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水稻糊化温度特性的理化基础与分子遗传学研究
作 者: 舒小丽
导 师: 舒庆尧
学 校: 浙江大学
专 业: 生物物理学
关键词: 水稻 淀粉 糊化温度 SSIIa基因 Wx基因 SSR标记 SNP标记 标记辅助选择
分类号: S511
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
糊化温度(GT)是决定稻米蒸煮食用品质的一个重要指标,是指淀粉颗粒在水溶液中加热,开始吸水并发生不可逆膨胀、其自然的晶体结构被破坏,双折射性(淀粉表面开始丧失特有的极化相转变为溶解态)丧失时的临界温度。GT通常采用碱裂解法来间接测定,用碱消值(alkali spreading value,ASV)表示:也可利用差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)进行直接分析。本研究以一个水稻低GT突变体(黄玉B)及其它不同GT的水稻品种为材料,分析了淀粉的理化特性与GT性状的关系,开展了GT基因的分子定位,分析了GT与枝链淀粉链长分布的关系,确定了不同遗传群体中控制GT性状的分子遗传学和理化基础;在不同GT类型的水稻品种中开展了与ALK(SSⅡα)相邻SSR的分析,以验证GT遗传控制的机制和确定适用于辅助选择育种的SSR分子标记的筛选策略;最后,对不同GT类型的几个水稻品种的SSⅡα基因进行了测序分析,设计了一个SSⅡα基因SNP标记,并进一步用SSⅡα和Wx基因的SNP标记分析了不同品种的基因型及其GT之间的关系。主要研究结果如下: 1) 突变体黄玉B与其亲本Ⅱ-32B的ASV及各DSC参数存在极显著差异,前者的ASV达7级左右,To,Tp,Tc分别为64.1℃,69.2℃和77.8℃,而后者相应地分别为2级,和74.0℃,77.2℃和82.5℃。黄玉B的枝链淀粉链长比值(DP≤12/DP≤24,ACR)为0.235,Ⅱ-32B的仅为0.157。两者的ACR与ASV呈显著正相关,而和To,Tp,Tc显著负相关。X-衍射分析表明,Ⅱ-32B淀粉颗粒的结晶度高于黄玉B和低GT品种秀水110,这可能是高GT的物理基础。 2) 粳稻品种秀水110的ASV和泥青粘与黄玉B的相似,但其ACR大于后两者,同时秀水110的To,Tp,Tc也极显著低于后两者。由此表明,在Ⅱ-32B和这3个品种中,ACR和GT存在负相关关系。但是,另一个籼稻品种R3027的ACR与黄玉B和泥青粘相似,而GT显著高于后两者,表明枝链淀粉链长分布的差异不能完全解释这3个品种间的GT差异。 3) GT的经典遗传学特性。黄玉A和黄玉B的ASV及DSC参数相似,表明GT的细胞质效应不明显,而黄玉A/Ⅱ-32BF1的GT要较Ⅱ32A/黄玉BF1略低,且均与Ⅱ-32B的GT无显著差异,表明高GT对低GT呈显性,并具胚乳三倍体
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全文目录
图一览表 9-10 表一览表 10-11 缩略语 11-12 摘要 12-15 ABSTRACT 15-19 第一章 文献综述 19-44 1.1 淀粉组成和特性 19-23 1.1.1 淀粉组成 19-21 1.1.2 淀粉颗粒结构 21 1.1.3 淀粉特性 21-23 1.2 淀粉生物合成 23-28 1.2.1 淀粉合成过程中的关键酶 24-27 1.2.1.1 AGP 24-25 1.2.1.2 SS 25-26 1.2.1.3 SBE 26-27 1.2.1.4 DBE 27 1.2.2 水稻中淀粉的生物合成 27-28 1.2.2.1 直链淀粉的合成 27 1.2.2.2 水稻中枝链淀粉的合成 27-28 1.3 水稻GT的研究进展 28-35 1.3.1 GT的测定 28-29 1.3.2 影响 GT的因素 29-30 1.3.2.1 品种间差异 29 1.3.2.2 环境温度的影响 29-30 