄连解毒汤抗肿瘤活性成分及作用机制研究

作　者: 孙健
导　师: 周秋丽
学　校: 吉林大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 黄连解毒汤定性定量入血成分抗肿瘤汉黄芩素凋亡
分类号: R285
类　型: 博士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

本实验首先建立HPLC-UV/MS测定方法,对黄连解毒汤整体定性,多指标定量分析,确定各色谱峰的来源,并在此基础上对所制备含药血清进行多成分的定性、定量分析,血药浓度-时间曲线分析;测定黄连解毒汤对小鼠移植性肿瘤H22、S180、MFC的抑制作用,大鼠含药血清对10种人瘤株的抑制作用;判断吸收入血的发挥抗肿瘤作用的主要有效成分;多指标检测主要有效成分的抗肿瘤作用。以HPLC-UV归属了黄连解毒汤21个色谱峰的药材来源,通过HPLC-UV/ MS对其中11个主要色谱峰进行了指认,其中10种成分吸收入血,各药材合煎后的血药浓度-时间曲线发生改变;黄连解毒汤对小鼠移植性肿瘤H22、S180、MFC的确有抑制作用,高剂量组抑制率均超过30%,含药血清对10种人瘤株有不同程度的抑制作用,原形入血成分中,汉黄芩素为抑制人肺腺癌SPC-A1增殖的主要有效成分,通过集落形成实验、周期分析、hoechst33342/PI、AO/EB双染、电镜,结合琼脂糖凝胶电泳检测阶梯状条带,Annexin-V/PI、线粒体膜电位等检测方法确定汉黄芩素诱导人肺腺癌SPC-A1凋亡,抑制其分裂和集落形成能力,阻滞周期等作用。实验的创造性成果在于:系统的研究了黄连解毒汤及其含药血清抗肿瘤作用的物质基础,结合多成分血药浓度-时间曲线判断黄连解毒汤体内抗肿瘤主要有效成分,从体内实验与体外实验两个方面,整体水平、细胞水平与分子水平三个层次,阐述了黄连解毒汤的抗肿瘤作用及汉黄芩素抗肿瘤作用机制。

全文目录

第一章绪论  7-59
  第一节中药活性成分及研究方法探索  7-23
  第二节天然抗肿瘤活性成分筛选及研究概述  23-41
  参考文献  41-59
第二章化学成分分析  59-92
  第一节黄连解毒汤各成分定性、定量  59-73
    材料与方法  60-62
    结果  62-71
    讨论  71-73
  第二节黄连解毒汤入血成分分析  73-91
    材料与方法  73-77
    结果  77-88
    讨论  88-91
  参考文献  91-92
第三章抗肿瘤作用分析  92-146
  第一节黄连解毒汤体内抗肿瘤作用研究  92-104
    材料与方法  93-96
    结果  96-102
    讨论  102-104
  第二节黄连解毒汤抗肿瘤有效成分分析  104-113
    材料与方法  104-107
    结果  107-110
    讨论  110-113
  第三节汉黄芩素对人肺腺癌细胞SPC-A1 抑制作用及机制研究  113-143
    材料与方法  114-119
    结果  119-138
    讨论  138-143
  参考文献  143-146
第四章结论  146-148
攻博期间发表的学术论文及其他成果  148-149
致谢  149-150
中文摘要  150-155
Abstract  155-158

黄连解毒汤抗肿瘤活性成分及作用机制研究

内容摘要

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