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1，25-（OH）_2D_3作为生物活性因子在组织工程骨中的应用

作　者: 李涛
导　师: 唐天驷
学　校: 苏州大学
专　业: 骨科学
关键词: 人骨髓间质干细胞血管内皮细胞细胞共培养组织工程珊瑚羟基磷灰石人工骨 1,25-（OH）2D3 骨髓间质成骨细胞细胞培养异位成骨人骨髓间质成骨细胞共培养细胞活性碱性磷酸酶活性骨钙素含量人骨髓间质干细胞成骨诱导脐静脉血管内皮细胞
分类号: R318.0
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

第一部分人骨髓间质成骨细胞及脐静脉血管内皮细胞的体外培养目的探讨人骨髓间质成骨细胞及脐静脉血管内皮细胞体外培养及扩增的方法,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源。方法抽取健康成人骨髓,梯度离心法获得单核细胞。用含体积分数为10%小牛血清的RPMI-1640作为培养液,于37℃恒温,5%CO₂浓度,饱和湿度培养箱培养。传2代人骨髓间质干细胞加诱导液(RPMI-1640完全培养液中含地塞米松10^-8mol/L、甘油磷酸钠10mmol/L、维生素C 50mg/L)诱导成为骨髓间质成骨细胞。无菌条件下取新鲜脐带,胶原酶Ⅱ灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞,当原代培养细胞80%以上汇合后,用胰蛋白酶消化传代。分别对两种细胞进行鉴定。结果体外培养的人骨髓间质成骨细胞及脐静脉血管内皮细胞生长良好,表现出各自较典型的形态特征。骨髓间质成骨细胞用诱导液连续培养14天,在倒置显微镜下观察到明显的矿化结节形成;脐静脉血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色阳性。结论人骨髓间质成骨细胞及脐静脉血管内皮细胞取材方便,易于分离、培养、扩增,所培养的细胞体外生长稳定,可作为骨组织工程的种子细胞。第二部分 1,25-（OH）₂D₃在成骨细胞与血管内皮细胞联合培养中的作用目的研究人骨髓间质成骨细胞（hMSO）与脐静脉血管内皮细胞（hUVEC）共培养时,1,25-（OH）₂D₃对细胞活性及碱性磷酸酶（ALP）活性、骨钙素（OCN）含量的影响。方法以相同总细胞数接种24孔细胞培养板,1,25-（OH）₂D₃

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引言  11-15
第一部分人骨髓间质成骨细胞及脐静脉血管内皮细胞的体外培养  15-32
第二部分 1，25-(OH)_2D_3在成骨细胞与血管内皮细胞联合培养中的作用  32-43
第三部分 1，25-(OH)_2D_3在组织工程骨构建中的作用  43-57
第四部分以1，25-(OH)_2D_3为活性因子构建组织工程骨的异位成骨  57-73
结论  73-74
综述 1，25(OH)_2D_3作为活性细胞因子在组织工程骨中的应用  74-90
攻读学位期间发表论文情况  90-91
致谢  91

1，25-（OH）_2D_3作为生物活性因子在组织工程骨中的应用

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