1.3.3 淀粉与GT的关系 30-32 1.3.3.1 AAC与 GT 30 1.3.3.2 枝链淀粉与GT 30-31 1.3.3.3 淀粉颗粒与 GT 31-32 1.3.4 GT的遗传研究 32-35 1.3.4.1 GT的经典遗传研究 32-33 1.3.4.2 GT的分子遗传研究 33-34 1.3.4.3 GT与SSIIa 34-35 1.4 水稻基因作图及标记辅助选择育种 35-43 1.4.1 SSR序列的分布 35-36 1.4.2 遗传图谱 36-37 1.4.3 SSR分子标记的发展 37-38 1.4.4 品质相关基因特异性分子标记 38-39 1.4.5 农艺性状相关分子标记 39-41 1.4.6 分子标记辅助选择 41-43 1.5 论文研究的目的和主要内容 43-44 第二章 不同糊化温度水稻淀粉理化特性研究 44-56 2.1 材料和方法 44-46 2.1.1 实验材料 44 2.1.2 样品处理 44-45 2.1.3 碱消值分析 45 2.1.4 DSC分析 45 2.1.5 RVA分析 45 2.1.6 AAC测定 45-46 2.1.7 X—衍射 46 2.1.8 枝链淀粉链长分布 46 2.1.9 数据分析 46 2.2 结果分析 46-53 2.2.1 糊化温度 46-48 2.2.2 AAC含量及淀粉粘滞特性 48-50 2.2.3 枝链淀粉链长分布 50-52 2.2.4 淀粉晶体特性 52-53 2.3 讨论 53-55 2.4 结论 55-56 第三章 水稻糊化温度特性的分子遗传及生化研究 56-71 3.1 材料和方法 57-60 3.1.1 植物材料及群体构建 57 3.1.2 GT性状的遗传分析 57 3.1.3 DNA提取 57-58 3.1.4 SSR分析 58 3.1.5 Wx基因的SSR及PCR-AccI分析 58-59 3.1.6 遗传距离和连锁图谱的绘制 59 3.1.7 枝链淀粉结构分析 59 3.1.8 GBSSI和SSIIa蛋白分析 59-60 3.2 结果分析 60-68 3.2.1 GT性状遗传 60-61 3.2.2 分子定位 61-65 3.2.3 淀粉特性及颗粒结合蛋白 65-68 3.3 讨论 68-70 3.4 结论 70-71 第四章 水稻SSIia基因相邻微卫星标记分析 71-82 4.1 材料和方法 71-73 4.1.1 材料 71-72 4.1.2 碱消值分析 72 4.1.3 SSR分析 72 4.1.4 数据分析 72-73 4.2 结果与分析 73-79 4.2.1 碱消值 73-75 4.2.2 微卫星多态性 75-77 4.2.3 不同类型材料的SSR分析 77-78 4.2.4 用SSR区别不同GT品种的能力 78-79 4.3 讨论 79-81 4.4 结论 81-82 第五章 SSIIA基因及其蛋白结构分析和SNP标记的应用 82-96 5.1 材料方法 82-85 5.1.1 材料 82-83 5.1.2 方法 83-84 5.1.3 序列分析 84 5.1.4 蛋白质的结构预测 84 5.1.5 SNP标记分析 84-85 5.1.6 相关性分析 85 5.2 结果与分析 85-93 5.2.1 SSIIa基因序列 85-87 5.2.2 SSIIa基因序列比对 87 5.2.2 SSIIa蛋白氨基酸序列分析 87-88 5.2.3 SSIIa蛋白结构分析 88-89 5.2.4 SSIIa和Wx基因型与糊化温度特性 89-92 5.2.5 SSIIa SNP标记在黄玉B/II32B F_2群体中的分离 92-93 5.2.6 SNP标记与ASV相关性分析 93 5.3 讨论 93-95 5.4 结论 95-96 参考文献 96-113 附录 113-115
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 稻
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